產(chǎn)品是為“穿孔萃取儀”而配套設(shè)計(jì),是專門支撐“穿孔萃取儀”的專用配套支架,其特點(diǎn)是:可固定三個(gè)多孔器,方便使用;其設(shè)計(jì)合理,結(jié)構(gòu)簡單,便于安裝,運(yùn)輸安全。
人抗核骨架蛋白抗體(RNPAb)elisa檢測(cè)試劑盒用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的含量。試劑盒嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試劑不同批號(hào)組分不得混用。
ELISA法測(cè)定試劑盒參數(shù)規(guī)格:
中文名稱:人抗核骨架蛋白抗體(RNPAb)elisa檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:96T/48T
性狀:液體
存儲(chǔ):4℃保存6個(gè)月
運(yùn)輸方式:快遞發(fā)貨
檢測(cè)標(biāo)本:血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,組織勻漿等
檢測(cè)方法:雙抗夾心法
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上海常斤生物ELISA試劑盒廠家主營如下:
試劑盒:大鼠Elisa試劑盒,小鼠Elisa試劑盒,人Elisa試劑盒,犬Elisa試劑盒,魚Elisa試劑盒,雞Elisa試劑盒,牛Elisa試劑盒、其他動(dòng)物類Elisa試劑盒、植物Elisa試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、 免疫組化試劑盒、金標(biāo)檢測(cè)試劑盒、生化試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒。
抗體:一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體;免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體。抗體:一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體;免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體。
動(dòng)物血清:內(nèi)皮細(xì)胞專用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。動(dòng)物血清:內(nèi)皮細(xì)胞專用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。
細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞。細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞。
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒工作原理:
1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可極大地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒使用方法:
夾心法
夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原,一般之操作步驟為:
1、將具有專一性之抗體固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
2、加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)之抗原,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);
3、洗去多余待測(cè)檢體,加入另一種對(duì)抗原專一之一次抗體,與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié);
4、洗去多余未鍵結(jié)一次抗體,加入帶有酵素之二次抗體,與一次抗體鍵結(jié);
5、洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酵素受質(zhì)使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。
間接法
間接法常用于檢測(cè)抗體,一般之操作步驟為:
1、將已知之抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余之抗原;
2、加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)之一次抗體,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié);
3、洗去多余待測(cè)檢體,加入帶有酵素之二次抗體,與待測(cè)之一次抗體鍵結(jié);
4、洗去多余未鍵結(jié)二次抗體,加入酵素受質(zhì)使酵素呈色,藉儀器(ELISA reader)測(cè)定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。
競(jìng)爭法
競(jìng)爭法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,一般用于檢測(cè)小分子抗原,其操作步驟為:
1、將具有專一性之抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
2、加入待測(cè)檢體,使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);
3、加入帶有酵素之抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酵素之抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié),即所謂競(jìng)爭法之由來;
4、洗去檢體與帶有酵素之抗原,加入酵素受質(zhì)使酵素呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酵素的抗原越少,顯色也就越淺。
當(dāng)需要偵測(cè)無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原,或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時(shí),一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭法ELISA。
酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒結(jié)果判斷:
定性測(cè)定
定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),呈陽性反應(yīng)的最高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性、弱陽性更具定量意義。
在間接法和夾心法ELISA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。
定量測(cè)定
ELISA操作步驟復(fù)雜,影響反應(yīng)因素較多,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的一致,因此在定量測(cè)定中,每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,曲線最高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙,以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),將各濃度的值逐點(diǎn)連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是最理想的檢測(cè)區(qū)域。
測(cè)定小分子量物質(zhì)常用競(jìng)爭法,其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線注意圖中橫坐標(biāo)為對(duì)數(shù)關(guān)系,這更有利于測(cè)定系統(tǒng)的表達(dá)。
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