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人游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒

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標準品稀釋液：1.5ml×1瓶酶標試劑：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）試劑盒保存：2-8℃有效期：6個月 檢測范圍：0.2IU/L - 6IU/L

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用途：實驗與科研

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人游離睪酮低價格（F-TESTO）Elisa試劑盒Kit說明書  注意事項

1、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

2、酶標包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。

4、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時

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鮭魚精CAS:100403-24-5,DNADNA，SodiumSalt,Salmon,4℃保存,TypeII-SCAS:7757-82-6,硫酸鈉,純度：100%,規(guī)格：5gCAS:13465-93-5,鎢酸銀,純度：99%,規(guī)格：10gCAS:143-67-9，硫酸長春堿，英文名稱：VinblastinesulfatesaltCAS:54396-44-0,3-氨基-2-甲基三氟甲苯,純度：98%,規(guī)格：1gCAS:69770-45-2，氟氯苯菊酯，英文名稱：Flumethrin4＇-Chlorobenzanilide-4-boronicacidpinacolester,規(guī)格：化銨-15NCAS:39466-62-1,Ammoniumchloride-15N,農(nóng)用示蹤劑，也可作為氮源用于合成生物、醫(yī)學研究所需15N標記示蹤試劑,豐度：10atom％；化學純度：≥98.5％CAS:591-31-1,3-甲氧基苯甲醛,純度：97%,規(guī)格：25ml人抗磷脂抗體 Apl/APA價格Elisa試劑盒現(xiàn)貨，Human anti-phospholipid antibody,Apl/APA ELISA試劑盒，96T/48T7440-74-6,銦,純度：99.998%（metalsbasis）,規(guī)格：2.5m樁蛋白免疫組化試劑盒,IHC,HumanCAS:4773-96-0,芒果苷，英文名:Mangiferin,純度:≥95%CAS:99636-32-5,（S）-（+）-1-Methoxy-2-propylamine,純度：ee,規(guī)格：0.96人Elisa試劑盒,人SP-B Elisa試劑盒，HumanPulmonarysurfatcant-associatedproteinB,SP-BELISA試劑盒,96T/48T96T/48T,小鼠Elisa-Ⅳ型膠原試劑盒,（Col Ⅳ）試劑盒Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA KIT CAS:156454-43-2,5-溴-7-甲基-1H-吲唑,純度：97%,規(guī)格：250mgCAS:112-17-4,正癸基乙酸酯,純度：98%,規(guī)格：1kgCAS:121219-16-7,2,3-二氟苯硼酸,純度：98%,規(guī)格：1gCAS:3652-61-7,2-甲基-1,5-二苯基吡咯-3-甲酸乙酯,純度：97%,規(guī)格：1gCAS:13463-67-7,二氧化鈦,純度：100%,規(guī)格：1g細胞角蛋白 20，IHC，Human乙基汞，英文名稱：麥芽三糖標準品CAS:355-02-2，全氟甲基環(huán)己烷，英文名稱：（Trifluoromethyl）undecafluorocyclohexaneCAS:107-39-1，2,4,4-三甲基-1-戊烯，英文名稱：2,4,4-Trimethyl-1-penteneCAS:62-76-0,草酸鈉,純度：FinalConcentration0.1N1unit,規(guī)格：CAS:501-65-5,對稱二苯乙炔/二苯基乙炔/二苯乙炔/1,2-二苯乙炔/Diphenylacetylene,BR，99%,5克,RTCAS:16691-43-3,3-氨基-5-硫基-1,2,4-三唑,純度：98%,規(guī)格：5gCAS:459-46-1,4-氟溴芐,純度：97%,規(guī)格：10g96T/48T,人（ACAST-DⅣ）,抗鈣蛋白酶抑素抗體Elisa試劑盒,Human autoantibodies against the C-terminal domain Ⅳ,ACAST-DⅣ ELISA試劑盒CAS:583-70-0，2,4-二甲基溴苯，英文名稱：1-Bromo-2,4-dimethylbenzeneCAS:5412-69-1,5-二乙基胺基-2-戊醇,純度：96%,規(guī)格：5gCAS:150828-96-9，Boc-Orn（Fmoc）-OH，英文名稱：Boc-Orn（Fmoc）-OH葡萄糖酪胨瓊脂價格,DextroseCasein-peptoneAgar,250g,用于食品中臘樣芽胞桿菌鑒定和計數(shù)（APHA方法）CAS:923-32-0,DL-胱氨酸,純度：99%,規(guī)格：2.5gCAS:216434-82-1,4-甲苯三氟硼酸鉀,純度：98%,規(guī)格：1gCAS:138182-21-5,6-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷,純度：98%,規(guī)格：100mg4-羥甲基四氫吡喃CAS:14774-37-9,Tetrahydropyran-4-metha,2-[（2,4-Dimethoxyphenyl）dimethylsilyl]benzylalcoh,規(guī)格：反-2-癸烯醛CAS:3913-81-3,trans-2-Dece,95%滅線磷標準品農(nóng)藥標準品人抑制素A價格（INH-A）說明書Elisa檢測試劑盒，Human Inhibin,INH-A ELISA試劑盒，96T/48T3-[4-Chloro-2-（trifluoromethyl）phenyl]propionicac,規(guī)格：CAS:1577-18-0,反式-3-己烯酸,純度：97%,規(guī)格：10gCAS:79265-30-8,2-（三甲基硅基）噻唑,純度：97%,規(guī)格：1gCAS:12091-64-4,雙（三羰基環(huán)戊二烯鉬）,規(guī)格：1g

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特殊規(guī)格         請詢價

 

說明：生化研究；天然雄性激素，控制男性性器官和男性副性征的發(fā)育和生長。

別名：睪酮;17α-羥基雄甾-4-烯-3-酮;睪（甾）酮;睪丸激素;睪丸素;孕（甾）酮;睪丸素系列;睪丸酮

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分子式：C19H28O2

分子量：288.42

CAS：58-22-0

純度：98%

性狀：白色結(jié)晶性粉末，無氣味。Mp155℃，比旋光度[α]24D+109°（4%，乙醇），乙醇溶液在240nm波長處有最大吸收。易溶于乙醇，不溶于水。LD50 （大鼠，靜脈）326 mg/kg。試驗表明，對實驗動物有潛在的致癌作用。

保存：室溫干燥保存

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大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA Kit

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本試劑盒僅供研究使用
檢測范圍：歡迎QQ或電話或郵箱sale@biohj.com索取原版說明書
檢測限：歡迎QQ或電話或郵箱索取原版說明書
特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
期：6個月
預期應(yīng)用：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
說明
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3．中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。
4．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1.         酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2.         標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3.         樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4.         生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.         辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.         生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7.         辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8.         底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9.         濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.     終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
 
需要而未提供的試劑和器材
1.         標準規(guī)格酶標儀
2.         高速離心機
3.         電熱恒溫培養(yǎng)箱
4.         干凈的試管和Eppendof管
5.         系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6.    蒸餾水，容量瓶等
標本的采集及保存
1.         血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。
2.         血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。
3.         細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復凍融。
注：標本溶血會影響檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本的稀釋原則：
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是的。稀釋的過程中，應(yīng)做好詳細的記錄。計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
生物素標記抗體的稀釋原則：
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則：
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。
操作步驟
實驗開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。
為實驗結(jié)果性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.         棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。
5.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.         依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了實驗結(jié)果的性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
注：
1. 用戶在初次使用試劑盒時，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以檢測結(jié)果的性。
洗板方法手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復此過程數(shù)次。自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算
以標準物的濃度為橫坐標（對數(shù)坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
注意事項
1. 當混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。
5. 如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑.
 

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