"人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)酶聯(lián)免疫(ELISA)試劑盒英文名稱:Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit上海銳谷生物科技有限公司是多家科研機(jī)構(gòu)和高校指定ELISA試劑盒供應(yīng)商,品種齊全,價格優(yōu)惠。歡迎您來電咨詢“人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)酶聯(lián)免疫(ELISA)試劑盒”的詳細(xì)信息!
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人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒等相關(guān)ELISA試劑盒產(chǎn)品說明書下載地址:http://www.shxysw.net/shxysw-Article/ 注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計(jì)算時請最后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 產(chǎn)品保存條件:低溫
產(chǎn)品范圍:
人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血,
骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒
提供實(shí)驗(yàn)代測服務(wù)
特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
有效期:6個月
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
說明
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
實(shí)驗(yàn)原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。需要而未提供的試劑和器材
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2. 高速離心機(jī)
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
標(biāo)本的采集及保存
1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。最后計(jì)算濃度時,稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取%
人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒價格,人ELISA試劑盒說明書ELISA的基本原理有三條:(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;(3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。酶聯(lián)免疫(ELISA)使用試劑盒檢測過程中值得關(guān)注的問題1.儀器質(zhì)控 為使儀器保持最佳工作狀態(tài),應(yīng)建立維護(hù)和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP),所要控制的儀器包括移液器(加樣槍)、溫箱、洗板機(jī)和酶標(biāo)儀。◎移液器: ELISA加樣量。20-200μl),其準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,利用稱重法檢查:低、中、高三個刻度分別吸取指示量的水,萬分之一天平稱重后計(jì)算吸量是否準(zhǔn)確,一般應(yīng)在±5%以內(nèi);◎恒溫箱: 經(jīng)常檢查恒溫箱溫度計(jì)所示的溫度和水中(或溫箱內(nèi))實(shí)測溫度是否一致,允許有±1℃的誤差;◎洗板機(jī): 每個廠家設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定,一般不超過2μl;人工扣板時,墊紙不濕;定期檢查管孔是否堵塞;◎酶標(biāo)儀:經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分,防止濾光片霉變,定期檢測校正,使其保持良好的工作性能。2. 酶標(biāo)分析過程中的注意事項(xiàng) 樣本的檢測是基于抗原抗體的反應(yīng),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,判定樣本最終的藥物含量。它要求加樣的準(zhǔn)確性和洗板的一致性。在整個加樣的過程中注意實(shí)驗(yàn)室溫度的恒定,保證反應(yīng)在試劑盒所示的溫度下進(jìn)行。 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA試劑盒價格,人ELISA試劑盒說明書下面將ELISA法與免疫熒光(IFA)和放射免疫(RIA)的各自優(yōu)缺點(diǎn)作一簡要的比較(表4),供參考:表4:三種方法的優(yōu)缺點(diǎn)比較:
方法種類 比較指標(biāo) | | | |
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ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。影響ELISA試劑盒試驗(yàn)效果常見問題原因分析及解決辦法選擇試劑時,應(yīng)選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣可能碰到的問題:1、過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);2、手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間;3、加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣。相應(yīng)解決辦法:1、標(biāo)本為血清:最好將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。2、加樣后及時放入孵箱。3、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。4、如果采用AT或其他全自動加樣,最好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。5、標(biāo)本較多時,請分批操作。抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體試劑盒(人)孵育可能碰到的問題:1、孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗徹底;2、孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。 相應(yīng)解決辦法:1、貼封片或加蓋;2、按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。洗板可能碰到的問題:1、采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉;2、采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不徹底;洗板針堵塞,抽吸不完全;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差;3、反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。相應(yīng)解決辦法:1、保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后最好在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;2、合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。顯色可能碰到的問題:1、顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;2、加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。相應(yīng)解決辦法:1、顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用;2、加樣時保持顯色劑不外流;3、A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體試劑盒(人)終止可能碰到的問題:加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。相應(yīng)解決辦法:加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。讀板可能碰到的問題:讀板時板底不清潔相應(yīng)解決辦法:應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。試驗(yàn)全過程:1、整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 2、實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體試劑盒(人)在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)(Elisa)酶聯(lián)免疫試劑盒 用于醫(yī)學(xué)診斷,使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
性狀:盒裝液體適應(yīng):科研實(shí)驗(yàn)有效期:半年保存溫度:2-8℃規(guī)格:96T/48T
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Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)誤差分為三種: 1、系統(tǒng)誤差是指一系列測定結(jié)果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差,有明顯的規(guī)律性,可在一定條件下重復(fù)出現(xiàn),是可以通過質(zhì)控預(yù)防和校正的。2、隨機(jī)誤差又稱偶然誤差,是一種偶然的、未能預(yù)料到的誤差,是難以避免和校正的誤差。檢驗(yàn)工作中隨機(jī)誤差的分布符合正態(tài)分布規(guī)律。3、過失誤差是人為的責(zé)任誤差。通過加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理和開展質(zhì)量控制工作是可以避免的。
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人SDA elisa試劑盒說明書,北京人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體ELISA試劑盒現(xiàn)貨
產(chǎn)品別名:人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體ELISA試劑盒
英文名稱:Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
價格:詢價(010-57269780 QQ:1261299569 聯(lián)系人:劉經(jīng)理)待檢樣本:體液,血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。保存條件:2-8℃北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司對外承攬?jiān)囼?yàn):免疫組化, ,Tunel,Elisa,WB,原位雜交,比色法,HE染色,特染,圖像分析,熒光歡迎咨詢!010-57269780(北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司)北京雅安達(dá)生物技術(shù)有限公司免費(fèi)代測ELISA試劑盒一周內(nèi)出結(jié)果
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免費(fèi)代測 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA Kit,人SDA檢測試劑盒
【產(chǎn)品中文名稱】 | 人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA Kit | |||
【產(chǎn)品英文名稱】 | Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit | |||
【保存溫度】 | 2-8℃,避光保存 | |||
【產(chǎn)品規(guī)格】 | 96T/48T | |||
【有效期】 | 6個月 | |||
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人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA Kit | ||||
【注意事項(xiàng)】 | ||||
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。 | ||||
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。 | ||||
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。 | ||||
一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。 | ||||
4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值), | ||||
請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 | ||||
人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA Kit | ||||
【實(shí)驗(yàn)中最可能出現(xiàn)問題】 | ||||
○一 所有孔未顯色 ? 分析原因: | ||||
(1) 微孔加入抗體后,洗板不徹底,微孔中存在游離的抗體。 | ||||
(2)用錯試劑。 | ||||
(3) 在操作中忘記加酶或抗體。 ? | ||||
解決辦法: | ||||
(1) 檢查洗板器械,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。 | ||||
(2)在加樣前,要看清瓶簽。 | ||||
(3) 嚴(yán)格按說明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位。 | ||||
○二 所有孔顯色偏低 ? 分析原因: | ||||
(1)微孔加入抗體后,洗板不徹底,微孔中存在游離的抗體。 | ||||
(2) 洗板不干凈。 | ||||
(3) 抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。 | ||||
(4)溫度沒達(dá)到要求。 | ||||
(5) 每孔加入的試劑量低于說明書要求量。 ? | ||||
2.解決辦法: | ||||
(1)手工加蒸餾水洗板時,要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。 | ||||
(2) 洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。 | ||||
(3)嚴(yán)格按說明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。 | ||||
(4) 控制孵育溫度在25℃。 | ||||
(5) 加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。 | ||||
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elisa實(shí)驗(yàn)周期:收到樣本后,7-10個工作日內(nèi)出結(jié)果收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):凡是購買我們試劑盒的客戶,可享受檢測費(fèi)全免服務(wù)實(shí)驗(yàn)報告:圖像曲線、實(shí)驗(yàn)步驟、儀器型號、所有試劑及相關(guān)數(shù)據(jù)等
人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體 ELISA進(jìn)口檢測價格,人SDA ELISA Kit代測 現(xiàn)貨用于實(shí)驗(yàn)和科研檢測用,屬于酶聯(lián)免疫elisa 試劑盒(免費(fèi)代測)。
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Elisa試劑盒操作方法:雙抗體夾心法/間接法,比較常用的是雙抗體夾心法。
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:1.固相載體的選擇;2.包被抗體(或抗原)的選擇;3.酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇;4.酶的底物及供氫體的選擇.
用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷.
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好.
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