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 四環(huán)素類（TCs）ELISA檢測試劑盒詳細資料:

四環(huán)素類（TCs）ELISA檢測試劑盒實驗目的：用于蜂蜜、牛奶、組織（含水產(chǎn)）中四環(huán)素、土霉素、金霉素、強力霉素等四環(huán)素類藥物的殘留檢測。以此監(jiān)測生產(chǎn)出的產(chǎn)品是否超出農(nóng)藥標準

實驗原理：應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2.　在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:（1）固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。（3）酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。（4）酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。（五）試劑盒的清洗 試驗原理：試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。自備材料 1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。 

與四環(huán)素類（TCs）ELISA測試劑盒相關的試劑盒還有以下

四環(huán)素類（TCs）ELISA檢測試劑盒

頭孢霉素 elisa試劑盒

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呋喃唑酮ELISA試劑盒

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本試劑僅供研究使用      標本：血清或血漿

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒試驗原理：

LDH 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知LDH 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將LDH 和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中LDH 的濃度呈比例關系。

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒內(nèi)容及其配制

自備材料

1． 蒸餾水。

2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒操作注意事項

1． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7． 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1、 血清－－－－-操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿－－－－-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液－－-1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿－－－－-將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5、 保存－－－－－－如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備

1． 標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：

2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。

3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案

局限

6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到精確的結(jié)果。

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒性能

1. 靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的LDH 標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的LDH 含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍：0-800IU/L

4、敏感度： 1.0 IU/L

人角化細胞內(nèi)分泌因子（KAF）/雙調(diào)蛋白（AR）ELISA檢測試劑盒等上海雙贏生物科技有限公司elisa檢測試劑盒試劑盒優(yōu)點多多，更加方便我們的科研學者進行科學實驗，是科研實驗的最佳伙伴。

   (1)、高效、靈敏、特異的抗體；

　 (2)、穩(wěn)定的重復性和可靠性；

　 (3)、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

　 (4)、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；

   (5)、節(jié)省實驗經(jīng)費。

檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。 

人角化細胞內(nèi)分泌因子（KAF）/雙調(diào)蛋白（AR）ELISA檢測試劑盒針對國內(nèi)酶聯(lián)免疫行業(yè)不同的需求，我們上海雙贏生物科技有限公司特推出科研型elisa試劑盒、商用型elisa試劑盒，我們均采用環(huán)保型包裝材料，響應了國家節(jié)能減排的要求，同時，為了更好的適應客戶需求，我們推出經(jīng)濟型elisa試劑盒，讓大家的實驗更節(jié)省，公司在不斷努力降低ELISA試劑原料成本，以便更好的節(jié)省ELISA試劑盒整體價格，相信不遠的將來，ELISA試劑盒價格會更便宜，實驗效果會更穩(wěn)定！

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人角化細胞內(nèi)分泌因子（KAF）/雙調(diào)蛋白（AR）ELISA檢測試劑盒上海雙贏生物有限公司提供免費ELISA檢測試劑盒代測，快速檢測一周內(nèi)出結(jié)果，是進行科研實驗最佳的選擇，現(xiàn)在我司ELISA檢測試劑盒8折優(yōu)惠中，歡迎廣大科研學者前來選購。

一、檢測原理

本試劑盒利用安普霉素抗體與安普霉素可產(chǎn)生特異性結(jié)合的性質(zhì)，先在酶標板上預包被抗原，再加入標準品（樣本）和安普霉素抗體工作液，樣本或標準品中的安普霉素藥物與包被抗原競爭安普霉素抗體，最后加入底物催化顯色。此時顯色深度與標準品（樣本）中安普霉素藥物的含量成反比。

二、檢測范圍

本試劑盒是應用ELISA技術研發(fā)的藥物殘留檢測產(chǎn)品,與儀器分析技術比較，能經(jīng)濟、快速地檢測出組織、肝臟、蜂蜜等樣品中安普霉素的含量。

三、注意事項

1、室溫低于20 ℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20~

25 ℃）會導致所有標準的OD值偏低。

2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出

   現(xiàn)標準曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象，所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。

3、反應終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚；若不慎滴漏到皮膚上，請盡快用水沖洗。

4、不要使用過了有效日期的試劑盒；也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

5、保存試劑盒于2~8 ℃，不要冷凍，將不用的微孔板放進自封袋重新密封；標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

6、顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應當棄之；0標準的吸光度（450 nm）值小于0.5（A_450nm< 0.5）時，表示試劑可能變質(zhì)。

7、在加入底物液后，一般顯色10 min即可。若顏色較淺，可延長反應時間到15 min（或更長），但不得超過30 min；反之，則減短反應時間。

8、該試劑盒最佳反應溫度為25 ℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

四、貯藏條件及保存期

貯藏條件：在2~8 ℃保存試劑盒。

保存期：本試劑盒有效期為12個月。

進口 人分泌成分（SC）elisa試劑盒,人SC Elisa檢測試劑盒

人分泌成分ELISA試劑盒           

英文名稱：Human secretory component,SC ELISA KIT

主要作用：研究使用

人分泌成分ELISA試劑盒 操作注意事項： 　 1． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7． 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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 產(chǎn)品介紹

      本試劑盒系由預包被豬流行性腹瀉病毒（PEDV）抗原的微孔板和酶標記抗原及其他配套試劑組成，應用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清、血漿及相關液體樣本中流行性腹瀉病毒抗體。實驗時，在包被板中加入對照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后，若樣品中含有豬流行性腹瀉病毒抗體，則將與包被板上抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標抗原，與包被板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產(chǎn)物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；加入終止液終止反應后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有豬流行性腹瀉病毒抗體。豬流行性腹瀉病毒抗體檢測試劑盒【儲存及有效期】于2～8℃避光保存，有效期為6個月。包被板開封后請于2～8℃避光保存，使用期限為1個月。【試劑盒組成】 1. 預包被微孔板條                               96T×12. 酶標記物  （紅蓋）                          6ml×13. 樣品稀釋液  （藍蓋）                       6ml×14. 30X濃縮洗滌液  （透明蓋）               20ml×15. 底物液A  （白蓋）                            6ml×16. 底物液B  （黑蓋）                            6ml×17. 終止液  （黃蓋）                              6ml×18. 陽性對照  （紅蓋，已滅活）              0.5 ml×19. 陰性對照  （綠蓋，已滅活）              0.5 ml×110. 蓋板膜                                            2張11. 自封袋                                            1個12. 說明書                                            1份【樣品制備】1.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。2.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫（25℃左右），并搖動使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作30倍稀釋。【試驗操作方法】1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。2.取所需用量包被微孔板條，設空白對照1孔、陰陽性對照各2孔及所需的樣品孔并編好號；未用的板條盡快密封，2～8℃保存。3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照50μl；樣品孔每孔加入樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl；空白對照孔不加。4.混勻，置37℃反應30分鐘。5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。6.每孔加酶標記物50μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘。7.洗滌，同步驟5。8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm（630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A450）。測定應在終止后15分鐘內(nèi)進行。【結(jié)果判定】1.陰性對照：正常情況下，陰性對照孔平均A值≤0.1；2.陽性對照：正常情況下，陽性對照孔平均A值≥1.0；3.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均A值+0.15；4.結(jié)果判定：樣品A450值大于臨界值，判為陽性；樣品A450值小于臨界值，判為陰性。【試驗方法的局限性】    該試驗僅作為定性檢測豬流行性腹瀉病毒抗體。

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 樣品類型 血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等樣品類型 檢測方法 酶聯(lián)免疫法

 特 異 性 公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性交叉反應 由于當前的酶聯(lián)免疫科學技術和知識有限，現(xiàn)有技術不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此，交叉反應可能仍然存在 樣 本 量  50-100 μL  實驗時間  1–4.5h  儲存條件  2-8°C  儲存方法 可以存儲在2 - 8°C長達1個月（專家建議：4°C恒溫保存，酶免試劑盒實驗效果更佳）。對于長期存儲,在-20°C的存儲。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋，避免潮濕 有 效 期  6 months 工作原理人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)elisa試劑盒的原理　　ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結(jié)果，使測定方法達到很高的敏感度。產(chǎn)品選型人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)ELISA試劑盒的類型　　ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；（2）酶標記的抗原或抗體，稱為"結(jié)合物"（conjugate）；（3）酶反應的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型：雙抗體夾心法測抗原操作流程雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法，操作步驟如下：（1） 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。（2） 加受檢標本，保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。（3） 加酶標抗體，保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。（4） 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中，此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標用的抗體最好分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應，作一步檢測。　　在一步法測定中，當標本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結(jié)合，而不再形成"夾心復合物"。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，此時反應后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標準曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同（參見1.3.2，圖1-4），如按常法測讀，所得結(jié)果將低于實際的含量，這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應（hook effect），因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時，反應甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(zhì)（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時，應注意可測范圍的最高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。　　假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇，例如HBsAg的a決定簇，也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型問題，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型，雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應性，這也是用單抗作夾心法應注意的問題。　　雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗體，多為IgM型，能和多種動物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF，它可充當抗原成份，同時與固相抗體和酶標抗體結(jié)合，表現(xiàn)出假陽性反應。采用F（ab＇）或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑，由于去除了Fc段，從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響，已被列為這類試劑的一項考核指標。　　雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。應用領域人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)ELISA試劑盒的試劑準備按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。 ELISA 中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應用pH 計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。試劑的準備之加樣在 ELISA 中一般有3 次加樣步聚，即加標本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法 ELISA)需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩 1 分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。