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IgE試劑盒豬免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒

豬免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒
(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
適用生物:
使用說明書
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
[檢測范圍]
0.156-10ng/mL
[靈敏度:最小可測]
0.066ng/mL
[預期應用]
本試劑盒運用雙抗體夾心 ELISA 法定量檢測豬血清、血漿、組織勻漿或其它相關生物液體中免疫球蛋白E(IgE)含量。
[免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒內(nèi)容]
Reagent
Quantity
酶標包被板
12well×8strips
標準品
1×0.5ml
標準品稀釋液
1×1.5ml
酶標試劑
1×6ml
樣品稀釋液
1×6ml
顯色劑A液
1×6ml
顯色劑B
1×6ml
終止液
1×6ml
30倍濃縮洗滌液
1×20ml×30flod
說明書
1
封板膜
2
密封袋
1
 
[需自備的設備及試劑]
1、450±10nm 濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)
2、單道或多道微量加液器及吸頭
3、稀釋樣品的 EP 管
4、蒸餾水或去離子水
5、吸水紙
6、盛放洗液的容器
[試劑盒的儲存及有效期]
1、未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液 A、檢測溶液 B 以及 96 孔板保存于-20oC。
2使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20oC,避免潮濕。
注意:
試劑盒內(nèi)酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在首次實驗后 1 個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準,保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
 
[免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒標本的采集與保存]
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4oC 過夜,然后 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
2、血漿:用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的 30 分鐘內(nèi)于 2-8oC 1000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
3、組織勻漿:
1)取適量組織塊,于預冷 PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2)可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入 5-10mL 預冷 PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復凍融法可重復 2 次)。
3)將制備好的勻漿液于 5000×g 離心 5 分鐘,留取上清即可檢測。
4、其它生物標本:請 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
注意:
1、以上標本均需密封保存,4oC 保存應小于 1 周,-20oC 不應超過 1 個月,-80oC 不應超過 2 個月。
2、標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
3、標本使用前應緩慢均衡至室溫,不應加熱使之融解。
[試劑準備]
1、使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在 37oC 溶解。
2、標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液 1mL,蓋好后室溫靜置大約 10 分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為10ng/mL。準備 7 個稀釋標準品的 EP 管,每個 EP 管中加入 500μL 的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成10ng/mL-5ng/mL-2.5ng/mL-1.25ng/mL-0.625ng/mL-0.3125ng/mL,標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
  
Tube
0
1
2
3
4
5
稀釋成
ng/mL
10
5
2.5
  1.25
0.625
0.3125
 
3、檢測溶液 A 及檢測溶液 B:Detection A 及 Detection B 在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。臨用前分別以檢測稀釋液 A 或 B1:100 稀釋(如:10μL 檢測溶液 A/990μL 檢測稀釋液 A),充分混勻,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μL/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2mL。
4、濃洗滌液:用 580mL 蒸餾水或去離子水將 20mL 濃洗滌液稀釋至 600mL,進行 30 倍稀釋。
5、底物溶液:請用滅菌的移液器吸頭吸取所需體積的 TMB 至另一干凈容器中使用,容器中剩余的底物應予丟棄,不要倒回 TMB 瓶中。
免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒注意:
1、標準品的稀釋不能直接在板中進行。
2、標準品請于臨用前 15 分鐘內(nèi)配制。該標準品只能使用一次。
3、標準品、檢測溶液 A 工作液、檢測溶液 B 工作液請使用相應的稀釋液配制,不能混淆;靹驎r要輕輕充分混勻,避免起泡。為保證實驗結(jié)果的準確請使用微量吸管,并校準微量加液器。請依據(jù)所需的量精確配制,盡量不要微量配制(如吸取檢測溶液 A 時,一次不要小于 10μL),以避免造成濃度誤差。
4、請勿重復使用已經(jīng)稀釋過的標準品、檢測溶液 A 工作液和檢測溶液 B 工作液。
5、濃洗滌液中如有結(jié)晶析出,請先溫育至室溫,輕輕混勻,至到結(jié)晶完全溶解再進行配制。
6、試劑盒中部分試劑為儲存液,客戶需配置成工作液后使用,在配置過程中如因純凈水質(zhì)量差或水質(zhì)污染,以及實驗中所用耗材潔凈度差,可能造成實驗結(jié)果不準確,甚至完全錯誤,請使用雙蒸水。
[標本處理]
1、本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。
2、實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。標本0.01mol/L 的 PBS 稀釋(PH=7.0-7.2)。
3、若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
4、使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質(zhì)的引入導致 ELISA 實驗結(jié)果偏差。
5、若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素 較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
6、某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
7、建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結(jié)果偏 差。
[免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒操作步驟]
1、加樣:分別設標準孔、待測樣品孔、空白孔。設標準孔 7 孔,依次加入 100μL 不同濃度的標準品(見試劑準備 2)。空白孔加 100μL(見試劑準備第二步最后一管),余孔加待測樣品 100μL,酶標板加上覆膜,37oC 溫育 2 小時。
2、棄去液體,甩干,不用洗滌。
3、每孔加檢測溶液 A 工作液 100μL(臨用前配制),酶標板加上覆膜,37oC 溫育 1 小時。
4、棄去孔內(nèi)液體,每孔用 350μL 的洗滌液洗滌,浸泡 1-2 分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干),重復洗板 3 次。最后一次洗滌后,要把孔內(nèi)的洗滌液完全甩干。自動洗板機亦可。
5、每孔加檢測溶液 B 工作液(臨用前配制)100μL,加上覆膜,37oC 溫育 30 分鐘。
6、棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 5 次,方法同步驟 4。
7、每孔加底物溶液 90μL,酶標板加上覆膜,37oC 避光顯色(反應時間控制在 15-25 分鐘,不要超過 30 分鐘。當標準孔的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色,后 3-4 孔梯度不明顯時,即可終止)。
8、每孔加終止溶液 50μL,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物溶液的加入順序相同。如出現(xiàn)顏色不勻一,請輕輕晃動酶標板以使溶液混合均勻。
9、在確保酶標板底無水滴及孔內(nèi)無氣泡后,立即用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的光密度(O.D.值)。
注意:
1、試劑準備:準備一次實驗所需要的酶標條,其它的可從微孔板上拆下,密封,按照說明書要求保存,以備下次使用。
2、加樣:實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。加樣時注意不要有氣泡,將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。加樣或加試劑時,第一個孔與最后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。因此,一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)最好控制在 10 分鐘內(nèi)。推薦設置復孔進行實驗。
3、溫育:為防止樣品蒸發(fā),實驗時請將加上蓋或覆膜的酶標板置于濕盒內(nèi),以避免液體蒸發(fā),洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài),同時應嚴格遵守給定的溫育時間和溫度。
4、洗滌:充分的洗滌非常重要,在每次洗滌過程中,都要將洗滌液完全甩干。洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響最后的酶標儀讀數(shù)。如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實 驗過程中。
5、反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔 10 分鐘觀察一次),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
6、底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7、如果實驗室內(nèi)濕度低于 60%,推薦使用加濕器提高濕度水平。
[實驗原理]
免疫球蛋白E(IgE)抗體包被于 96 孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的免疫球蛋白E(IgE)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入生物素化的免疫球蛋白E(IgE)抗體,將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后,加入 HRP 標記的親和素,再次徹底洗滌后加入 TMB 底物顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
[免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒計算]
各標準品及樣本 O.D.值扣除空白孔 O.D.值后作圖(七點圖),如設置復孔,則應取其平均值計算。以標準品的濃度為縱坐標(或?qū)?shù)坐標),O.D.值為橫坐標(或?qū)?shù)坐標),繪出標準曲線(最佳方程式應依回歸方程計算的 R2值來定,以 R2值越趨近于 1 為好)。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析,如 curve expert 1.30,根據(jù)樣品 O.D.值,由標準曲線查出相應的濃度,乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 O.D.值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的O.D.值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
 
 
[典型數(shù)據(jù)]
為了便于計算,盡管濃度為自變量而 O.D.值為因變量,我們繪圖時仍采用標準品的 O.D.值作為橫坐標(X 軸),標準品的濃度為縱坐標(Y 軸)。同時為了試驗結(jié)果的直觀性,圖中提供的是原始數(shù)據(jù)而非對數(shù)值。推薦使用對數(shù)值建立標準曲線圖。由于實驗操作條件的不同(如操作者、移液技術、洗板技術和溫度條件等),標準曲線的O.D.值會有所差異。所提供的標準曲線僅供參考,實驗者需要根據(jù)自已的實驗建立標準曲線。此值為 20 個空白樣品(即標準品稀釋液)測定的平均值加二倍標準差所對應的濃度。
[特異性]
本試劑盒用于檢測免疫球蛋白E(IgE),經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質(zhì)交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應。
[回收率]
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的免疫球蛋白E(IgE)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。
        樣本
      回收率范圍
    平均回收率(%)
      血清(n=5)
        86-98
          93
   EDTA血漿(n=5)
        91-103
          96
   肝素血漿(n=5)
        84-96
          90
 
[線性]
在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的免疫球蛋白E(IgE),并倍比稀釋成 1:2,1:4,1:8,1:16 的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中免疫球蛋白E(IgE)含量的測定值與理論值的比率。
樣本
1:2
1:4
1:8
1:16
血清(n=5)
83-95%
85-97%
93-107%
85-99%
EDTA血漿(n=5)
95-105%
91-102%
89-99%
93-104%
肝素血漿(n=5)
87-101%
84-98%
91-103%
88-96%
[精密度]
精密度用樣品測定值的變異系數(shù) CV 表示。CV(%) = SD/mean×100批內(nèi)差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定 20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及 SD 值。
批間差:選取 3 個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定 8 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及 SD 值。
批內(nèi)差: CV<10%
批間差: CV<12%
[穩(wěn)定性]
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于 5%。為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少豬為誤差。
[實驗流程]
1、實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2、加樣(標準品及樣本)100μL,37oC孵育2小時;
3、吸棄,加檢測溶液A100μL,37oC孵育1小時;
4、洗板3次;
5、加檢測溶液B100μL,37oC孵育30分鐘;
6、洗板5次;
7、加TMB底物90μL,37oC孵育15-25分鐘;
8、加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。
[免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒說明]
1、由于現(xiàn)有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術風險。
2、最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關,請務必準備充足的標本備份。
3、不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。
4、只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到最佳的檢測結(jié)果。
5、在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
6、剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。請勿提前將酶標板從包裝袋里拿出。
7、由于操作者不熟練、操作失誤或讀數(shù)儀程序選用錯誤等有可能會導致錯誤結(jié)果的產(chǎn)生。請使用者使用該產(chǎn)品前仔細閱讀說明書,調(diào)試好酶標儀,請使用配備有 450±10nm 濾光片的酶標儀,且該酶標儀測量范圍在0.001-3.000 O.D.或以上。
8、同一使用者在使用同一產(chǎn)品時,如不同時間訂購,也可能會因不同批次的少量差異產(chǎn)生不同結(jié)果,因此建議使用者在每次使用前均進行預實驗。
9、試劑盒在出廠前均經(jīng)過嚴格檢測,但由于運輸條件及各實驗室條件差異,可能會造成實驗結(jié)果與出廠結(jié)果不一致或不同批次試劑盒批間差大的情況,對于這種情況會酌情處理。
10、本試劑盒未與其他廠家同類試劑盒或不同方法檢測同一目的蛋白的產(chǎn)品做對比,平行檢測可能會存在檢測結(jié)果不一致的情況。
11、本操作說明同樣適用于 48T 試劑盒,但 48T 試劑盒所有試劑減半。
[警告]
本試劑盒中使用了稀硫酸作為終止液,其具有輕微腐蝕性,使用時應避免接觸衣物或眼、手等皮膚暴露部位。
 
該公司產(chǎn)品分類: 牛Elisa試劑盒 馬Elisa試劑盒 猴Elisa試劑盒 雞Elisa試劑盒 豬Elisa試劑盒 兔Elisa試劑盒 其他Elisa試劑盒 其他細胞系 大鼠Elisa試劑盒 小鼠Elisa試劑盒 人Elisa試劑盒 永生化細胞 豬細胞系 倉鼠細胞系 小鼠細胞系 大鼠細胞系 人源細胞系 其他化學試劑 氨基酸 色素類

四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測試劑盒優(yōu)惠價,四環(huán)素類ELISA檢測試技術指導

 四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測試劑盒詳細資料:

四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測試劑盒實驗目的:用于蜂蜜、牛奶、組織(含水產(chǎn))中四環(huán)素、土霉素、金霉素、強力霉素等四環(huán)素類藥物的殘留檢測。以此監(jiān)測生產(chǎn)出的產(chǎn)品是否超出農(nóng)藥標準

實驗原理:應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。(3)酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。(4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。(五)試劑盒的清洗 試驗原理:試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。自備材料 1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。 

與四環(huán)素類(TCs)ELISA測試劑盒相關的試劑盒還有以下

四環(huán)素類(TCs)ELISA檢測試劑盒

頭孢霉素 elisa試劑盒

鏈霉素ELISA試劑盒

紅霉素ELISA試劑盒

瘦肉精ELISA試劑盒

呋喃唑酮ELISA試劑盒

呋喃它酮ELISA試劑盒

該公司產(chǎn)品分類: 禽類ELISA試劑盒 食品安全類試劑盒 駱駝ELISA試劑盒 魚ELISA試劑盒 綿羊ELISA試劑盒 植物ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 豬ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 猴子ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒

大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA檢測試劑盒

       大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒

 

本試劑僅供研究使用      標本:血清或血漿

 

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒試驗原理

LDH 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知LDH 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將LDH 和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中LDH 的濃度呈比例關系。

 

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份(2-8℃保存)

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶標板

1塊板(96T)

半塊板(48T)

即用型

塑料膜板蓋

1塊

半塊

即用型

標準品:800IU/L

1瓶(0.6ml)

1瓶(0.3ml)

按說明書進行稀稀

空白對照

1瓶(1.0ml)

1瓶(0.5ml)

即用型

標準品稀釋緩沖液

1瓶(5ml

1瓶(2.5ml

即用型

生物素標記的抗LDH 抗體

1瓶(6ml

1瓶(3.0ml

即用型

親和鏈酶素-HRP

1瓶(10ml)

1瓶(5.0ml)

即用型

洗滌緩沖液

1瓶(20ml)

1瓶(10ml)

按說明書進行稀釋

底物A

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

即用型

底物B

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

即用型

終止液

1瓶(6.0ml)

1瓶(3.0ml)

即用型

標本稀釋液

1瓶(12ml)

1瓶(6.0ml)

即用型

 

自備材料

1. 蒸餾水。

2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒操作注意事項

1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

 

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法

1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液

5、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準備

1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:

800 IU/L

(6號標準品)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

400 IU/L

(5號標準品)

100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液

200 IU/L

(4號標準品)

100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液

100 IU/L

(3號標準品)

100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液

50 IU/L

(2號標準品)

100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液

25 IU/L

(1號標準品)

100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液

0 IU/L

(空白對照)

原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

 

2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

 

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒操作步驟

1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。

3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。

9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

建議使用的實驗方案

 

標準品濃度(IU/L)

 

A

800

800

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

B

400

400

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

C

200

200

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

D

100

100

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

E

50

50

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

F

25

25

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

G

0

0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

H

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

 

局限

6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到精確的結(jié)果。

 

大鼠乳酸脫氫酶(LDH) ELISA檢測試劑盒性能

1. 靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性:不與其它細胞因子反應。

3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

 

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的LDH 標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的LDH 含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

 

3、檢測值范圍:0-800IU/L

 

4、敏感度: 1.0 IU/L

 

該公司產(chǎn)品分類: 其他elisa試劑盒 牛elisa試劑盒 犬elisa試劑盒 羊elisa試劑盒 雞elisa試劑盒 豬elisa試劑盒 豚鼠elisa試劑盒 猴elisa試劑盒 兔elisa試劑盒 人elisa試劑盒 小鼠elisa試劑盒 大鼠elisa試劑盒 ELISA檢測試劑盒

人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA檢測試劑盒

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   (1)、高效、靈敏、特異的抗體;

  (2)、穩(wěn)定的重復性和可靠性;

  (3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;

  (4)、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;

   (5)、節(jié)省實驗經(jīng)費。

檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。 

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Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit 英文名稱:人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA Kit  規(guī)格:96T/48T

Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit 英文名稱:人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit  規(guī)格:96T/48T

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安普霉素ELISA檢測試劑盒

檢測原理

本試劑盒利用安普霉素抗體與安普霉素可產(chǎn)生特異性結(jié)合的性質(zhì),先在酶標板上預包被抗原,再加入標準品(樣本)和安普霉素抗體工作液,樣本或標準品中的安普霉素藥物與包被抗原競爭安普霉素抗體,最后加入底物催化顯色。此時顯色深度與標準品(樣本)中安普霉素藥物的含量成反比。

二、檢測范圍

本試劑盒是應用ELISA技術研發(fā)的藥物殘留檢測產(chǎn)品,與儀器分析技術比較,能經(jīng)濟、快速地檢測出組織、肝臟、蜂蜜等樣品中安普霉素的含量。

三、注意事項

1、室溫低于20 ℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~

25 ℃)會導致所有標準的OD值偏低。

2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出

   現(xiàn)標準曲線不成線性,重復性不好的現(xiàn)象,所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。

3、反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚;若不慎滴漏到皮膚上,請盡快用水沖洗。

4、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

5、保存試劑盒于2~8 ℃,不要冷凍,將不用的微孔板放進自封袋重新密封;標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。

6、顯色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應當棄之;0標準的吸光度(450 nm)值小于0.5A450nm< 0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。

7、在加入底物液后,一般顯色10 min即可。若顏色較淺,可延長反應時間到15 min(或更長),但不得超過30 min;反之,則減短反應時間。

8、該試劑盒最佳反應溫度為25 ,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

四、貯藏條件及保存期

貯藏條件:在2~8 ℃保存試劑盒。

保存期:本試劑盒有效期為12個月。

該公司產(chǎn)品分類: 農(nóng)藥殘留 轉(zhuǎn)基因檢測 免疫親和柱 抗生素試劑盒 毒素試劑盒 瘦肉精試劑盒 抗生素檢測卡 瘦肉精檢測卡 毒素檢測卡

進口 人分泌成分(SC)ELISA試劑盒,人SC Elisa檢測試劑盒

進口 人分泌成分(SC)elisa試劑盒,人SC Elisa檢測試劑盒

 

人分泌成分ELISA試劑盒           

英文名稱:Human secretory component,SC ELISA KIT

主要作用:研究使用

人分泌成分ELISA試劑盒 操作注意事項:   1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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該公司產(chǎn)品分類: Axygen耗材 Corning耗材 中藥對照品 中藥對照片 中藥對照品 化學試劑 化學試劑 小鼠ELISA試劑盒 美國SANCHEZ ELISA 試劑盒 檢測試劑盒 試劑盒 多種屬試劑盒 植物ELISA試劑盒 倉鼠Elisa試劑盒 藥物殘留Elisa試劑盒 類人猿Elisa試劑盒 犬Elisa試劑盒 淋巴細胞分離液 TBD RD試劑

人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA試劑盒,人ELISA試劑盒、酶免分析試劑盒、ELISA檢測試劑盒

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該公司產(chǎn)品分類: 對照品 對照品 生化標準品及其它標準品 抗生素標準品 其他動物ELISA試劑盒 中藥化學標準品 小鼠ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 其他動物細胞株 人細胞株 細胞株 其他檢測菌株 藥品檢測菌株 霉菌檢測電子電工產(chǎn)品環(huán)境試驗菌株 消毒用菌檢測菌株 水質(zhì)檢測菌株 食品檢測菌株 化妝品檢測菌株 菌株 人神經(jīng)系統(tǒng)及其他細胞株

豬流行性腹瀉病毒抗體檢測試劑盒

 產(chǎn)品介紹

      本試劑盒系由預包被豬流行性腹瀉病毒(PEDV)抗原的微孔板和酶標記抗原及其他配套試劑組成,應用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿及相關液體樣本中流行性腹瀉病毒抗體。實驗時,在包被板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后,若樣品中含有豬流行性腹瀉病毒抗體,則將與包被板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標抗原,與包被板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬流行性腹瀉病毒抗體。豬流行性腹瀉病毒抗體檢測試劑盒【儲存及有效期】于2~8℃避光保存,有效期為6個月。包被板開封后請于2~8℃避光保存,使用期限為1個月。試劑盒組成】 1. 預包被微孔板條                               96T×12. 酶標記物  (紅蓋)                          6ml×13. 樣品稀釋液  (藍蓋)                       6ml×14. 30X濃縮洗滌液  (透明蓋)               20ml×15. 底物液A  (白蓋)                            6ml×16. 底物液B  (黑蓋)                            6ml×17. 終止液  (黃蓋)                              6ml×18. 陽性對照  (紅蓋,已滅活)              0.5 ml×19. 陰性對照  (綠蓋,已滅活)              0.5 ml×110. 蓋板膜                                            2張11. 自封袋                                            1個12. 說明書                                            1份【樣品制備】1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫(25℃左右),并搖動使沉淀的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作30倍稀釋。【試驗操作方法】1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。2.取所需用量包被微孔板條,設空白對照1孔、陰陽性對照各2孔及所需的樣品孔并編好號;未用的板條盡快密封,2~8℃保存。3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照50μl;樣品孔每孔加入樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl;空白對照孔不加。4.混勻,置37℃反應30分鐘。5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。6.每孔加酶標記物50μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。7.洗滌,同步驟5。8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A450)。測定應在終止后15分鐘內(nèi)進行。【結(jié)果判定】1.陰性對照:正常情況下,陰性對照孔平均A值≤0.1;2.陽性對照:正常情況下,陽性對照孔平均A值≥1.0;3.臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均A值+0.15;4.結(jié)果判定:樣品A450值大于臨界值,判為陽性;樣品A450值小于臨界值,判為陰性。【試驗方法的局限性】    該試驗僅作為定性檢測豬流行性腹瀉病毒抗體。

 【聯(lián)系我們】

企業(yè)名稱:上海邦奕商貿(mào)有限公司

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該公司產(chǎn)品分類: 豬病檢測試劑盒 其他癌癥細胞株 人癌癥細胞株 正常細胞株 其他種屬elisa試劑盒 雞elisa試劑盒 犬elisa試劑盒 豬elisa試劑盒 牛elisa試劑盒 小鼠elisa試劑盒 大鼠elisa試劑盒 人elisa試劑盒 細胞株 科研ELISA試劑盒

FU-R1692 北京elisa廠商 人磷酸果糖激酶(人PFK)ELISA檢測試劑盒價格

北京方程生物:ELISA試劑盒免費代測,一周內(nèi)出實驗結(jié)果。 

人磷酸果糖激酶(人PFK)ELISA檢測試劑盒價格 Human Phosphofructokinase,PFK ELISA Kit 北京方程生物 人 大鼠 小鼠 elisa試劑盒價格

 

北京方程生物主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒、蛋白組學、生物化學、分子生物學類等科研產(chǎn)品與國內(nèi)各大高校,生產(chǎn)廠商,醫(yī)院,研究所以及多家企業(yè)建立了合作關系,專業(yè)的品質(zhì),的售后服務,歡迎來電。

 

FU-R1692 人磷酸果糖激酶(PFK)ELISA試劑盒 Human Phosphofructokinase,PFK ELISA KIT  
FU-R1693 人富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)ELISA試劑盒 Human CYR61 Cysteine-rich protein 61 ELISA Kit
FU-R1694 人細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)ELISA試劑盒 Huma extracellular signal -regulated kinase,ERK ELISA Kit
FU-R1695 人骨骼肌受體酪氨酸激酶(MUSK)ELISA試劑盒 Huma Musclespecific tyrosine kinase, MuSK ELISA kit
FU-R1696 人堿性成纖維細胞生長因子受體(bFGFR)ELISA試劑盒 Human bFGFR ELISA Kit
FU-R1697 人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒 Human FABP4 ELISA Kit
FU-R1698 人肽聚糖識別蛋白(PGRP-S)ELISA試劑盒 Human PGRP-S ELISA kit
FU-R1699 人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒 Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 ELISA Kit
FU-R1700 人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒 Human 1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPG ELISA Kit
FU-R1701 人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 Human 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA Kit
FU-R1702 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒 Human 1,5-anhydroglucitol,1,5-AG ELISA Kit
FU-R1703 人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒 Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit

 

人磷酸果糖激酶試劑盒,人PFK ELISA Kit,北京elisa價格 說明書 北京方程生物權(quán)威ELISA試劑盒供應商,質(zhì)量,無效退款。

 

該公司產(chǎn)品分類: PCR與RT-PCR相關 總RNA抽提試劑盒 基因組DNA抽提試劑盒 PCR純化試劑盒 DNA/RNA純化試劑盒 質(zhì)粒抽提試劑盒 Omega試劑盒 HyClone Gbico PAA進口血清 豬ELISA試劑盒說明書 雞ELISA試劑盒說明書 牛ELISA試劑盒說明書 小鼠ELISA試劑盒說明書 大鼠ELISA試劑盒說明書 ELISA試劑盒說明書 驢ELISA試劑盒 鹿ELISA試劑盒 駱駝ELISA試劑盒 馬ELISA試劑盒 培養(yǎng)基 細胞因子

人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)ELISA定量檢測試劑盒

產(chǎn)品資料人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)elisa試劑盒資料: 規(guī)     48T/96T

 樣品類型 血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等樣品類型 檢測方法 酶聯(lián)免疫法

   公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性交叉反應 由于當前的酶聯(lián)免疫科學技術和知識有限,現(xiàn)有技術不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此,交叉反應可能仍然存在    50-100 μL  實驗時間  14.5h  儲存條件  2-8°C  儲存方法 可以存儲在2 - 8°C長達1個月(專家建議:4°C恒溫保存,酶免試劑盒實驗效果更佳)。對于長期存儲,-20°C的存儲。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋,避免潮濕    6 months 工作原理人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)elisa試劑盒的原理  ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。產(chǎn)品選型人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)ELISA試劑盒的類型  ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"immunosorbent);(2)酶標記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"conjugate);(3)酶反應的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型:雙抗體夾心法測抗原操作流程雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:(1 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。(2 加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。(3 加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。(4 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAgHBeAg、AFPhCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體最好分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,作一步檢測。  在一步法測定中,當標本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復合物"。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時反應后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標準曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同(參見1.3.2,圖1-4),如按常法測讀,所得結(jié)果將低于實際的含量,這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(hook effect),因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時,反應甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時,應注意可測范圍的最高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。  假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇,例如HBsAga決定簇,也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型問題,HBsAgadradw、ayr、ayw4個亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應性,這也是用單抗作夾心法應注意的問題。  雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗體,多為IgM型,能和多種動物IgGFc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF,它可充當抗原成份,同時與固相抗體和酶標抗體結(jié)合,表現(xiàn)出假陽性反應。采用Fab')或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,由于去除了Fc段,從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類試劑的一項考核指標。  雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。應用領域人角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)ELISA試劑盒試劑準備按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。 ELISA 中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應用pH 計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。試劑的準備之加樣在 ELISA 中一般有3 次加樣步聚,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法 ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩 1 分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。

該公司產(chǎn)品分類: 維生素C代謝系列 谷胱甘肽系列 輔酶Ⅱ系列 輔酶Ⅰ系列 生化試劑盒 分子學類 生化學類 酶聯(lián)免疫學類 代理品牌 兔酶聯(lián)免疫試劑盒 牛酶聯(lián)免疫試劑盒 豬酶聯(lián)免疫試劑盒 原裝酶聯(lián)免疫試劑盒 小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒 大鼠酶聯(lián)免疫試劑盒 人酶聯(lián)免疫試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒 多克隆抗體 單克隆抗體 ABCAM抗體

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