檢測(cè)物質(zhì) | 檢測(cè)下限(ng/g) |
谷類(lèi)/飼料(低濃度) | 15 |
谷類(lèi)/飼料(高濃度) | 1000 |
(貨號(hào):MD200)
特別提醒:本試劑盒有兩種標(biāo)準(zhǔn)液,MAIZE嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)液用于測(cè)定玉米占比大的樣品,其他樣品采用嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)液,如果同時(shí)檢測(cè)大量不同種類(lèi)樣品(包括玉米),采用嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)液。
本試劑盒用于定量檢測(cè)樣本中嘔吐毒素殘留。
檢測(cè)樣本:谷物、飼料
樣本前處理:
-谷物(玉米、小麥)和飼料:研磨、甲醇-水溶液提取、過(guò)濾、稀釋?zhuān)蛇x);
-硬質(zhì)小麥:研磨、水提取、離心、稀釋
分析時(shí)間:20分鐘(不包括樣本前處理時(shí)間)
檢測(cè)限:
-玉米、小麥和飼料:0.04ppm
-硬質(zhì)小麥:0.12ppm
特異性:交叉反應(yīng)率(%)
分析物 | 交叉反應(yīng)率 |
3-乙酰-嘔吐毒素 | >100 |
嘔吐毒素 | 100 |
15-乙酰-嘔吐毒素 | 2 |
3-葡萄糖基-嘔吐毒素 | 64+/-16 |
1. 檢測(cè)原理
本試劑盒在預(yù)包被特異性嘔吐毒素抗體的微孔內(nèi)進(jìn)行。將酶標(biāo)嘔吐毒素和標(biāo)準(zhǔn)品或樣本在預(yù)混合孔混合后轉(zhuǎn)移到包被嘔吐毒素抗體的微孔,第一次孵育時(shí),標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本中的嘔吐毒素和酶標(biāo)嘔吐毒素競(jìng)爭(zhēng)微孔上的嘔吐毒素抗體結(jié)合位點(diǎn),洗板除掉所有未結(jié)合的酶標(biāo)嘔吐毒素或自由嘔吐毒素分子。然后加入一定量顯色底物反應(yīng)以檢測(cè)酶活性。加終止液終止反應(yīng),450nm波長(zhǎng)酶標(biāo)儀檢測(cè),標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中的嘔吐毒素濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。
2.試劑盒組成微孔板:96孔,預(yù)包被嘔吐毒素抗體。板條可拆開(kāi)單獨(dú)使用。
預(yù)混合板:空白,未包被抗體。
MAIZE嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液:5瓶,各1.5ml,濃度分別為:0ppm,0.04 ppm,0.25ppm,1.25 ppm,5 ppm。
嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液:5瓶,各1.5ml,濃度分別為:0ppm,0.04 ppm,0.25ppm,1.25 ppm,5 ppm。
酶偶聯(lián)物:1瓶,14ml。
10X濃縮洗液:1瓶,50ml。
顯色液:1瓶,15ml。
終止液:1瓶,9ml。
3.需要使用但試劑盒不提供的試劑和設(shè)備-天平-甲醇(小麥、玉米、飼料)
-蒸餾水或去離子水
- NaCl(小麥、玉米、飼料)
-研磨器
-搖床(可選)
-離心機(jī)或?yàn)V紙
-恒溫箱
-氮吹儀
-20-200μl、100-1000μl移液器及吸頭-20-300μl多道移液器及吸頭-含450nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀
4.注意事項(xiàng)-僅用于體外檢測(cè)。-一些試劑內(nèi)含防腐劑;終止液內(nèi)含有硫酸,具有腐蝕性;酶偶聯(lián)物對(duì)身體有害。-小心操作,避免試劑接觸皮膚、眼睛和粘膜。5.操作和存儲(chǔ)說(shuō)明-2-8°C冷藏保存,切勿冷凍。-將未用完的板條用試劑盒提供的鋁箔袋重新密封。-切勿使用過(guò)期產(chǎn)品。-不同批次試劑盒內(nèi)的成分不能混用。-請(qǐng)使用試劑盒內(nèi)提供的說(shuō)明書(shū)。
6.樣本前處理步驟
6.1小麥、玉米和飼料
-將樣本混合均勻并充分研磨;
-稱(chēng)取50g研磨樣本,并加入10g NaCl,再加入250ml 70%甲醇溶液。可選方案:稱(chēng)取5g研磨樣本,并加入1g NaCl,再加入25ml 70%甲醇溶液。
-充分振蕩3分鐘。
-過(guò)濾樣本并收集濾液。用于檢測(cè)的樣本濃度范圍應(yīng)為0.04-5ppm。
-如果樣本濃度>5ppm,用70%甲醇溶液將樣本稀釋5倍,使?jié)舛确秶鸀?span>0.2-25ppm。
建議樣本的稱(chēng)取量為50g,以得到更好結(jié)果。
6.2硬質(zhì)小麥
-將樣本混合均勻并充分研磨;
-稱(chēng)取50g研磨樣本,加入10g純氯化鈉,再加入250ml70%甲醇溶液;可選方案:稱(chēng)取5g研磨樣本,加入1g氯化鈉后再加入25ml 70%甲醇溶液。
-充分搖晃15分鐘。注意:建議用手搖晃或溫和提取系統(tǒng)。也可以使用磁力攪拌器、振蕩器或攪拌機(jī),但結(jié)果會(huì)偏高。
-過(guò)濾樣本并收集濾液。注意:過(guò)濾過(guò)程會(huì)很慢,建議過(guò)濾前讓樣本先沉淀。作為可選方法,建議在3500g離心力下離心5分鐘,收集上清液。
-用100%甲醇將上清液稀釋3倍(1+2)(例如:100μl上清液+200μl 100%甲醇)。用于檢測(cè)的樣本濃度范圍應(yīng)為0.12-15ppm。
-如果樣本濃度>5ppm,用70%甲醇溶液將樣本稀釋5倍,使?jié)舛确秶鸀?span>0.6-75ppm。
建議樣本的稱(chēng)取量為50g,以使得到更具代表性的樣本。
7.工作溶液準(zhǔn)備
嘔吐毒素標(biāo)準(zhǔn)品:即用;
酶偶聯(lián)物:即用;
洗液:用蒸餾水1:10稀釋?zhuān)?span>1+9)。注意:如果出現(xiàn)結(jié)晶,將溶液置于室溫并攪拌直至結(jié)晶完全溶解。
稀釋后的洗液在室溫放置24小時(shí)內(nèi)有效,2-8°C放置兩周內(nèi)有效。
顯色液:即用。顯色液對(duì)光敏感,應(yīng)避免光直射,避光保存。
終止液:即用。
8.檢測(cè)步驟
8.1檢測(cè)前注意事項(xiàng)
-檢測(cè)前將所有試劑室溫放置1小時(shí);
-使用后立即將所有試劑放置于2-8°C;
-不得改變檢測(cè)程序;
-不得延長(zhǎng)或縮短孵育時(shí)間;
-孵育溫度不得高于25°C或低于18°C;
-孵育過(guò)程中不得晃動(dòng)酶標(biāo)板;
-使用精準(zhǔn)的移液器及吸頭;
-一旦開(kāi)始實(shí)驗(yàn),不要間斷地完成所有步驟,不要讓微孔干透;
-ELISA方法結(jié)果的再現(xiàn)性很大程度取決于洗板過(guò)程的效率和一致性,要按照介紹的程序洗板;
-為避免交叉污染,加不同樣品和標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)要更換移液器吸頭;
-不得讓吸頭接觸到微孔內(nèi)的液體或者微孔內(nèi)表面;
-孵育時(shí)要避免光直射。建議孵育時(shí)用封板膜封板。
8.2檢測(cè)步驟
1.計(jì)算需要用到的微孔數(shù)量,標(biāo)記最大光吸收值孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔的位置。注意要考慮到都要做重復(fù)。取出需要的板條,并將未使用的板條重新用鋁箔袋密封。準(zhǔn)備同等數(shù)量的預(yù)混合板條。
2.每個(gè)預(yù)混合孔加100μl酶偶聯(lián)物。
3.將標(biāo)準(zhǔn)品、樣本加50μl到對(duì)應(yīng)預(yù)混合孔。標(biāo)準(zhǔn)品和樣本溶液含高濃度甲醇,因此加入微孔前用移液器將溶液反復(fù)吹打幾次。
4.用移液器將預(yù)混合孔內(nèi)溶液混勻(上下吹打3次),并立即吸取100μl到對(duì)應(yīng)包被嘔吐毒素抗體的微孔。注意:吸取不同微孔溶液時(shí),要更換吸頭以避免交叉污染。
5.室溫孵育10分鐘。不得延長(zhǎng)孵育時(shí)間,孵育時(shí)不要晃動(dòng)微孔板。
6.洗板順序
-孵育后,倒掉孔內(nèi)液體;
-將微孔加滿工作濃度洗滌液,然后倒掉洗滌液;
-用力上下在吸水紙上拍板,將微孔內(nèi)液體完全拍干。
重復(fù)洗滌過(guò)程3次。
在干凈的吸水紙上拍板,拍干微孔內(nèi)的液體。但不可使微孔干透。
7.顯色:用多道移液器加100μl顯色液到微孔,來(lái)回晃動(dòng)數(shù)秒鐘。
8.室溫避光孵育10分鐘。
9.用多道移液器加50μl終止液到各孔。來(lái)回晃動(dòng)數(shù)秒鐘充分混勻。
10.在1小時(shí)內(nèi),用酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀數(shù)。
9. 計(jì)算結(jié)果
-計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的平均吸光值;
-用計(jì)算得到的平均吸光值分別除以0標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值并乘以100;
標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值(或樣品)
---------------------------- X100= (%)吸光度值
0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值 (Bo )
-以標(biāo)準(zhǔn)品濃度值(ng/ml)的半對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo),B/B0值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;
-將樣本的B/B0值帶入校準(zhǔn)曲線,得到相應(yīng)的濃度值;
-要得到樣本中嘔吐毒素的濃度值,還需要將從校準(zhǔn)曲線讀到的濃度乘以相應(yīng)樣本的稀釋倍數(shù)。
-小麥、玉米和飼料:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度已經(jīng)考慮了樣本稀釋倍數(shù),從標(biāo)準(zhǔn)曲線讀到的濃度值即為樣本中嘔吐毒素的濃度。
-硬質(zhì)小麥:稀釋倍數(shù)為3。
-所有樣本:如果提取過(guò)程中進(jìn)一步稀釋5倍以得到更大濃度范圍,則結(jié)果需要再乘以稀釋倍數(shù)5.
10.樣品標(biāo)準(zhǔn)曲線示例
11.結(jié)果評(píng)價(jià)
計(jì)算出結(jié)果后,還需要驗(yàn)證檢測(cè)效果。通過(guò)將得到的結(jié)果和說(shuō)明書(shū)提供的技術(shù)參數(shù)比較驗(yàn)證。如果結(jié)果與參數(shù)不符,請(qǐng)檢測(cè)試劑盒的有效期、讀取吸光值使用的波長(zhǎng)、以及操作過(guò)程是否正確。如果不是操作錯(cuò)誤,請(qǐng)聯(lián)系我們的技術(shù)支持。
12.試劑盒參數(shù)
描述 | 參數(shù) |
平均Bo吸光度 | ≥0.7 OD450nm |
B/Bo 50% | 0.06-0.5ng/ml |
13.免責(zé)聲明
出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果時(shí),必須用確證方法對(duì)樣本檢測(cè)。TECNA公司不承擔(dān)任何因?yàn)槭褂谜咤e(cuò)誤使用試劑盒造成的損失。
供應(yīng)霉菌毒素試劑盒 | 黃曲霉毒素B1 |
黃曲霉毒素M1 | |
玉米赤霉烯酮 | |
T2毒素 | |
赭曲霉毒素 | |
伏馬毒素 |
REAGEN嘔吐毒素酶聯(lián)免疫反應(yīng)檢測(cè)試劑盒
RNM98004
1.概述:
REAGEN 嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒是用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫的方法定量分析谷類(lèi)、飼料、干肉、干魚(yú)、種子、牛奶中的嘔吐毒素。該試劑盒有以下特點(diǎn)
高回收率(75-105%)
高重復(fù)性。
快速(在不考慮樣品數(shù)量的情況下只需不到1.5小時(shí))
2.試劑盒原理
REAGEN 嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒基于競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫檢測(cè)原理,嘔吐毒素抗體包被在酶標(biāo)板孔內(nèi),分析過(guò)程中,樣品和酶標(biāo)二抗加入微孔中,如果樣品中存在嘔吐毒素,就可競(jìng)爭(zhēng)與嘔吐毒素抗體結(jié)合,阻止了酶標(biāo)二抗與包被的抗體結(jié)合。經(jīng)酶催化底物發(fā)生反應(yīng)顏色變化,顏色的深淺與嘔吐毒素的濃度成反比。
3.檢測(cè)下限
檢測(cè)物質(zhì) | 檢測(cè)下限(ng/g) |
谷類(lèi)/飼料(低濃度) | 125 |
谷類(lèi)/飼料(高濃度) | 500 |
德國(guó)拜發(fā)R-Biopharm公司——專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)食品安全檢驗(yàn)試劑盒的公司,產(chǎn)品包括食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過(guò)敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)試劑盒,以及微生物、維生素等的檢測(cè)產(chǎn)品;產(chǎn)品還包含有原德國(guó)寶靈曼的有關(guān)化學(xué)物質(zhì)的生物及酶法分析試劑盒。拜法檢測(cè)產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各級(jí)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室及食品生產(chǎn)企業(yè)。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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微囊藻毒素檢測(cè)試劑盒 | Microcystin Elisa kit |
遺忘性貝類(lèi)毒素(ASP)檢測(cè)試劑盒 | ASP ELISA Kit |
麻痹性貝類(lèi)毒素(PSP)檢測(cè)試劑盒 | PSP ELISA Kit |
腹瀉性貝類(lèi)毒素(DSP)檢測(cè)試劑盒 | DSP ELISA Kit |
神經(jīng)性貝類(lèi)毒素(NSP)檢測(cè)試劑盒 | NSP ELISA Kit |
黃曲霉毒素B1檢測(cè)試劑盒 | Aflatoxin B1 ELISA Kit |
黃曲霉毒素M1檢測(cè)試劑盒 | Aflatoxin M1 ELISA Kit |
玉米赤霉烯酮檢測(cè)試劑盒 | Zearale ELISA Kit |
赭曲霉素檢測(cè)試劑盒 | Ochratoxin ELISA Kit |
T-2毒素檢測(cè)試劑盒 | T-2 Toxin ELISA Kit |
伏馬毒素檢測(cè)試劑盒 | Fumonisin ELISA Kit |
嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒 | Deoxynivalenol ELISA Kit |
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1.概述:
REAGEN™ 嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒是用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫的方法定量分析谷類(lèi)、飼料、干肉、干魚(yú)、種子、牛奶中的嘔吐毒素。該試劑盒有以下特點(diǎn)
Ø 高回收率(75-95%)
Ø 快速(在不考慮樣品數(shù)量的情況下只需不到1.5小時(shí))韓生13828743512 企鵝號(hào) 1050278014
Ø 高重復(fù)性。
2.試劑盒原理
REAGEN™ 嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒基于競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫檢測(cè)原理,嘔吐毒素抗體包被在酶標(biāo)板孔內(nèi),分析過(guò)程中,樣品和酶標(biāo)二抗加入微孔中,如果樣品中存在嘔吐毒素,就可競(jìng)爭(zhēng)與嘔吐毒素抗體結(jié)合,阻止了酶標(biāo)二抗與包被的抗體結(jié)合。經(jīng)酶催化底物發(fā)生反應(yīng)顏色變化,顏色的深淺與嘔吐毒素的濃度成反比。
3.檢測(cè)下限
檢測(cè)物質(zhì) | 檢測(cè)下限(ng/g) |
谷類(lèi)/飼料(低濃度) | 15 |
谷類(lèi)/飼料(高濃度) | 1000 |
技術(shù)咨詢,產(chǎn)品購(gòu)買(mǎi) 楊經(jīng)理
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
RIDASCREEN® DON(訂貨號(hào):R5906)嘔吐霉素檢測(cè)試劑盒,采用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫反應(yīng),用于定量檢測(cè)谷物、麥芽、飼料啤酒和麥芽汁中的嘔吐霉素含量。
試劑盒中含有酶聯(lián)免疫檢測(cè)所需的所有試劑,包括標(biāo)準(zhǔn)品。
試劑盒足夠進(jìn)行96 次檢測(cè)(包括標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定)。
定量分析需要使用微孔板酶標(biāo)儀。
本試劑盒對(duì)技術(shù)人員無(wú)任何專(zhuān)業(yè)特殊使用技能的要求。若需要我們樂(lè)意為您提供免費(fèi)的使用培訓(xùn)。
樣品處理: 谷物、麥芽、飼料樣品:提取,過(guò)濾
啤酒樣品:除氣(CO2)
麥芽汁樣品:不需任何預(yù)處理
檢測(cè)時(shí)間: 樣品制備(以10 個(gè)樣品為例)
谷物、麥芽、飼料樣品 .............................. 約10 分鐘
啤酒樣品 ...................................................... 約5 分鐘
麥芽汁樣品 ............................................................. 無(wú)
檢測(cè)過(guò)程(孵育時(shí)間) ................................... 45 分鐘
檢測(cè)限: 谷物、麥芽、飼料樣品 ................................. 18.5 ppb
啤酒樣品 ......................................................... 3.7 ppb
麥芽汁樣品 ..................................................... 3.7 ppb
回收率: 谷物、麥芽、飼料樣品
啤酒和麥芽汁樣品中 ................................ 85 - 110 %
特異性: RIDASCREEN® DON 嘔吐霉素檢測(cè)試劑盒的特異性根
據(jù)與相應(yīng)霉菌毒素的交叉反應(yīng)確定。
嘔吐毒素 ......................................................... 100 %
3-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇 .......................... > 100 %
15-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇 ......................... 約19 %
雪腐鐮刀菌烯醇 ............................................... 約4 %
鐮刀菌烯酮 X .................................................... < 1 %
T-2 毒素 ............................................................ < 1 %
準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)Rv值,大于等于0.9900。靈敏度:最低檢測(cè)濃度小于1.0 ng/mL。特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi),板間變異系數(shù)均小于15%。
嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒ELISA 酶結(jié)合物的要點(diǎn):
免疫酶技術(shù)又稱(chēng)酶免疫測(cè)定法。它是把抗原抗體的特異性反應(yīng)和酶的高效催化作用相結(jié)合而建立的。該技術(shù)通過(guò)化學(xué)方法將酶與抗體或抗抗體結(jié)合,形成酶標(biāo)記物,這些酶標(biāo)記物仍保持免疫學(xué)活性和酶的活性,然后將它與相應(yīng)的抗體或抗原起反應(yīng),形成酶標(biāo)記復(fù)合物,結(jié)合在免疫復(fù)合物上的酶,在遇到相應(yīng)的底物時(shí),則催化底物產(chǎn)生水解、氧化或還原等反應(yīng),而生成可溶性或不溶性有色物質(zhì)。因此,免疫酶技術(shù)是一項(xiàng)定位、定性和定量的綜合技術(shù)。
嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中加樣的注意點(diǎn):
1.注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類(lèi)似過(guò)氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離,則可以在2~8 ℃下保存一周,
2.如為有菌操作,則建議冰凍保存。elisa試劑盒樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存,應(yīng)在-70 ℃以下。
3.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
4.標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。
5.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。
6.凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。
公司研發(fā)生產(chǎn)的細(xì)胞因子ELISA試劑盒系列產(chǎn)品,生產(chǎn)原料均來(lái)自國(guó)外著名廠家,并經(jīng)過(guò)公司嚴(yán)格的篩選和質(zhì)量檢測(cè)。嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒采用嚴(yán)格的體外診斷試劑生產(chǎn)技術(shù)專(zhuān)業(yè)制造,品質(zhì)卓越,性能穩(wěn)定,可與ELISA試劑盒開(kāi)發(fā)行業(yè)內(nèi)國(guó)際知名品牌品質(zhì)相媲美。