檢測物質(zhì) | 檢測下限(ng/g) |
谷類/飼料(低濃度) | 15 |
谷類/飼料(高濃度) | 1000 |
(貨號:MD200)
特別提醒:本試劑盒有兩種標準液,MAIZE嘔吐毒素標準液用于測定玉米占比大的樣品,其他樣品采用嘔吐毒素標準液,如果同時檢測大量不同種類樣品(包括玉米),采用嘔吐毒素標準液。
本試劑盒用于定量檢測樣本中嘔吐毒素殘留。
檢測樣本:谷物、飼料
樣本前處理:
-谷物(玉米、小麥)和飼料:研磨、甲醇-水溶液提取、過濾、稀釋(可選);
-硬質(zhì)小麥:研磨、水提取、離心、稀釋
分析時間:20分鐘(不包括樣本前處理時間)
檢測限:
-玉米、小麥和飼料:0.04ppm
-硬質(zhì)小麥:0.12ppm
特異性:交叉反應(yīng)率(%)
分析物 | 交叉反應(yīng)率 |
3-乙酰-嘔吐毒素 | >100 |
嘔吐毒素 | 100 |
15-乙酰-嘔吐毒素 | 2 |
3-葡萄糖基-嘔吐毒素 | 64+/-16 |
1. 檢測原理
本試劑盒在預(yù)包被特異性嘔吐毒素抗體的微孔內(nèi)進行。將酶標嘔吐毒素和標準品或樣本在預(yù)混合孔混合后轉(zhuǎn)移到包被嘔吐毒素抗體的微孔,第一次孵育時,標準溶液或樣本中的嘔吐毒素和酶標嘔吐毒素競爭微孔上的嘔吐毒素抗體結(jié)合位點,洗板除掉所有未結(jié)合的酶標嘔吐毒素或自由嘔吐毒素分子。然后加入一定量顯色底物反應(yīng)以檢測酶活性。加終止液終止反應(yīng),450nm波長酶標儀檢測,標準品或樣品中的嘔吐毒素濃度與吸收光強度成反比。
2.試劑盒組成微孔板:96孔,預(yù)包被嘔吐毒素抗體。板條可拆開單獨使用。
預(yù)混合板:空白,未包被抗體。
MAIZE嘔吐毒素標準溶液:5瓶,各1.5ml,濃度分別為:0ppm,0.04 ppm,0.25ppm,1.25 ppm,5 ppm。
嘔吐毒素標準溶液:5瓶,各1.5ml,濃度分別為:0ppm,0.04 ppm,0.25ppm,1.25 ppm,5 ppm。
酶偶聯(lián)物:1瓶,14ml。
10X濃縮洗液:1瓶,50ml。
顯色液:1瓶,15ml。
終止液:1瓶,9ml。
3.需要使用但試劑盒不提供的試劑和設(shè)備-天平-甲醇(小麥、玉米、飼料)
-蒸餾水或去離子水
- NaCl(小麥、玉米、飼料)
-研磨器
-搖床(可選)
-離心機或濾紙
-恒溫箱
-氮吹儀
-20-200μl、100-1000μl移液器及吸頭-20-300μl多道移液器及吸頭-含450nm波長的酶標儀
4.注意事項-僅用于體外檢測。-一些試劑內(nèi)含防腐劑;終止液內(nèi)含有硫酸,具有腐蝕性;酶偶聯(lián)物對身體有害。-小心操作,避免試劑接觸皮膚、眼睛和粘膜。5.操作和存儲說明-2-8°C冷藏保存,切勿冷凍。-將未用完的板條用試劑盒提供的鋁箔袋重新密封。-切勿使用過期產(chǎn)品。-不同批次試劑盒內(nèi)的成分不能混用。-請使用試劑盒內(nèi)提供的說明書。
6.樣本前處理步驟
6.1小麥、玉米和飼料
-將樣本混合均勻并充分研磨;
-稱取50g研磨樣本,并加入10g NaCl,再加入250ml 70%甲醇溶液??蛇x方案:稱取5g研磨樣本,并加入1g NaCl,再加入25ml 70%甲醇溶液。
-充分振蕩3分鐘。
-過濾樣本并收集濾液。用于檢測的樣本濃度范圍應(yīng)為0.04-5ppm。
-如果樣本濃度>5ppm,用70%甲醇溶液將樣本稀釋5倍,使?jié)舛确秶鸀?span>0.2-25ppm。
建議樣本的稱取量為50g,以得到更好結(jié)果。
6.2硬質(zhì)小麥
-將樣本混合均勻并充分研磨;
-稱取50g研磨樣本,加入10g純氯化鈉,再加入250ml70%甲醇溶液;可選方案:稱取5g研磨樣本,加入1g氯化鈉后再加入25ml 70%甲醇溶液。
-充分搖晃15分鐘。注意:建議用手搖晃或溫和提取系統(tǒng)。也可以使用磁力攪拌器、振蕩器或攪拌機,但結(jié)果會偏高。
-過濾樣本并收集濾液。注意:過濾過程會很慢,建議過濾前讓樣本先沉淀。作為可選方法,建議在3500g離心力下離心5分鐘,收集上清液。
-用100%甲醇將上清液稀釋3倍(1+2)(例如:100μl上清液+200μl 100%甲醇)。用于檢測的樣本濃度范圍應(yīng)為0.12-15ppm。
-如果樣本濃度>5ppm,用70%甲醇溶液將樣本稀釋5倍,使?jié)舛确秶鸀?span>0.6-75ppm。
建議樣本的稱取量為50g,以使得到更具代表性的樣本。
7.工作溶液準備
嘔吐毒素標準品:即用;
酶偶聯(lián)物:即用;
洗液:用蒸餾水1:10稀釋(1+9)。注意:如果出現(xiàn)結(jié)晶,將溶液置于室溫并攪拌直至結(jié)晶完全溶解。
稀釋后的洗液在室溫放置24小時內(nèi)有效,2-8°C放置兩周內(nèi)有效。
顯色液:即用。顯色液對光敏感,應(yīng)避免光直射,避光保存。
終止液:即用。
8.檢測步驟
8.1檢測前注意事項
-檢測前將所有試劑室溫放置1小時;
-使用后立即將所有試劑放置于2-8°C;
-不得改變檢測程序;
-不得延長或縮短孵育時間;
-孵育溫度不得高于25°C或低于18°C;
-孵育過程中不得晃動酶標板;
-使用精準的移液器及吸頭;
-一旦開始實驗,不要間斷地完成所有步驟,不要讓微孔干透;
-ELISA方法結(jié)果的再現(xiàn)性很大程度取決于洗板過程的效率和一致性,要按照介紹的程序洗板;
-為避免交叉污染,加不同樣品和標準品時要更換移液器吸頭;
-不得讓吸頭接觸到微孔內(nèi)的液體或者微孔內(nèi)表面;
-孵育時要避免光直射。建議孵育時用封板膜封板。
8.2檢測步驟
1.計算需要用到的微孔數(shù)量,標記最大光吸收值孔、標準品孔和樣本孔的位置。注意要考慮到都要做重復(fù)。取出需要的板條,并將未使用的板條重新用鋁箔袋密封。準備同等數(shù)量的預(yù)混合板條。
2.每個預(yù)混合孔加100μl酶偶聯(lián)物。
3.將標準品、樣本加50μl到對應(yīng)預(yù)混合孔。標準品和樣本溶液含高濃度甲醇,因此加入微孔前用移液器將溶液反復(fù)吹打幾次。
4.用移液器將預(yù)混合孔內(nèi)溶液混勻(上下吹打3次),并立即吸取100μl到對應(yīng)包被嘔吐毒素抗體的微孔。注意:吸取不同微孔溶液時,要更換吸頭以避免交叉污染。
5.室溫孵育10分鐘。不得延長孵育時間,孵育時不要晃動微孔板。
6.洗板順序
-孵育后,倒掉孔內(nèi)液體;
-將微孔加滿工作濃度洗滌液,然后倒掉洗滌液;
-用力上下在吸水紙上拍板,將微孔內(nèi)液體完全拍干。
重復(fù)洗滌過程3次。
在干凈的吸水紙上拍板,拍干微孔內(nèi)的液體。但不可使微孔干透。
7.顯色:用多道移液器加100μl顯色液到微孔,來回晃動數(shù)秒鐘。
8.室溫避光孵育10分鐘。
9.用多道移液器加50μl終止液到各孔。來回晃動數(shù)秒鐘充分混勻。
10.在1小時內(nèi),用酶標儀450nm波長讀數(shù)。
9. 計算結(jié)果
-計算標準品和樣品的平均吸光值;
-用計算得到的平均吸光值分別除以0標準品的吸光值并乘以100;
標準品的吸光度值(或樣品)
---------------------------- X100= (%)吸光度值
0標準的吸光度值 (Bo )
-以標準品濃度值(ng/ml)的半對數(shù)值為橫坐標,B/B0值為縱坐標繪制標準曲線;
-將樣本的B/B0值帶入校準曲線,得到相應(yīng)的濃度值;
-要得到樣本中嘔吐毒素的濃度值,還需要將從校準曲線讀到的濃度乘以相應(yīng)樣本的稀釋倍數(shù)。
-小麥、玉米和飼料:由于標準品濃度已經(jīng)考慮了樣本稀釋倍數(shù),從標準曲線讀到的濃度值即為樣本中嘔吐毒素的濃度。
-硬質(zhì)小麥:稀釋倍數(shù)為3。
-所有樣本:如果提取過程中進一步稀釋5倍以得到更大濃度范圍,則結(jié)果需要再乘以稀釋倍數(shù)5.
10.樣品標準曲線示例
11.結(jié)果評價
計算出結(jié)果后,還需要驗證檢測效果。通過將得到的結(jié)果和說明書提供的技術(shù)參數(shù)比較驗證。如果結(jié)果與參數(shù)不符,請檢測試劑盒的有效期、讀取吸光值使用的波長、以及操作過程是否正確。如果不是操作錯誤,請聯(lián)系我們的技術(shù)支持。
12.試劑盒參數(shù)
描述 | 參數(shù) |
平均Bo吸光度 | ≥0.7 OD450nm |
B/Bo 50% | 0.06-0.5ng/ml |
13.免責(zé)聲明
出現(xiàn)陽性結(jié)果時,必須用確證方法對樣本檢測。TECNA公司不承擔(dān)任何因為使用者錯誤使用試劑盒造成的損失。
供應(yīng)霉菌毒素試劑盒 | 黃曲霉毒素B1 |
黃曲霉毒素M1 | |
玉米赤霉烯酮 | |
T2毒素 | |
赭曲霉毒素 | |
伏馬毒素 |
REAGEN嘔吐毒素酶聯(lián)免疫反應(yīng)檢測試劑盒
RNM98004
1.概述:
REAGEN 嘔吐毒素檢測試劑盒是用競爭性酶聯(lián)免疫的方法定量分析谷類、飼料、干肉、干魚、種子、牛奶中的嘔吐毒素。該試劑盒有以下特點
高回收率(75-105%)
高重復(fù)性。
快速(在不考慮樣品數(shù)量的情況下只需不到1.5小時)
2.試劑盒原理
REAGEN 嘔吐毒素檢測試劑盒基于競爭性酶聯(lián)免疫檢測原理,嘔吐毒素抗體包被在酶標板孔內(nèi),分析過程中,樣品和酶標二抗加入微孔中,如果樣品中存在嘔吐毒素,就可競爭與嘔吐毒素抗體結(jié)合,阻止了酶標二抗與包被的抗體結(jié)合。經(jīng)酶催化底物發(fā)生反應(yīng)顏色變化,顏色的深淺與嘔吐毒素的濃度成反比。
3.檢測下限
檢測物質(zhì) | 檢測下限(ng/g) |
谷類/飼料(低濃度) | 125 |
谷類/飼料(高濃度) | 500 |
德國拜發(fā)R-Biopharm公司——專業(yè)生產(chǎn)食品安全檢驗試劑盒的公司,產(chǎn)品包括食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測試劑盒,以及微生物、維生素等的檢測產(chǎn)品;產(chǎn)品還包含有原德國寶靈曼的有關(guān)化學(xué)物質(zhì)的生物及酶法分析試劑盒。拜法檢測產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各級檢測實驗室及食品生產(chǎn)企業(yè)。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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微囊藻毒素檢測試劑盒 | Microcystin Elisa kit |
遺忘性貝類毒素(ASP)檢測試劑盒 | ASP ELISA Kit |
麻痹性貝類毒素(PSP)檢測試劑盒 | PSP ELISA Kit |
腹瀉性貝類毒素(DSP)檢測試劑盒 | DSP ELISA Kit |
神經(jīng)性貝類毒素(NSP)檢測試劑盒 | NSP ELISA Kit |
黃曲霉毒素B1檢測試劑盒 | Aflatoxin B1 ELISA Kit |
黃曲霉毒素M1檢測試劑盒 | Aflatoxin M1 ELISA Kit |
玉米赤霉烯酮檢測試劑盒 | Zearale ELISA Kit |
赭曲霉素檢測試劑盒 | Ochratoxin ELISA Kit |
T-2毒素檢測試劑盒 | T-2 Toxin ELISA Kit |
伏馬毒素檢測試劑盒 | Fumonisin ELISA Kit |
嘔吐毒素檢測試劑盒 | Deoxynivalenol ELISA Kit |
| |
1.概述:
REAGEN™ 嘔吐毒素檢測試劑盒是用競爭性酶聯(lián)免疫的方法定量分析谷類、飼料、干肉、干魚、種子、牛奶中的嘔吐毒素。該試劑盒有以下特點
Ø 高回收率(75-95%)
Ø 快速(在不考慮樣品數(shù)量的情況下只需不到1.5小時)韓生13828743512 企鵝號 1050278014
Ø 高重復(fù)性。
2.試劑盒原理
REAGEN™ 嘔吐毒素檢測試劑盒基于競爭性酶聯(lián)免疫檢測原理,嘔吐毒素抗體包被在酶標板孔內(nèi),分析過程中,樣品和酶標二抗加入微孔中,如果樣品中存在嘔吐毒素,就可競爭與嘔吐毒素抗體結(jié)合,阻止了酶標二抗與包被的抗體結(jié)合。經(jīng)酶催化底物發(fā)生反應(yīng)顏色變化,顏色的深淺與嘔吐毒素的濃度成反比。
3.檢測下限
檢測物質(zhì) | 檢測下限(ng/g) |
谷類/飼料(低濃度) | 15 |
谷類/飼料(高濃度) | 1000 |
技術(shù)咨詢,產(chǎn)品購買 楊經(jīng)理
產(chǎn)品簡介
RIDASCREEN® DON(訂貨號:R5906)嘔吐霉素檢測試劑盒,采用競爭性酶聯(lián)免疫反應(yīng),用于定量檢測谷物、麥芽、飼料啤酒和麥芽汁中的嘔吐霉素含量。
試劑盒中含有酶聯(lián)免疫檢測所需的所有試劑,包括標準品。
試劑盒足夠進行96 次檢測(包括標準測定)。
定量分析需要使用微孔板酶標儀。
本試劑盒對技術(shù)人員無任何專業(yè)特殊使用技能的要求。若需要我們樂意為您提供免費的使用培訓(xùn)。
樣品處理: 谷物、麥芽、飼料樣品:提取,過濾
啤酒樣品:除氣(CO2)
麥芽汁樣品:不需任何預(yù)處理
檢測時間: 樣品制備(以10 個樣品為例)
谷物、麥芽、飼料樣品 .............................. 約10 分鐘
啤酒樣品 ...................................................... 約5 分鐘
麥芽汁樣品 ............................................................. 無
檢測過程(孵育時間) ................................... 45 分鐘
檢測限: 谷物、麥芽、飼料樣品 ................................. 18.5 ppb
啤酒樣品 ......................................................... 3.7 ppb
麥芽汁樣品 ..................................................... 3.7 ppb
回收率: 谷物、麥芽、飼料樣品
啤酒和麥芽汁樣品中 ................................ 85 - 110 %
特異性: RIDASCREEN® DON 嘔吐霉素檢測試劑盒的特異性根
據(jù)與相應(yīng)霉菌毒素的交叉反應(yīng)確定。
嘔吐毒素 ......................................................... 100 %
3-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇 .......................... > 100 %
15-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇 ......................... 約19 %
雪腐鐮刀菌烯醇 ............................................... 約4 %
鐮刀菌烯酮 X .................................................... < 1 %
T-2 毒素 ............................................................ < 1 %
準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)Rv值,大于等于0.9900。靈敏度:最低檢測濃度小于1.0 ng/mL。特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi),板間變異系數(shù)均小于15%。
嘔吐毒素檢測試劑盒ELISA 酶結(jié)合物的要點:
免疫酶技術(shù)又稱酶免疫測定法。它是把抗原抗體的特異性反應(yīng)和酶的高效催化作用相結(jié)合而建立的。該技術(shù)通過化學(xué)方法將酶與抗體或抗抗體結(jié)合,形成酶標記物,這些酶標記物仍保持免疫學(xué)活性和酶的活性,然后將它與相應(yīng)的抗體或抗原起反應(yīng),形成酶標記復(fù)合物,結(jié)合在免疫復(fù)合物上的酶,在遇到相應(yīng)的底物時,則催化底物產(chǎn)生水解、氧化或還原等反應(yīng),而生成可溶性或不溶性有色物質(zhì)。因此,免疫酶技術(shù)是一項定位、定性和定量的綜合技術(shù)。
嘔吐毒素檢測試劑盒實驗中加樣的注意點:
1.注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8 ℃下保存一周,
2.如為有菌操作,則建議冰凍保存。elisa試劑盒樣本的長時間保存,應(yīng)在-70 ℃以下。
3.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
4.標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
5.冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。
6.凍融標本的混勻亦應(yīng)注意,不要進行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。
公司研發(fā)生產(chǎn)的細胞因子ELISA試劑盒系列產(chǎn)品,生產(chǎn)原料均來自國外著名廠家,并經(jīng)過公司嚴格的篩選和質(zhì)量檢測。嘔吐毒素檢測試劑盒采用嚴格的體外診斷試劑生產(chǎn)技術(shù)專業(yè)制造,品質(zhì)卓越,性能穩(wěn)定,可與ELISA試劑盒開發(fā)行業(yè)內(nèi)國際知名品牌品質(zhì)相媲美。