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  ELISA技術(shù)的-操作要點(diǎn)

    的試劑,良好的儀器和正確的操作是ELISA檢測(cè)結(jié)果的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn).本文將敘述板式注意要點(diǎn),要詳細(xì)的使用說(shuō)明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出的結(jié)果.

    1 標(biāo)本的采取和保存

可用作 ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液（如血清）,分泌物（唾液）和排泄物（如尿液,糞便）等。均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原 成份.有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清,尿液）,有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）.大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本 .血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清.制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固,血塊收縮后即可取得.除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本.在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用.血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色.血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè).如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng).如在冰箱中保存過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深.一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存.凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩.混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè).反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存.保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑.

    2 試劑的準(zhǔn)備

按試劑盒說(shuō)明書(shū)的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑. ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的.自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正.從冰箱中取出的試 驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用.試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存.

    3 加樣

在 ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物.加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部 ,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡.

備注：只限參考，具體操作需按說(shuō)明書(shū)。請(qǐng)來(lái)電咨詢(xún)。

（注：本試劑只用于科研，歡迎來(lái)電咨詢(xún)!）如需訂購(gòu)請(qǐng)聯(lián)系24小時(shí)為您服務(wù)：

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Elisa試劑盒：96T/48T

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3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7. 溫育：操作同3。8. 洗滌：操作同5。9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。 

百日咳毒素試劑盒,人（PT）Elisa試劑盒

CAS:1228-53-1價(jià)格,雙（對(duì)硝基苯）硫砜?jī)r(jià)格，5g糖原溶液2X0.5ML價(jià)格,包裝:2X0.5MLCAS:20064,DL-色氨酸,純度：99%,規(guī)格：5gCAS:189807-21-4價(jià)格,4-氟-2-三氟甲基苯甲酰氯價(jià)格，1gCAS:540-37-4價(jià)格,4-碘苯胺價(jià)格，50g鉑釕黑nominally,純度：Pt5,規(guī)格：25gCAS:36288價(jià)格,3-氨基苯甲酸價(jià)格，25g2-甲氧基-4-（三氟甲氧基）苯甲酸價(jià)格，1gCAS:95-65-8價(jià)格,3,4-二甲基苯酚價(jià)格，5g"57184-23-3|1-（環(huán)己基甲基）哌嗪,產(chǎn)品名稱(chēng)：1-（環(huán)己基甲基）哌嗪CasNo.：57184-23-3分子式：C11H22N2分子量：182.31含量：98%"CAS:1468-39-9價(jià)格,異戊酸酐價(jià)格，5g甲醇,規(guī)格型號(hào):HPLC4L916792-07-9|2-溴-4-氟-5-甲基苯腈,產(chǎn)品名稱(chēng)：2-溴-4-氟-5-甲基苯腈CasNo：916792-07-9含量：98%CAS:2023600價(jià)格,海綿狀鉑價(jià)格，5gCAS:459-22-3價(jià)格,4-氟苯乙腈價(jià)格，5gCAS:127-07-1,羥基脲價(jià)格,英文名稱(chēng):Hydroxyurea,二抗形式:Anti-neoplastic.Inactivatesribonucleosidereductasebyformingafreeradicalnitroxidethatbindsatyrosylfreeradicalintheactivesiteoftheenzyme.,標(biāo)記類(lèi)型:98%,規(guī)格:250mgBrass spheres, alloy 260, 6.35mm （0.25in） dia 6.35價(jià)格，CAS:25233-30-1價(jià)格,聚苯胺價(jià)格，10gCAS:81055-73-4價(jià)格,2,6-二氯苯甲酸乙酯價(jià)格，1g三羥基十六烷酸（紫膠桐酸）標(biāo)準(zhǔn)品Trihydroxyhexadecanoic Acid （Aleuritic價(jià)格,英文名稱(chēng):Trihydroxyhexadecanoic Acid （Aleuritic,規(guī)格:5 mgCAS:542-75-6價(jià)格,1,3-二氯丙烯價(jià)格，25gCAS:23364-44-5價(jià)格,（1S,2R）-（+）-2-氨基-1,2-二苯基乙醇價(jià)格，1gCAS:1459-00-3價(jià)格,1-溴-2-苯基丙烷價(jià)格，25g3748-13-8|1,3-二異丙烯基苯，產(chǎn)品名稱(chēng)：1,3-二異丙烯基苯 Cas No.：3748-13-8 分子式：C12H14 分子量：158.24 含量：98%3,3-二乙氧基丙酸乙酯CAS:10601-80-6,DiethoxypropionicAcidEthylEs,95%人參皂苷CK,英文名稱(chēng):Compound K,檢測(cè)方法/純度:HPLC≥98%,規(guī)格:20mg/支巴；丁卡因鹽；易咳嗪；氨蝶呤；乙胺嘧啶；匹呋氨芐青霉素等。此外，還用于農(nóng)藥及作分析試劑,96%CAS:1591-98-6價(jià)格,4-溴-2-甲基苯基異氰酸酯價(jià)格，1gCAS:95-63-6價(jià)格,1,2,4-三價(jià)格，1LCAS:2227-64-7價(jià)格,2-溴-3＇-硝基苯乙酮價(jià)格，10gCAS:827614-64-2價(jià)格,6-氨基吡啶-3-硼酸頻哪醇酯價(jià)格，1g"71189-23-6|噻吩-2,3-二甲酸，產(chǎn)品名稱(chēng)：噻吩-23-二甲酸CasNo.：71189-23-6含量：98%"CAS:3096-81-9價(jià)格,4-苯氧基苯甲腈價(jià)格，2g15017-52-4|4-氟-3-硝基溴芐,產(chǎn)品名稱(chēng)：4-氟-3-硝基溴芐CasNo：15017-52-4分子式：C7H5BrFNO2分子量：23402含量：98%2,3-二氯-6-（三氟甲基）苯甲醛價(jià)格，1gCAS:3130-87-8價(jià)格,DL-天門(mén)冬素一水化合物價(jià)格，100gCAS:41836-28-6價(jià)格,三［N,N-雙（三甲基硅烷）胺］鐿（III）價(jià)格，1gCAS:65934-74-9價(jià)格,5-氨基-2-甲基三氟價(jià)格，25gCAS:312-84-5,D-絲氨酸,價(jià)格,D-Serine,產(chǎn)地:,規(guī)格:BR肝素鈉180u/mg,產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn),規(guī)格:1g

、黃曲霉毒素試劑盒和黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)以及測(cè)定方法 Cosmosil 5C18-MS-11的簡(jiǎn)介：據(jù)2010年中藥典規(guī)定：以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水為流動(dòng)相，流速為每分0.8mL；采用柱后衍生法檢測(cè)，衍生溶液為0.05%的碘溶液，衍生化泵流速每分鐘0.3mL，衍生化溫度70℃；以熒光檢測(cè)器檢測(cè)。兩個(gè)相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5.（2010年中藥典部 附錄61）二、黃曲霉毒素試劑盒和黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)以及測(cè)定方法 Cosmosil 5C18-MS-11的技術(shù)參數(shù)：據(jù)2010年中藥典規(guī)定：以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水為流動(dòng)相，流速為每分0.8mL；采用柱后衍生法檢測(cè)，衍生溶液為0.05%的碘溶液，衍生化泵流速每分鐘0.3mL，衍生化溫度70℃；以熒光檢測(cè)器檢測(cè)。兩個(gè)相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5.（2010年中藥典部 附錄61） 

1．試劑盒描述

REAGEN T-2毒素檢測(cè)試劑盒是用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫的方法定量分析谷類(lèi)、飼料、干肉、干魚(yú)、種子、牛奶中T-2毒素，該試劑盒有以下特點(diǎn)

高回收率（80-105%），快速（10-20min），成本低

高靈敏度（1ppb）

高重復(fù)性。

檢測(cè)過(guò)程只需要不到1小時(shí)。

2．試劑盒原理

REAGEN T-2毒素檢測(cè)試劑盒基于競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫檢測(cè)原理，毒素抗原包被在酶標(biāo)板孔內(nèi)，分析過(guò)程中，樣品和一抗、酶標(biāo)二抗加入微孔中，如果樣品中有毒素抗原，就可競(jìng)爭(zhēng)與抗體結(jié)合，阻止抗體與包被的抗原結(jié)合，酶標(biāo)二抗可與一抗結(jié)合從而于酶標(biāo)板上包被的抗原結(jié)合。經(jīng)酶催化底物發(fā)生反應(yīng)顏色變化，顏色的深淺與目標(biāo)物的濃度成反比。

3.檢測(cè)下限

人Elisa-細(xì)胞毒素試劑盒,（CTX）試劑盒  質(zhì)量好，靈敏度高，價(jià)格實(shí)惠，可免費(fèi)提供代測(cè)服務(wù)（為您節(jié)省時(shí)間）

產(chǎn)品訂購(gòu)說(shuō)明：1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日最新價(jià)格為準(zhǔn)。 4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。5、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、電話(huà)等以傳真、EMail、短信、電話(huà)等形式通知我們。

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應(yīng)用領(lǐng)域： 僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

人Elisa-細(xì)胞毒素試劑盒,（CTX）試劑盒  相關(guān)Elisa試劑盒及其他產(chǎn)品信息：

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