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  ELISA技術的-操作要點

    的試劑,良好的儀器和正確的操作是ELISA檢測結果的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內醫(yī)學檢驗一般均用板式點.本文將敘述板式注意要點,要詳細的使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出的結果.

    1 標本的采取和保存

可用作 ELISA測定的標本十分廣泛,體液（如血清）,分泌物（唾液）和排泄物（如尿液,糞便）等。均可作標本以測定其中某種抗體或抗原 成份.有些標本可直接進行測定（如血清,尿液）,有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）.大部分ELISA檢測均以血清為標本 .血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清.制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固,血塊收縮后即可取得.除特殊情況外,在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本.在ELISA中血漿和血清可同等應用.血清標本可按常規(guī)方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色.血清標本宜在新鮮時檢測.如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應.如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深.一般說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存.凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩.混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測.反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存.保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑.

    2 試劑的準備

按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑. ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的.自配的緩沖液應用pH計測量較正.從冰箱中取出的試 驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用.試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存.

    3 加樣

在 ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物.加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部 ,并注意不可濺出,不可產生氣泡.

備注：只限參考，具體操作需按說明書。請來電咨詢。

（注：本試劑只用于科研，歡迎來電咨詢!）如需訂購請聯(lián)系24小時為您服務：

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Elisa試劑盒：96T/48T

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3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7. 溫育：操作同3。8. 洗滌：操作同5。9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。 

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CAS:1228-53-1價格,雙（對硝基苯）硫砜價格，5g糖原溶液2X0.5ML價格,包裝:2X0.5MLCAS:20064,DL-色氨酸,純度：99%,規(guī)格：5gCAS:189807-21-4價格,4-氟-2-三氟甲基苯甲酰氯價格，1gCAS:540-37-4價格,4-碘苯胺價格，50g鉑釕黑nominally,純度：Pt5,規(guī)格：25gCAS:36288價格,3-氨基苯甲酸價格，25g2-甲氧基-4-（三氟甲氧基）苯甲酸價格，1gCAS:95-65-8價格,3,4-二甲基苯酚價格，5g"57184-23-3|1-（環(huán)己基甲基）哌嗪,產品名稱：1-（環(huán)己基甲基）哌嗪CasNo.：57184-23-3分子式：C11H22N2分子量：182.31含量：98%"CAS:1468-39-9價格,異戊酸酐價格，5g甲醇,規(guī)格型號:HPLC4L916792-07-9|2-溴-4-氟-5-甲基苯腈,產品名稱：2-溴-4-氟-5-甲基苯腈CasNo：916792-07-9含量：98%CAS:2023600價格,海綿狀鉑價格，5gCAS:459-22-3價格,4-氟苯乙腈價格，5gCAS:127-07-1,羥基脲價格,英文名稱:Hydroxyurea,二抗形式:Anti-neoplastic.Inactivatesribonucleosidereductasebyformingafreeradicalnitroxidethatbindsatyrosylfreeradicalintheactivesiteoftheenzyme.,標記類型:98%,規(guī)格:250mgBrass spheres, alloy 260, 6.35mm （0.25in） dia 6.35價格，CAS:25233-30-1價格,聚苯胺價格，10gCAS:81055-73-4價格,2,6-二氯苯甲酸乙酯價格，1g三羥基十六烷酸（紫膠桐酸）標準品Trihydroxyhexadecanoic Acid （Aleuritic價格,英文名稱:Trihydroxyhexadecanoic Acid （Aleuritic,規(guī)格:5 mgCAS:542-75-6價格,1,3-二氯丙烯價格，25gCAS:23364-44-5價格,（1S,2R）-（+）-2-氨基-1,2-二苯基乙醇價格，1gCAS:1459-00-3價格,1-溴-2-苯基丙烷價格，25g3748-13-8|1,3-二異丙烯基苯，產品名稱：1,3-二異丙烯基苯 Cas No.：3748-13-8 分子式：C12H14 分子量：158.24 含量：98%3,3-二乙氧基丙酸乙酯CAS:10601-80-6,DiethoxypropionicAcidEthylEs,95%人參皂苷CK,英文名稱:Compound K,檢測方法/純度:HPLC≥98%,規(guī)格:20mg/支巴；丁卡因鹽；易咳嗪；氨蝶呤；乙胺嘧啶；匹呋氨芐青霉素等。此外，還用于農藥及作分析試劑,96%CAS:1591-98-6價格,4-溴-2-甲基苯基異氰酸酯價格，1gCAS:95-63-6價格,1,2,4-三價格，1LCAS:2227-64-7價格,2-溴-3＇-硝基苯乙酮價格，10gCAS:827614-64-2價格,6-氨基吡啶-3-硼酸頻哪醇酯價格，1g"71189-23-6|噻吩-2,3-二甲酸，產品名稱：噻吩-23-二甲酸CasNo.：71189-23-6含量：98%"CAS:3096-81-9價格,4-苯氧基苯甲腈價格，2g15017-52-4|4-氟-3-硝基溴芐,產品名稱：4-氟-3-硝基溴芐CasNo：15017-52-4分子式：C7H5BrFNO2分子量：23402含量：98%2,3-二氯-6-（三氟甲基）苯甲醛價格，1gCAS:3130-87-8價格,DL-天門冬素一水化合物價格，100gCAS:41836-28-6價格,三［N,N-雙（三甲基硅烷）胺］鐿（III）價格，1gCAS:65934-74-9價格,5-氨基-2-甲基三氟價格，25gCAS:312-84-5,D-絲氨酸,價格,D-Serine,產地:,規(guī)格:BR肝素鈉180u/mg,產地:國產,規(guī)格:1g

、黃曲霉毒素試劑盒和黃曲霉毒素混合標準以及測定方法 Cosmosil 5C18-MS-11的簡介：據2010年中藥典規(guī)定：以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水為流動相，流速為每分0.8mL；采用柱后衍生法檢測，衍生溶液為0.05%的碘溶液，衍生化泵流速每分鐘0.3mL，衍生化溫度70℃；以熒光檢測器檢測。兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5.（2010年中藥典部 附錄61）二、黃曲霉毒素試劑盒和黃曲霉毒素混合標準以及測定方法 Cosmosil 5C18-MS-11的技術參數(shù)：據2010年中藥典規(guī)定：以十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水為流動相，流速為每分0.8mL；采用柱后衍生法檢測，衍生溶液為0.05%的碘溶液，衍生化泵流速每分鐘0.3mL，衍生化溫度70℃；以熒光檢測器檢測。兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5.（2010年中藥典部 附錄61） 

1．試劑盒描述

REAGEN T-2毒素檢測試劑盒是用競爭性酶聯(lián)免疫的方法定量分析谷類、飼料、干肉、干魚、種子、牛奶中T-2毒素，該試劑盒有以下特點

高回收率（80-105%），快速（10-20min），成本低

高靈敏度（1ppb）

高重復性。

檢測過程只需要不到1小時。

2．試劑盒原理

REAGEN T-2毒素檢測試劑盒基于競爭性酶聯(lián)免疫檢測原理，毒素抗原包被在酶標板孔內，分析過程中，樣品和一抗、酶標二抗加入微孔中，如果樣品中有毒素抗原，就可競爭與抗體結合，阻止抗體與包被的抗原結合，酶標二抗可與一抗結合從而于酶標板上包被的抗原結合。經酶催化底物發(fā)生反應顏色變化，顏色的深淺與目標物的濃度成反比。

3.檢測下限

人Elisa-細胞毒素試劑盒,（CTX）試劑盒  質量好，靈敏度高，價格實惠，可免費提供代測服務（為您節(jié)省時間）

產品訂購說明：1、絕大部分產品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 2、部分非常用產品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。 3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當日最新價格為準。 4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。5、請辦理完貨款后，將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、電話等以傳真、EMail、短信、電話等形式通知我們。

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應用領域： 僅供科研使用，不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

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