人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)elisa試劑盒 參數(shù):
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F2542-A | 人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)elisa試劑盒 | Human Neural cell adhesion molecule ligand 1,NCAM-L1 elisa Kit | 48T |
人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)elisa試劑盒 技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
主要優(yōu)點(diǎn)1、簡(jiǎn)易操作、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型;5、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
使用方法1、 血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。操作步驟2:間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;4.(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
應(yīng)用信息ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。編輯本段進(jìn)口分裝進(jìn)口分裝:檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)相關(guān)系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測(cè),避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細(xì)胞因子,已被證實(shí)為B細(xì)胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長(zhǎng)刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實(shí)白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報(bào)道多種疾病的生長(zhǎng)因子為白介素-6, 骨髓瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測(cè)小鼠血清和細(xì)胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運(yùn)用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強(qiáng)度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測(cè)范圍 10.94 700 pg/mL [2]預(yù)期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)試劑盒成分1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)[3]
注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 個(gè)月
英文名稱(chēng):HumanNeuralcelladhesionmoleculeligand1,NCAM-L1ELISA試劑盒主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。規(guī)格:96T/孔、48T/孔檢測(cè)范圍:歡迎QQ或電話(huà)索取原版說(shuō)明書(shū)。保存溫度:低溫保存,詳情可來(lái)電。人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū) ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:①標(biāo)本因素;②試劑因素;③操作因素。ELISA檢測(cè)試劑盒等公司產(chǎn)品滿(mǎn)足于生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物實(shí)驗(yàn)需求,不用于臨床診斷。歡迎來(lái)電了解更多詳情。中國(guó)老牌ELISA試劑盒供應(yīng)商-江萊生物,期待您的來(lái)電。更多詳情請(qǐng)登陸www.laibio.com,咨詢(xún)我司專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員。人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū) 為您精選同類(lèi)產(chǎn)品:
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保存溫度:-20℃低溫保存,避免反復(fù)凍融。規(guī)格:0.1ml/0.2ml保質(zhì)期:12個(gè)月,本公司試劑產(chǎn)品均為最新批次,請(qǐng)放心購(gòu)買(mǎi)!價(jià)格:點(diǎn)此聯(lián)系我公司銷(xiāo)售人員。
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我們堅(jiān)持對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量作不斷的評(píng)估、創(chuàng)新和改善以確保您對(duì)我們產(chǎn)品的高任。CD17 專(zhuān)業(yè)供應(yīng),優(yōu)質(zhì)保障,竭誠(chéng)為您服務(wù)!
產(chǎn)品別名:人Siglec-5(CD170)檢測(cè)試劑盒,人Siglec-5(CD170)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
英文縮寫(xiě):CD170 Elisa Kit
規(guī)格96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃ 避光儲(chǔ)存
有效期:6個(gè)月(可接受預(yù)定)
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床
人Siglec-5(CD170)elisa試劑盒等ELISA試劑盒操作技術(shù)相關(guān)的注意事項(xiàng):
⑴ 嚴(yán)格按照人Siglec-5(CD170)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē),難以清洗徹底。
(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后最好在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔,整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至最低限度。從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
人Siglec-5(CD170)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法:
如果是新的數(shù)據(jù),你只要雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線(xiàn)。根據(jù)曲線(xiàn)方程式,計(jì)算出濃度。
方法:
1、擬和曲線(xiàn):
輸入第一行: 濃度值, 如0 10 50 100 400
輸入第二行:該濃度下的調(diào)整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數(shù)據(jù),用插入里的圖表按鈕,進(jìn)入圖表向?qū),?ldquo;標(biāo)準(zhǔn)類(lèi)型”中選擇“xy散點(diǎn)圖”;在“子圖表類(lèi)型”中選擇“折線(xiàn)散點(diǎn)圖”,按“下一步”;選擇“系列產(chǎn)生在行”,按“下一步”;數(shù)據(jù)標(biāo)志,可以填寫(xiě):如數(shù)據(jù)y軸,OD值;數(shù)據(jù)x軸,濃度;按下一步,點(diǎn)擊完成。可得曲線(xiàn)圖。
單擊曲線(xiàn),按右鍵,選擇“添加趨勢(shì)線(xiàn)”,在類(lèi)型中,選擇多項(xiàng)式;在選項(xiàng)中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說(shuō)的方法: 雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線(xiàn)。
2、計(jì)算濃度:
第一次實(shí)驗(yàn):
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)為:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例,已知OD值,計(jì)算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,所以可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
a=4E-05;b= -0.026;
x=(-b-(b*b-4ay)(平方根)) /(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)
人Siglec-5(CD170)elisa試劑盒數(shù)據(jù)計(jì)算通用公式為:
x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)
您可以應(yīng)用excel的公式拷貝功能,計(jì)算所有濃度
人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)elisa試劑盒 參數(shù):
編號(hào) | 中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 規(guī)格 |
F2542-A | 人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)elisa試劑盒 | Human Neural cell adhesion molecule ligand 1,NCAM-L1 elisa Kit | 48T |
人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)elisa試劑盒 技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
主要優(yōu)點(diǎn)1、簡(jiǎn)易操作、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型;5、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
使用方法1、 血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。操作步驟2:間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;4.(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
應(yīng)用信息ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。編輯本段進(jìn)口分裝進(jìn)口分裝:檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)相關(guān)系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測(cè),避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細(xì)胞因子,已被證實(shí)為B細(xì)胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長(zhǎng)刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實(shí)白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報(bào)道多種疾病的生長(zhǎng)因子為白介素-6, 骨髓瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測(cè)小鼠血清和細(xì)胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運(yùn)用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強(qiáng)度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測(cè)范圍 10.94 700 pg/mL [2]預(yù)期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)試劑盒成分1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)[3]
注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 個(gè)月
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
簡(jiǎn)介: 產(chǎn)品名稱(chēng):人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(CD171)elisa試劑盒96T/48T 英文名稱(chēng):Human L1CAM/CD171 (L1-Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 種屬:Human/人 品牌:EK-Bioscience 貨號(hào):EK-H10142 規(guī)格:96T/48T 價(jià)格:請(qǐng)QQ或電話(huà)與客服聯(lián)系獲取報(bào)價(jià) 貨期:現(xiàn)貨 保質(zhì)期:6個(gè)月 參數(shù)規(guī)格 中文名稱(chēng) | English name | 96T/48T 含量 | 保存 |
ELISA酶標(biāo)板(可拆卸) | Microelisa stripplate | 8×12 / 8×6 * | 2-8℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品 | Standard | 1瓶 0.5ml * | 2-8℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | Standard diluent | 1 瓶 1.5ml * | 2-8℃ |
酶標(biāo)試劑 | HRP-Conjugate reagent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
樣品稀釋液 | Sample diluent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
顯色劑 A 液 | Chromogen Solution A | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
顯色劑 B 液 | Chromogen Solution B | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
終止液 | Stop Solution | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
濃縮洗滌液 | wash solution | 1 瓶20ml * | 2-8℃ |
說(shuō)明書(shū) | Instruction | 1份 * |
|
封板膜 | Closure plate membrane | 2 片 * |
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密封袋 | Sealed bags | 1個(gè) * |
|
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5. 培養(yǎng)細(xì)胞:檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
7. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
試驗(yàn)所需自備物品:
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙5.人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(CD171)ELISA試劑盒96T/48T 操作流程
計(jì)算人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1(CD171)ELISA試劑盒96T/48T 濃度
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
Ek-Bioscience EK-H12357 人磷酸化的Akt蛋白(P-Akt)ELISA試劑盒
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Ek-Bioscience EK-H11637 人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶/親環(huán)素樣蛋白1(PPIL1)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11608 人蘇氨酰tRNA合成酶(TARS)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11162 人可溶性腫瘤壞死因子-1(sTNF-1)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10111 人Hedgehog相互作用蛋白(HHIP)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10426 人丙酮酸激酶M2型同工酶(PKM2)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10740 人甘氨酰tRNA合成酶(GARS)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11054 人拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子(AATF)ELISA試劑盒
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Ek-Bioscience EK-H12026 人乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10262 人肌動(dòng)蛋白(Actin)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11259 人免疫球蛋白G Fc段低親和力受體IIIa(FcγR3A)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10208 人TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子13(TAF13)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10522 人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10761 人肝素因子4抗體(HPF4)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11075 人晶體蛋白(CLC)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11390 人前列腺特異膜抗原(PSMA)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11705 人微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)ELISA試劑盒
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Ek-Bioscience EK-H12333 人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10229 人VI型膠原(COL6)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10543 人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10379 人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10693 人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11007 人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11322 人檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11797 人纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H12271 人促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體(CRHR)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10487 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子20(FGF-20)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11443 人妊娠相關(guān)血漿蛋白2(PAPPA2)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10306 人八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子1(OBTF1)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10450 人補(bǔ)體片段3c(C3c)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10421 人表皮細(xì)胞活化肽因子(CAPF)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H12402 人胃泌素17(GT-17)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11344 人胚外胚層發(fā)育蛋白(EED)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11659 人糖原合成酶2(GYS2)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11973 人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶5(NOX5)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H12287 人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10183 人S100鈣結(jié)合蛋白A2(S100A2)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10497 人成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(FGFR2)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10811 人骨成型蛋白5(BMP-5)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11125 人抗生長(zhǎng)激素抗體(GHAb)ELISA試劑盒
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【中文名稱(chēng)】:CD172b 多克隆抗體
【英語(yǔ)名稱(chēng)】:CD172b Polyclonal Antibody
【產(chǎn)品類(lèi)型】:一抗
【供應(yīng)商】:Abbkine
【產(chǎn)品貨號(hào)】:ABP50898
【產(chǎn)品規(guī)格】:30u/100ul/200ul
【背景資料】:Signal regulatory protein beta 1 encoded by SIRPB1 is a member of the signal-regulatory-protein (SIRP) family, and also belongs to the immunoglobulin superfamily. SIRP family members are receptor-type transmembrane glycoproteins known to be involved in the negative regulation of receptor tyrosine kinase-coupled signaling processes. This protein was found to interact with TYROBP/DAP12, a protein bearing immunoreceptor tyrosine-based activation motifs. This protein was also reported to participate in the recruitment of tyrosine kinase SYK. Multiple transcript variants encoding different isoforms have been found for SIRPB1.蛋白別名為:SIRPB1; Signal-regulatory protein beta-1; SIRP-beta-1; CD172 antigen-like family member B; CD antigen CD172b;基因ID為:10326;蛋白質(zhì)ID:O00241
【應(yīng)用類(lèi)型】:WB,ELISA補(bǔ)充:最優(yōu)的抗體稀釋比例需要基于客戶(hù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化.建議的起始稀釋比例如下: WB: 1:500-1:2000, ELISA: 1:5000. Not yet tested in other applications.
【免疫原】:合成多肽:the Internal region of human CD172b. at AA rangle: 200-280
【來(lái)源宿主】:兔
【反應(yīng)性】:人
【保存建議】:廠(chǎng)家推薦藍(lán)冰運(yùn)輸.在發(fā)貨后能在-20℃保存1年.為最大限度的避免損失,請(qǐng)?jiān)诖蜷_(kāi)管蓋之前融化抗體并離心.我們建議使用前分裝以避免反復(fù)凍融.本產(chǎn)品為液體形式,溶解于PBS緩沖液中,含50%甘油,0.5%BSA和0.02%疊氮化鈉.
【產(chǎn)品說(shuō)明】:點(diǎn)擊:CD172b 多克隆抗體查看更詳細(xì)產(chǎn)品說(shuō)明,更多應(yīng)用、儲(chǔ)存、價(jià)格、貨期等信息請(qǐng)致電400-6800-857垂詢(xún)Abbkine中國(guó)區(qū)域授權(quán)總代理艾美捷科技有限公司。更多特色試劑盒、特色抗體以及特色試劑等產(chǎn)品評(píng)論,請(qǐng)點(diǎn)擊查看每日生物評(píng)論網(wǎng)站。
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艾美捷科技有限公司品線(xiàn)覆蓋生物研究各個(gè)領(lǐng)域,主要包括:分子生物學(xué)(核酸蛋白研究工具、cDNA/RNA、轉(zhuǎn)染試劑、植物組培/細(xì)胞培養(yǎng)、生化試劑及試劑盒),試劑藥品(蛋白酶抑制劑、化合物、熒光染料/探針、動(dòng)物血清)、抗體(一抗、二抗、封閉血清), 蛋白及試劑盒(細(xì)胞因子/重組蛋白、細(xì)胞凋亡/代謝/損傷、表觀遺傳、天然免疫)等。艾美捷為您尋找并提供最優(yōu)的產(chǎn)品解決方案、最完備的物流服務(wù)、最及時(shí)的售后服務(wù)。如果您對(duì)上述產(chǎn)品線(xiàn)感興趣,請(qǐng)致電免費(fèi)服務(wù)熱線(xiàn)400-6800-869到艾美捷垂詢(xún)相關(guān)產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案,F(xiàn)貨一抗,植物Actin內(nèi)參,線(xiàn)粒體內(nèi)參抗體,性?xún)r(jià)比高內(nèi)參抗體,β-Actin抗體,高質(zhì)量,核內(nèi)參PCNA抗體,內(nèi)參抗體高質(zhì)量,GAPDH抗體,β-Tubulin抗體,內(nèi)參抗體高品質(zhì),植物內(nèi)參Rubisco,CD172b 多克隆抗體CD172b Polyclonal Antibody