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上海藍(lán)源生物科技有限公司

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細(xì)胞試驗(yàn)有限稀釋法(limiting dilution analysis,LDA)具體步驟

實(shí)驗(yàn)步驟:1、分裝了每孔0.1毫升腹腔細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(可提前24小時(shí)準(zhǔn)備就緒,置CO2培養(yǎng)箱中備用);2、自細(xì)胞培養(yǎng)瓶中收集長勢良好的雜交瘤細(xì)胞(亦可自24孔培養(yǎng)板孔中收集),制成懸液。3、按白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法計(jì)得細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù),一般在105/ 毫升左右。4、取3支10毫升刻度離心管排列在超凈工作臺(tái)試管架上,先用無血清培養(yǎng)基將細(xì)胞稀釋至103/毫升,再用含15%小牛血清的培養(yǎng)基稀釋到101/毫升細(xì)胞,即每0.1毫升1個(gè)細(xì)胞。5、每孔0.1毫升細(xì)胞懸液。6、置37℃5%CO2培養(yǎng)箱,4天后取出觀察,并在板蓋上打上標(biāo)記,做好記錄并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。7、繼續(xù)培養(yǎng)時(shí),則在第4-5天更換1/2培養(yǎng)基,約第7-9天可以收獲培養(yǎng)液上清用于檢測抗體。并重復(fù)檢測1-2次。8、選擇單克隆生長孔,生長良好,陽性強(qiáng)者,轉(zhuǎn)移到24孔板再做克隆經(jīng)培養(yǎng)或擴(kuò)大培養(yǎng)。

有限稀釋法的程序

①制備飼養(yǎng)細(xì)胞懸液

②轉(zhuǎn)染了重組質(zhì)粒后的細(xì)胞計(jì)數(shù),并調(diào)細(xì)胞數(shù)在1~5×103/ml

③取130個(gè)細(xì)胞放入6.5ml含飼養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)液,即20個(gè)細(xì)胞/ml,100μl/孔加A、B、C三排為每孔2個(gè)細(xì)胞。余下2.9ml細(xì)胞懸 液補(bǔ)加2.9ml含飼養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)液,細(xì)胞數(shù)為10個(gè)/ml,100μl/孔加D、E、F三排,為每孔1個(gè)細(xì)胞。余下2.2ml細(xì)胞懸液補(bǔ)加 2.2ml含飼養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)液,細(xì)胞數(shù)5個(gè)/ml,100μl/孔,加G、H兩排,為每孔0.5個(gè)細(xì)胞。

④培養(yǎng)4~5天后,在倒置顯微鏡上可見到小的細(xì)胞克隆,補(bǔ)加培養(yǎng)液200μl/孔。

⑤第8~9天時(shí),肉眼可見細(xì)胞克隆。

歡迎咨詢Acc-3涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞

該公司產(chǎn)品分類: 一抗系列 二抗系列 抗原蛋白多肽系列 科研抗體抗原 原代細(xì)胞株 傳代細(xì)胞株 科研細(xì)胞株 細(xì)胞培養(yǎng)基 干燥培養(yǎng)基 培養(yǎng)基系列 金標(biāo)試劑盒 放免試劑盒 比色法試劑盒 科研試劑盒 國產(chǎn)儀器耗材 進(jìn)口儀器耗材耗材 科研儀器耗材 兔Elisa試劑盒系列 人Elisa試劑盒系列 小鼠Elisa試劑盒系列

Acc-3涎腺腺樣囊性癌

Acc-3 涎腺腺樣囊性癌 】【細(xì)胞說明】:只要具備合適的生存條件,每一個(gè)分離的細(xì)胞都可以在體外生長繁殖,表現(xiàn)出生命的特征。所以細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本功能單位,它是一株“綠色"一株”生命,本公司隨時(shí)為您提供這份“綠色”的株。細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能相關(guān)是很多細(xì)胞的共同特點(diǎn),在分化程度較高的細(xì)胞更為明顯,這種合理性是生物漫長進(jìn)化過程所形成的。例如:具有收縮機(jī)能的肌細(xì)胞伸展為細(xì)長形;具有感受刺激和傳導(dǎo)沖動(dòng)機(jī)能的神經(jīng)細(xì)胞有長短不一的樹枝狀突起;游離的血細(xì)胞為圓形、橢圓形或圓餅形。不論細(xì)胞的形狀如何,細(xì)胞的結(jié)構(gòu)一般分為三大部分:細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。但也有例外。例如:哺乳類紅細(xì)胞成熟時(shí)細(xì)胞核消失。計(jì)算細(xì)胞、細(xì)胞核體積的公式:圓 形 V=4/3πr 3 (r 為半徑)橢圓形 V=4/3πab 2 (a、b 為長、短半徑)核質(zhì)比 N/D=Vn/(Vc—Vn)(Vn 為核的體積,Vc 是細(xì)胞質(zhì)的體積)細(xì)胞的組織化學(xué)方法,是研究細(xì)胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物,再通過顯微鏡對(duì)組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。Acc-3 涎腺腺樣囊性癌【操作步驟】:l.接種 Hela 細(xì)胞于蓋片上并培養(yǎng) 24~48 小時(shí),使長成單層。2.取出蓋片,用 PBS(pH7.2)輕輕沖洗蓋片表面去除殘?jiān)?.放入 Carnoy 固定液中固定 l 小時(shí)。4.浸入甲基綠一呱咯寧醋酸緩沖液中 30 分鐘染色。5.取出蓋片放入蒸餾水中輕輕漂洗 2~3 次(2~3 秒鐘左右),吸去水分。放入純丙酮中分色 2~3 秒鐘。6. 放入 l/2 丙酮+1/2 二甲苯中 5 秒鐘。7.放入純二甲苯中透明 5 分鐘。8.滴一滴中性樹膠于載玻片上,將蓋片標(biāo)本面朝下封片。9.鏡下觀察相關(guān)產(chǎn)品示下:NTERA-2 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞 ATCC 株  詢價(jià)  RC-0617R Anti-Glasses Snake poison Protein  抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體(眼鏡蛇)PA-1 人卵巢畸胎瘤細(xì)胞 ATCC 株  詢價(jià)  RC-1206R Anti-GLI1(GLI-Kruppel family member 1)  下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體PANC-1 人胰腺癌細(xì)胞 ATCC 株  詢價(jià)  RC-0038R Anti-GLP-1(Glucagon-like peptide-1)(7-36)  胰高血糖素樣肽-1抗體PC-3 人前列腺癌細(xì)胞 ATCC 株  詢價(jià)  RC-0208R Anti-GLP-2(Glucagon-like peptide-2)  胰高血糖素樣肽-2抗體RAJI 黑人Burkitt淋巴瘤 ATCC 株  詢價(jià)  RC-0841R Anti-GLP-2(Glucagon-like peptide-2)  胰高血糖素樣肽-2抗體RAMOS 人B淋巴細(xì)胞瘤 ATCC 株  詢價(jià)  RC-0472R Anti-GLUT1(Glucose transporter type 1)  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體RAMOS(RA.1) 人B淋巴細(xì)胞瘤 ATCC 株  詢價(jià)  RC-0351R Anti-GLUT2(Glucose transporter type 2)  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體RPMI-8226 人多發(fā)骨髓瘤細(xì)胞 ATCC 株  詢價(jià)  RC-1207R Anti-GLUT3(Glucose transporter 3)  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體SaOS-2 人骨肉瘤細(xì)胞 ATCC 株  詢價(jià)  RC-0384R Anti-GLUT4(Glucose transporter type 4)  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體Acc-3 涎腺腺樣囊性癌技術(shù)咨詢網(wǎng)址http://www.shxysw.net/(上海信裕生物科技有限公司)歡迎您的垂詢 

該公司產(chǎn)品分類: 培養(yǎng)管 血清板 離心管 血清/樣品管 細(xì)胞凍存管 其它測試板 細(xì)菌培養(yǎng)皿 培養(yǎng)液瓶 深孔板 可充電式助理移液器 針頭式過濾器 酶標(biāo)板板框 酶標(biāo)板 細(xì)胞培養(yǎng)皿 細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶 細(xì)胞培養(yǎng)瓶 細(xì)胞培養(yǎng)板 生物耗材(綜合) 細(xì)胞 人ELISA KIT 96T/48T

Acc-3涎腺腺樣囊性癌

 

 上海義森生物是上海最專業(yè)的美國ATCC細(xì)胞供應(yīng)商。

Acc-3 涎腺腺樣囊性癌

細(xì)胞總數(shù)106個(gè),源自美國ATCC的細(xì)胞,復(fù)蘇需要2-3周。

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人小梁網(wǎng)細(xì)胞
 
人膀胱平滑肌細(xì)胞
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人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞
人骨骼肌成肌細(xì)胞
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人牙周膜成纖維細(xì)胞
 
 
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人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞
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人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
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人臍靜脈平滑肌細(xì)胞
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

上海義森生物是上海最專業(yè)的美國ATCC細(xì)胞供應(yīng)商。

Acc-3 涎腺腺樣囊性癌

 

該公司產(chǎn)品分類: 抗體 試劑盒 試劑

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