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在現(xiàn)在的ELISA試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無(wú)法微量加樣的性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。試劑的加入在國(guó)產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會(huì)在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的elisa試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性,下次測(cè)定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。我公司其他小部分試劑:橄欖油/洋橄欖油/Olive oil但馬膠/但馬樹(shù)脂/達(dá)麻脂/達(dá)瑪膠/達(dá)瑪樹(shù)膠/娑羅雙樹(shù)脂/達(dá)馬樹(shù)脂/Gum dammar乳香膠/乳香/瑪?shù)蹣?shù)膠/瑪?shù)壑?瑪?shù)蹣?shù)脂/瑪締脂/膠粘劑/乳香樹(shù)脂/瑪珶脂/粘膠乳香樹(shù)膠/膠粘水泥/Gum mastic山達(dá)膠/山達(dá)脂/非洲松香/檜膠/方苞非洲柏膠/Gum sandarac蟲(chóng)膠/紫膠/蟲(chóng)膠臘/紫蟲(chóng)膠/漂白紫膠/Shellac柯柏膠/硬樹(shù)脂/礦樹(shù)脂/柯伯膠/柯帕樹(shù)脂/Gum copal中性樹(shù)膠/Neutral balsam植物凝膠/冷結(jié)樹(shù)酯/結(jié)冷膠/吡喃葡萄糖醛酸與6-脫氧-L-吡喃甘露糖和D-吡喃葡萄糖乙酸酯的聚合物鈣鉀鈉鹽/Phytagel歡迎咨詢:人EB病毒IgM(EBv IgM)試劑盒 。 人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)試劑盒 Human Varicella zoster virus IgG,VZV-IgG 試劑盒 人軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)試劑盒 Human Legionella antibody IgA,LP Ab-IgA 試劑盒 人軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM )試劑盒 Human Legionella antibody IgM,LP Ab-IgM 試劑盒 人軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)試劑盒 Human Legionella antibody IgG,LP Ab-IgG 試劑盒 人腮腺炎病毒IgM 試劑盒 Human paramyxovirus parotitis IgM 試劑盒 人腮腺炎病毒IgG 試劑盒 Human paramyxovirus parotitis IgG 試劑盒 人EB病毒IgM(EBv IgM)試劑盒 Human epstein-barr virus IgM,EBv IgM 試劑盒 人EB病毒IgA(EBv IgA)試劑盒 Human epstein-barr virus IgA,EBv IgA 試劑盒 人EB病毒IgG(EBv IgG)試劑盒 Human epstein-barr virus IgG,EBv IgG 試劑盒 人利什曼原蟲(chóng)抗體(Leishimaria Ab)試劑盒 Human Leishimaria antibody 試劑盒 人登革熱抗體(DF-Ab)試劑盒 Human dengue fever antibody,DF 試劑盒 人流感病毒抗體IgG(FLU)試劑盒 Human Influenza viruses IgG,FLU 試劑盒 人腺病毒IgM(ADV-IgM)試劑盒 Human Adenovirus IgM,ADV-IgM 試劑盒 人腺病毒IgG(ADV-IgG)試劑盒 Human Adenovirus IgG,ADV-IgG 試劑盒 人輪狀病毒(RV)IgM 試劑盒 Human Rotavirus,RV IgM 試劑盒 人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)試劑盒 human EchoVirus IgM,ECHO IgM 試劑盒 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)試劑盒 Human anti-respiratory syncytial virus antibody,RSV 試劑盒 人麻疹病毒IgM(MV IgM)試劑盒 Human measlesvirus IgM,MV IgM 試劑盒 人麻疹病毒IgG(MV IgG)試劑盒 Human measlesvirus IgG,MV IgG 試劑盒 人柯薩奇病毒IgM(Cox V-IgM)試劑盒 Human Coxsackie virus IgM,Cox V-IgM 試劑盒
小鼠EB病毒IgM抗體ELISA試劑盒儲(chǔ)存方式:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月
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小鼠EB病毒IgM抗體ELISA試劑盒
計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
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6.37℃恒溫箱。
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Elisa試劑盒規(guī)格:96T/48T
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Elisa試劑盒的原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
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【中文名稱】:人EB病毒IgM(EBvIgM)elisa試劑盒
【英文名稱】:Humanepstein-barrvirusIgM,EBvIgMELISA Kit
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T。
【產(chǎn)品貨號(hào)】:YM-S0533。
【試劑盒成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等elisa試劑盒檢測(cè)范圍:人、綿羊、山羊、牛、馬、小鼠、大鼠、豬、兔、其它動(dòng)物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子、細(xì)胞凋亡、活性多肽、自身抗體、血栓與止血、骨代謝、肝纖維化、腫瘤、激素內(nèi)分泌、自身抗體科研Elisa檢測(cè)試劑盒。 人EB病毒IgM(EBvIgM)ELISA試劑盒 的若干特點(diǎn):專一性強(qiáng):抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。靈敏度高:由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。樣品易保存:經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
主要用于科研方面,不用于臨床診斷??梢杂糜跈z測(cè)各種指標(biāo)。
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人EB病毒IgM(EBv IgM)elisa試劑盒參數(shù):
編號(hào) | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F2839-A | 人EB病毒IgM(EBv IgM)elisa試劑盒 | Human epstein-barr virus IgM,EBv IgM elisa Kit | 48T |
人EB病毒IgM(EBv IgM)elisa試劑盒技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
主要優(yōu)點(diǎn)1、簡(jiǎn)易操作、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;5、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
使用方法1、 血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。操作步驟2:間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;4.(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
應(yīng)用信息ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。編輯本段進(jìn)口分裝進(jìn)口分裝:檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測(cè),避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細(xì)胞因子,已被證實(shí)為B細(xì)胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長(zhǎng)刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實(shí)白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報(bào)道多種疾病的生長(zhǎng)因子為白介素-6, 骨髓瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測(cè)小鼠血清和細(xì)胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運(yùn)用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強(qiáng)度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測(cè)范圍 10.94 700 pg/mL [2]預(yù)期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)試劑盒成分1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)[3]
注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 個(gè)月
英文名稱:Human epstein-barr virus IgM,EBv IgM ELISA試劑盒主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。規(guī)格:96T/孔、48T/孔檢測(cè)范圍:歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書(shū)。保存溫度:低溫保存,詳情可來(lái)電。人EB病毒IgM(EBvIgM)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:①標(biāo)本因素;②試劑因素;③操作因素。ELISA檢測(cè)試劑盒等公司產(chǎn)品滿足于生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物實(shí)驗(yàn)需求,不用于臨床診斷。歡迎來(lái)電了解更多詳情。中國(guó)老牌ELISA試劑盒供應(yīng)商-江萊生物,期待您的來(lái)電。更多詳情請(qǐng)登陸www.laibio.com,咨詢我司專業(yè)技術(shù)人員。人EB病毒IgM(EBvIgM)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)為您精選同類產(chǎn)品:
值得信賴的ELISA試劑盒供應(yīng)商:人EB病毒IgM(EBv IgM)ELISA試劑盒
性狀:盒裝液體適應(yīng):科研實(shí)驗(yàn)保存溫度: 2-8℃規(guī)格:96T/48T
人EB病毒IgM(EBv IgM)ELISA試劑盒 的特點(diǎn)如下:
1、原裝進(jìn)口抗體----高效、靈敏、特異2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高3、先進(jìn)的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)4、購(gòu)買本公司的ELISA試劑盒,可免費(fèi)代測(cè)5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
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人EB病毒IgM ELISA試劑盒價(jià)格,現(xiàn)貨人EBv IgM試劑盒開(kāi)學(xué)特價(jià)開(kāi)學(xué)促銷價(jià)格,現(xiàn)貨人M-AChRM1試劑盒開(kāi)學(xué)特價(jià)迎開(kāi)學(xué),大促銷!特價(jià)低價(jià),廠家價(jià)格,可以享受特價(jià)/折上折等優(yōu)惠!期待您的來(lái)電:【elisa試劑盒訂購(gòu)熱線】電話:15810802415 座機(jī): QQ:
產(chǎn)品別名:人EB病毒IgM(EBv IgM)檢測(cè)試劑盒,人EB病毒IgM(EBv IgM)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
英文縮寫(xiě):EBv IgM Elisa Kit
規(guī)格96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃ 避光儲(chǔ)存
有效期:6個(gè)月(可接受預(yù)定)
待檢樣本:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床
人EB病毒IgM(EBv IgM)elisa試劑盒等ELISA試劑盒操作技術(shù)相關(guān)的注意事項(xiàng):
⑴ 嚴(yán)格按照人EB病毒IgM(EBv IgM)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。
(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后最好在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔,整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至最低限度。從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
人EB病毒IgM(EBv IgM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法:
如果是新的數(shù)據(jù),你只要雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。根據(jù)曲線方程式,計(jì)算出濃度。
方法:
1、擬和曲線:
輸入第一行: 濃度值, 如0 10 50 100 400
輸入第二行:該濃度下的調(diào)整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數(shù)據(jù),用插入里的圖表按鈕,進(jìn)入圖表向?qū)?,?ldquo;標(biāo)準(zhǔn)類型”中選擇“xy散點(diǎn)圖”;在“子圖表類型”中選擇“折線散點(diǎn)圖”,按“下一步”;選擇“系列產(chǎn)生在行”,按“下一步”;數(shù)據(jù)標(biāo)志,可以填寫(xiě):如數(shù)據(jù)y軸,OD值;數(shù)據(jù)x軸,濃度;按下一步,點(diǎn)擊完成??傻们€圖。
單擊曲線,按右鍵,選擇“添加趨勢(shì)線”,在類型中,選擇多項(xiàng)式;在選項(xiàng)中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說(shuō)的方法: 雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。
2、計(jì)算濃度:
第一次實(shí)驗(yàn):
標(biāo)準(zhǔn)曲線為:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例,已知OD值,計(jì)算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,所以可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
a=4E-05;b= -0.026;
x=(-b-(b*b-4ay)(平方根)) /(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)
人EB病毒IgM(EBv IgM)elisa試劑盒數(shù)據(jù)計(jì)算通用公式為:
x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)
您可以應(yīng)用excel的公式拷貝功能,計(jì)算所有濃度
人EB病毒IgMelisa試劑盒參數(shù):
編號(hào) | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F2839-B | 人EB病毒IgMelisa試劑盒 | Human epstein-barr virus IgM,EBv IgM elisa Kit | 96T |
人EB病毒IgMelisa試劑盒技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
主要優(yōu)點(diǎn)1、簡(jiǎn)易操作、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;5、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
使用方法1、 血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。操作步驟2:間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;4.(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
應(yīng)用信息ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。編輯本段進(jìn)口分裝進(jìn)口分裝:檢測(cè)范圍和靈敏度不同,用量少時(shí),可使用分裝,前期是它的長(zhǎng)久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測(cè),避免分次檢測(cè)可能造成試劑量不足的情況。檢測(cè)抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗(yàn)操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細(xì)胞因子,已被證實(shí)為B細(xì)胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長(zhǎng)刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實(shí)白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報(bào)道多種疾病的生長(zhǎng)因子為白介素-6, 骨髓瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測(cè)小鼠血清和細(xì)胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運(yùn)用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強(qiáng)度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測(cè)范圍 10.94 700 pg/mL [2]預(yù)期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)試劑盒成分1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)[3]
注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 個(gè)月