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大鼠骨保護(hù)素（OPG）ELISA試劑盒 說明書

本試劑僅供研究使用 標(biāo)本：血清或血漿

試驗(yàn)原理：TGF-β1 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知TGF-β1 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將TGF-β1 和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TGF-β1 的濃度呈比例關(guān)系。

試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制96/48人份酶標(biāo)板 1塊板（96T） 半塊板（48T） 即用型塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型標(biāo)準(zhǔn)品：400pmol/L 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按說明書進(jìn)行稀稀空白對照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型生物素標(biāo)記的抗TGF-β1 抗體 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型親和鏈酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型洗滌緩沖液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml） 按說明書進(jìn)行稀釋底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型終止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型標(biāo)本稀釋液 1瓶（12ml） 1瓶（6.0ml） 即用型

自備材料1． 蒸餾水。2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項(xiàng)1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9． 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法1、 血清－－－－-操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、 血漿－－－－-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細(xì)胞上清液－－-1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿－－－－-將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、 保存－－－－－－如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備1． 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：400 pmol/L （6號標(biāo)準(zhǔn)品） 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200 pmol/L （5號標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100 pmol/L （4號標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50 pmol/L （3號標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25 pmol/L （2號標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5 pmol/L （1號標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0 pmol/L （空白對照） 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3． 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8． 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實(shí)驗(yàn)方案 標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pmol/L） A 400 400 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品B 200 200 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品C 100 100 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品D 50 50 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品E 25 25 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品F 12.5 12.5 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品G 0 0 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品H 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品 樣品

局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。

試劑盒性能1. 靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的TGF-β1 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的TGF-β1 含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測值范圍：0-400pmol/L

4、敏感度： 1.0 pmol/L

人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒等上海雙贏生物科技有限公司elisa檢測試劑盒試劑盒優(yōu)點(diǎn)多多，更加方便我們的科研學(xué)者進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)，是科研實(shí)驗(yàn)的最佳伙伴。

   (1)、高效、靈敏、特異的抗體；

　 (2)、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；

　 (3)、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

　 (4)、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；

   (5)、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。 

人基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒針對國內(nèi)酶聯(lián)免疫行業(yè)不同的需求，我們上海雙贏生物科技有限公司特推出科研型ELISA試劑盒、商用型ELISA試劑盒，我們均采用環(huán)保型包裝材料，響應(yīng)了國家節(jié)能減排的要求，同時(shí)，為了更好的適應(yīng)客戶需求，我們推出經(jīng)濟(jì)型ELISA試劑盒，讓大家的實(shí)驗(yàn)更節(jié)省，公司在不斷努力降低ELISA試劑原料成本，以便更好的節(jié)省ELISA試劑盒整體價(jià)格，相信不遠(yuǎn)的將來，ELISA試劑盒價(jià)格會更便宜，實(shí)驗(yàn)效果會更穩(wěn)定！

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 科研 48T/96T 人乙酰膽堿（ACH）elisa試劑盒 說明書

試劑盒名稱：人乙酰膽堿（ACH）ELISA試劑盒

規(guī)      格：48T/96T產(chǎn)品的用途：僅供科研ELISA檢測試劑盒價(jià)格：電議,或咨詢在線客服QQ,   13488645491   QQ：774226171    聯(lián)系人：梁經(jīng)理，公司提供大品牌進(jìn)口，國產(chǎn)elisa試劑盒，均為高性價(jià)比試劑盒

檢測的原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）

人乙酰膽堿（ACH）ELISA試劑盒安全性：

1． 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

4   Elisa試劑盒請遠(yuǎn)離兒童

自備物品：

1 、 37 ℃ 恒溫箱

2 、 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

3 、 精密移液器及一次性吸頭

4 、 蒸餾水

5 、 一次性試管

6 、 吸水紙

人乙酰膽堿（ACH）ELISA試劑盒標(biāo)本的處理：（1）細(xì)胞培養(yǎng)上清液根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。（2）腦脊液根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。（3）血漿①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分鐘，4℃，分離血漿樣品，然后儲存在零下80℃直到使用。②用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測，按照說明書指定方法檢測。

人乙酰膽堿（ACH）ELISA試劑盒性能: 1．準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。 2．靈敏度：最低檢測濃度小于10 pg/ml。 3．特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。 4．重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。 有效期：6個(gè)月

若有其他技術(shù)問題請咨詢我司客服人員，我們將竭誠為您服務(wù)！

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 規(guī)    格 （48T/96T）

 樣品類型 血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣品類型

 檢測方法 酶聯(lián)免疫法

 特 異 性 公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性

 交叉反應(yīng) 由于當(dāng)前的酶聯(lián)免疫科學(xué)技術(shù)和知識有限，現(xiàn)有技術(shù)不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此，交叉反應(yīng)可能仍然存在

 樣 本 量  50-100 μL

 實(shí)驗(yàn)時(shí)間  1–4.5h

 儲存條件  2-8°C

 儲存方法 可以存儲在2 - 8°C長達(dá)1個(gè)月（專家建議：4°C恒溫保存，酶免試劑盒實(shí)驗(yàn)效果更佳）。對于長期存儲,請?jiān)?20°C的存儲。盡量保持試驗(yàn)板在密封鋁箔袋，避免潮濕

 有 效 期  6 months

工作原理人雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒的原理ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。

產(chǎn)品特點(diǎn)人雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒的類型ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個(gè)必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為"結(jié)合物"（conjugate）；（3）酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型：

雙抗體夾心法測抗原

ELISA 技術(shù)的-操作要點(diǎn)優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA 檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA 的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA 各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。標(biāo)本的采取和保存可用作 ELISA 測定的標(biāo)本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液)，有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA 檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA 中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性 HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法 ELISA 中可使本底加深。一般說來，在 5 天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價(jià)跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。標(biāo)本要求人雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒樣品要求

·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。

·檢測的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清、人和動物的血清、血漿。

·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存，若長期保存應(yīng)-70℃。

·樣本量的要求：若一個(gè)指標(biāo)做復(fù)孔檢測應(yīng)不少于250ul，做單孔檢測應(yīng)不少于120ul。建 議若客戶樣本量充足最好提供500ul以上。

·客戶的樣本收集后，立即按要求保存，切忌反復(fù)凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運(yùn)輸。郵寄前請與技術(shù)支持溝通確認(rèn)。