大鼠超氧化物歧化酶(SOD)酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中超氧化物歧化酶(SOD)的含量。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠超氧化物歧化酶(SOD)水平。用純化的大鼠超氧化物歧化酶(SOD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入超氧化物歧化酶(SOD),再與HRP標(biāo)記的超氧化物歧化酶(SOD)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的超氧化物歧化酶(SOD)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中大鼠超氧化物歧化酶(SOD)濃度。
試劑盒組成:
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| (20ml×20倍)×1瓶 | | |
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為150U/L,100U/L ,50U/L,25U/L, 12.5U/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請(qǐng)避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),
在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD
值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋
倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
(此圖僅供參考)
試劑盒性能:
1.樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%
檢測(cè)范圍:
10U/L -200U/L
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月
簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
適用范圍:僅供科研使用
保存條件:2-8℃
保質(zhì)期:6個(gè)月
產(chǎn)品品牌:酶遠(yuǎn)生物
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm
所需樣本體積:50-100ul
產(chǎn)品用途:用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體樣本
樣本類(lèi)型:適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞上清、組織勻漿等樣本
酶遠(yuǎn)生物供應(yīng)的其他種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、兔子、豬、犬、牛、樣、雞、鴨、植物、貓、馬、魚(yú)、猴、農(nóng)殘elisa試劑盒等
操作步驟:
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9. 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
上海酶遠(yuǎn)生物科技有限公司專(zhuān)業(yè)提供ELISA試劑盒,種屬齊全,指標(biāo)成千上萬(wàn)種,質(zhì)量好發(fā)貨及時(shí),穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠高,特異性強(qiáng),優(yōu)秀的技術(shù)團(tuán)隊(duì)竭誠(chéng)為您服務(wù)。
昆蟲(chóng)卵黃原蛋白受體(VgR)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說(shuō)明書(shū)
操作注意事項(xiàng):
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋?zhuān)苯尤?0μL加樣即可。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑的準(zhǔn)備:
20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20稀釋?zhuān)?份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法:
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
技術(shù)原理及自備設(shè)備:
ELISA技術(shù)原理是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。
自備設(shè)備有,蒸餾水,加樣器,振蕩器及磁力攪拌器,酶標(biāo)儀,量筒,燒杯,吸水紙,坐標(biāo)紙,溫育箱,洗瓶,一次性試劑管,微移液及其吸嘴等。
用3個(gè)質(zhì)控血清測(cè)定值即可進(jìn)行質(zhì)控,當(dāng)這組數(shù)據(jù)擴(kuò)大到20次有效值時(shí)就可以計(jì)算RCV的X。質(zhì)量控制在整個(gè)過(guò)程中有著舉足輕重的關(guān)系,0.1%的不慎也會(huì)引起100%的失敗。該試劑盒敏感度極佳,其預(yù)包被微孔板的批內(nèi)和批間變異系數(shù)均小于10%。每一個(gè)產(chǎn)品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格交叉反應(yīng)和干擾測(cè)試及穩(wěn)定性試驗(yàn),均可滿(mǎn)足廣泛的檢測(cè)需求。我們嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)方案組裝生產(chǎn),配置完善的售后服務(wù)和免費(fèi)的技術(shù)支持,可讓您無(wú)后顧之憂(yōu)。
試劑的準(zhǔn)備:
20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20稀釋?zhuān)?份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法:
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
上海酶遠(yuǎn)生物酶標(biāo)試劑盒操作中出現(xiàn)的問(wèn)題:現(xiàn)象、可能原因和解決辦法:
1、 不同廠(chǎng)家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性.
2、 若不同批號(hào)試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3、 加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大,建議校對(duì)加樣器。
4、 反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),第一孔和最后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過(guò)程中是否產(chǎn)生氣泡、速度是否均勻,是否顫動(dòng)等影響液量的因素均可導(dǎo)致以上情況。高標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)應(yīng)使用加樣器。
6、 閾值附近實(shí)際上是個(gè)灰區(qū)(gray scale),不能截然分為陰性、陽(yáng)性,國(guó)外廠(chǎng)家均要求對(duì)這部分可疑標(biāo)本進(jìn)行奇數(shù)次復(fù)檢,以次數(shù)多者為準(zhǔn),如一次陽(yáng)兩次陰最后判為陰,但實(shí)際上是否為陰不好說(shuō),只有判為可疑,臨床上可以讓患者過(guò)一段時(shí)間后再測(cè)。
7、 肉眼觀(guān)察稍顯色,酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實(shí)際工作中是難以避免的,肉眼目測(cè)結(jié)果不可靠,應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。
8、 由陰性變?yōu)閺?qiáng)陽(yáng)性原因多為操作過(guò)程中漏加試劑等有關(guān)。
高手們是這樣挑選“ELISA試劑盒”的:
1. 現(xiàn)在國(guó)內(nèi)大部分市場(chǎng)在供應(yīng)著進(jìn)口的試劑盒,在選擇公司這一方面就需要謹(jǐn)慎了,要選品質(zhì)、評(píng)價(jià)等方面較好的公司(如上海酶遠(yuǎn)生物、上海酶遠(yuǎn)生物等),可看它的產(chǎn)品目錄冊(cè),一般提供的產(chǎn)品種類(lèi)很有限,都是些常用指標(biāo),種類(lèi)少說(shuō)明是真貨,且外包裝較精美并提供公司的名稱(chēng)、電話(huà)、地址,所有的試劑也都經(jīng)得起檢驗(yàn)。
2. 還有一個(gè)好的策略就是對(duì)照常規(guī)品種的指標(biāo),因?yàn)樾枰枯^大,所以國(guó)內(nèi)公司會(huì)用心做研發(fā),一般做的不錯(cuò),可以用國(guó)產(chǎn)的;對(duì)于不常用的指標(biāo),因?yàn)橛昧可,?guó)內(nèi)公司一般不做研發(fā)(研發(fā)成本較高,需求量少),所以要用國(guó)外的品牌,如R&D、TSZ都是不錯(cuò)的。國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口盒子一起用,節(jié)省經(jīng)費(fèi)而且高性?xún)r(jià)比。
本司相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:三聚氰胺(Melamine)ELISA檢測(cè)試劑盒 慶大霉素(Gentamicin)ELISA檢測(cè)試劑盒 新霉素(Neomycin)ELISA檢測(cè)試劑盒 泰樂(lè)菌素(Tylosin)ELISA檢測(cè)試劑盒 隱性孔雀石綠(Malachitegreen)ELISA檢測(cè)試劑盒 呋喃西林(Furacilin(SEM))ELISA檢測(cè)試劑盒 呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))ELISA檢測(cè)試劑盒 呋喃它酮(Furaltadone(AMOZ))ELISA檢測(cè)試劑盒 呋喃唑酮(Furazolidone(AOZ))ELISA檢測(cè)試劑盒 喹諾酮類(lèi)(Chinolone)ELISA檢測(cè)試劑盒 鏈霉素(Streptomycin)ELISA檢測(cè)試劑盒 磺胺二甲嘧啶(Sulphamethazine)ELISA檢測(cè)試劑盒 磺胺嘧啶(Sulphadiazine)ELISA檢測(cè)試劑盒 磺胺類(lèi)(Sulphonamides)ELISA檢測(cè)試劑盒 四環(huán)素(Tetracycline)ELISA檢測(cè)試劑盒 三聚氰胺(Melamine)ELISA檢測(cè)試劑盒 慶大霉素(Gentamicin)ELISA檢測(cè)試劑盒 新霉素(Neomycin)ELISA檢測(cè)試劑盒 泰樂(lè)菌素(Tylosin)ELISA檢測(cè)試劑盒 隱性孔雀石綠(Malachitegreen)ELISA檢測(cè)試劑盒 呋喃西林(Furacilin(SEM))ELISA檢測(cè)試劑盒 呋喃妥因(Nitrofurantoin(AHD))ELISA檢測(cè)試劑盒 呋喃它酮(Furaltadone(AMOZ))ELISA檢測(cè)試劑盒 呋喃唑酮(Furazolidone(AOZ))ELISA檢測(cè)試劑盒 喹諾酮類(lèi)(Chinolone)ELISA檢測(cè)試劑盒 鏈霉素(Streptomycin)ELISA檢測(cè)試劑盒 磺胺二甲嘧啶(Sulphamethazine)ELISA檢測(cè)試劑盒 磺胺嘧啶(Sulphadiazine)ELISA檢測(cè)試劑盒 磺胺類(lèi)(Sulphonamides)ELISA檢測(cè)試劑盒 四環(huán)素(Tetracycline)ELISA檢測(cè)試劑盒 牛巴貝斯抗體(Babesia)ELISA檢測(cè)試劑盒 牛泰勒蟲(chóng)抗體(Theileria)ELISA檢測(cè)試劑盒
哈希、羅威邦COD分析試劑,LOVIBOND試劑管, COD分析試劑管 適用型號(hào):LOVIBOND儀表測(cè)量范圍:0 to 150 mg/l COD類(lèi)型:水劑標(biāo)識(shí):COD包裝:25次
★COD專(zhuān)用試劑可搭配原廠(chǎng)或自行選購(gòu)它廠(chǎng)牌試劑★
型 號(hào) LOVIBOND | 測(cè)定范圍 | 包裝 | 對(duì)照廠(chǎng)牌型號(hào) | ||
Hach | Lamotte | CHEMetries | |||
ET99955/ LR | 0 - 150 ppm | 25支/盒 | 2125825 | 0075-SC | K-7350 |
ET99974/ MR | 0 - 1500 ppm | 25支/盒 | 2125925 | 0076-SC | K-7360 |
ET99106/ HR | 0 - 15000 ppm | 25支/盒 | 2415925 | 0077-SC | K-7370 |
人5-HIAA ELISA檢測(cè)分析試劑盒優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨 人VD2 ELISA檢測(cè)分析試劑盒目前生產(chǎn)廠(chǎng)家哪里有?
人ELISA試劑盒參數(shù)規(guī)格:
規(guī)格:96T/48T
保存條件:2-8℃(頻繁使用時(shí));-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí))
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
運(yùn)輸:快遞運(yùn)輸,可根據(jù)客戶(hù)要求,選擇具體的運(yùn)輸方式
人ELISA試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型;
五、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:細(xì)胞因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)、自身免疫檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、特種蛋白檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)等等;
六、價(jià)格優(yōu)惠,質(zhì)量保證,最大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
人ELISA試劑盒說(shuō)明:
1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
需要而未提供的試劑和器材:
1.標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
2.高速離心機(jī)
3.電熱恒溫培養(yǎng)箱
4.干凈的試管和Eppendof管
5.系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),最好用多通道移液器
6.蒸餾水,容量瓶等
人ELISA試劑盒操作步驟:
1,試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。
2,實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3,不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。
4,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6,洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
8,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作方法進(jìn)行操作。說(shuō)明書(shū)以英文說(shuō)明書(shū)為主。
本公司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)各大品牌Elisa試劑盒,其質(zhì)量被全國(guó)各大院?蒲袡C(jī)構(gòu)認(rèn)可,并指定為Elisa試劑盒長(zhǎng)期供應(yīng)商,作為戰(zhàn)略合作伙伴。歡迎來(lái)電咨詢(xún)訂購(gòu)!
免費(fèi)代測(cè),本司相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
Human platelet activating factor,PAF ELISA Kit人血小板活化因子(PAF)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Tissue factor,IF ELISA Kit人組織因子(TF)ELISA KitELISA. 96T/48THuman β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA KitELISA. 96T/48THuman lymphocyte function associated antigen 2,LFA-2 ELISA Kit人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA KitELISA. 96T/48THuman leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 人白三烯E4(LTE4)ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman D-Dimer,D2D ELISA Kit人D二聚體(D2D)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 人免疫球蛋白E(IgE)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISA Kit人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA KitELISA. 96T/48THuman leukoregulin,LR ELISA Kit 人白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thrombopoietin,TPO ELISA kit 人血小板生成素(TPO)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit 人白血病抑制因子(LIF)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Salusin α ELISA Kit人Salusin-α ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Insulin receptor substrate 2,IRS-2 ELISA Kit人胰島素受體底物2(IRS-2)ELISA KitELISA. 96T/48THuman transthyretin,TTR ELISA Kit人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA KitELISA. 96T/48THuman advanced oxidation protein products,AOPP ELISA Kit人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman glycosylated serum protein,GSP ELISA Kit人糖化蛋白(GSP)ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman Glycated Albumin,GA ELISA Kit人糖化白蛋白(GA)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA Kit人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA KitELISA. 96T/48THuman advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA KitELISA. 96T/48THuman C-Polypeptide,CP ELISA Kit人C多肽(CP) ELISA KitELISA. 96T/48THuman Receptor for advanced glycation end products, RAGE/AGER ELISA Kit人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Glucagon,GC ELISA Kit人胰高血糖素(GC)ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman Pancreatic Polypeptide,PP ELISA Kit人胰多肽(PP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit人胰島素自身抗體(IAA)ELISA KitELISA. 96T/48THuman glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thymopentin,TP-5 ELISA Kit人胸腺五肽(TP-5)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thymosin ELISA Kit人胸腺肽(Thymosin)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 ELISA Kit人未磷酸化類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman parathyroid hormone-like protein,PLP ELISA Kit人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman visfatin ELISA Kit 人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA KitELISA. 96T/48THuman apelin 12,AP12 ELISA Kit人apelin 12(AP12)ELISA KiELISA. 96T/48THuman Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit人葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Proinsulin,PI ELISA Kit人胰島素原(PI)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT人胰島素受體β(ISR-β)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA KitELISA. 96T/48THuman ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit人甲狀旁腺激素(PTH)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman dopamine,DA ELISA KIT人多巴胺(DA)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman Azidothymidine,AZT ELISA Kit人疊氮胸苷(AZT)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA KitELISA. 96T/48Thuman corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Thyroglobulin,TG ELISA Kit人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA KitELISA. 96T/48THuman Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit人真核翻譯起始因子3a(eIF3a)ELISA Kit ELISA. 96T/48THuman phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA KitELISA. 96T/48THuman phospholamban,PLN ELISA Kit人受磷蛋白(PLN)ELISA KitELISA. 96T/48T
常見(jiàn)問(wèn)題:
問(wèn):Elisa試劑盒的使用的方法是什么?
答:采用雙抗夾心法(目前暫行)
問(wèn):一個(gè)孔需要多少量的血清?
答:一個(gè)孔上樣量10-50微升。
問(wèn):未處理的樣本我需要郵寄多少的量?
答:每個(gè)孔需要100ul。
問(wèn):樣本怎么保存?
答:當(dāng)天要用的樣本保存4℃
隔天樣本-20℃(近期一個(gè)月左右要用的樣本)
長(zhǎng)期保存樣本-70℃(一年或者更長(zhǎng)時(shí)間多久都可以用)
避免反復(fù)凍融。
問(wèn):小鼠乙酰膽堿Elisa試劑盒后期數(shù)據(jù)處理中空白的OD值有什么用?
答:可以將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的OD值同時(shí)減去空白的值進(jìn)行計(jì)算,或者都不減,保持同一水平就行。
問(wèn):那我們算出來(lái)的ACH含量為什么出現(xiàn)負(fù)值?
答:說(shuō)明個(gè)別樣本的濃度很低,當(dāng)濃度接近第6個(gè)點(diǎn)的時(shí)候,直線(xiàn)方程就有可能計(jì)算出負(fù)值。
問(wèn):小鼠乙酰膽堿Elisa試劑盒,組織標(biāo)本,切割標(biāo)本后能用生理鹽水稀釋嗎?還有稀釋的倍數(shù)是多少?
答:生理鹽水也可以。加入量1:3那樣的。
問(wèn):我想問(wèn)一下,標(biāo)準(zhǔn)品濃度與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值之間是不是線(xiàn)性回歸?檢測(cè)出來(lái)的吸光度很低一般都存在哪些原因?大部分在0.08左右?(大鼠5羥色胺(5-HT)Elisa試劑盒)
答:是線(xiàn)性回歸。檢測(cè)出來(lái)的值比較低,樣本、稀釋、操作等,原因很多,但只要在可操作范圍就行。
問(wèn):做出來(lái)的結(jié)果:標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度呈線(xiàn)性回歸,但是樣品的吸光度都和本體吸光度值接近,正常未予干預(yù)的大鼠血漿都基本沒(méi)有5-HT表達(dá),這是什么原因?(大鼠5羥色胺(5-HT)Elisa試劑盒)
答:原因是:樣本、稀釋、室控和機(jī)器操作等,原因都可能造成吸光度都和本體吸光度值接近。
試劑盒組成及試劑配制:
1.酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2.標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3.樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
人ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
抗體的酶標(biāo)記方法及標(biāo)記效果測(cè)定:良好的酶結(jié)合物取決于兩個(gè)條件:即高效價(jià)的抗體和高活性的酶。抗體的活性和純度對(duì)制備標(biāo)記抗體至關(guān)重要,因?yàn)樘禺愋悦庖叻磻?yīng)隨抗體活性和純度的增加而增強(qiáng)。在酶標(biāo)記過(guò)程中,抗體的活性有所降低,故需要純度高、效價(jià)高及抗原親和力強(qiáng)的抗體球蛋白,最好使用親和層析提純的抗體,可提高敏感性,而且可稀釋使用,減少非特異性吸附。酶與抗體交聯(lián),常用戊二醛法和過(guò)碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標(biāo)記抗體的改良過(guò)碘酸鈉法簡(jiǎn)單易行,標(biāo)記效果好,特別適用于實(shí)驗(yàn)室的小批量制備。其標(biāo)記程序?yàn)椋簩?μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過(guò)碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml,混勻并裝透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(shí)(或過(guò)夜)使之結(jié)合,然后吸出,加硼氫化鈉(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小時(shí),將上述結(jié)合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液,置4℃冰箱30分鐘后離心,將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中,并對(duì)之透析過(guò)夜(4℃),次日離心除去不溶物,即得到酶標(biāo)抗體,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,進(jìn)行測(cè)定后,冷凍干燥或低溫保存。
人5-HIAA ELISA檢測(cè)分析試劑盒優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨 人APC ELISA檢測(cè)分析試劑盒 生產(chǎn)供應(yīng)商廠(chǎng)家
人ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存:
1.血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 xg離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。最后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
人5-HIAA ELISA檢測(cè)分析試劑盒優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨 人FETU-A ELISA檢測(cè)分析試劑盒現(xiàn)貨
人ELISA試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
上海酶遠(yuǎn)elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)、送貨上門(mén)
運(yùn)輸條件:低溫運(yùn)輸,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。
您于我公司購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品后有任何疑問(wèn),都可以打電話(huà)給我公司業(yè)務(wù)員,我們會(huì)為您安排解決。在為了節(jié)省您寶貴的時(shí)間,我們還提供免費(fèi)代實(shí)驗(yàn),只要你把樣品郵寄給我們,我們會(huì)在5-7個(gè)工作日內(nèi)完成,并且保證結(jié)果。如果您對(duì)我們的ELISA試劑盒感興趣的話(huà),您可通過(guò)QQ在線(xiàn)咨詢(xún)、郵箱咨詢(xún)、網(wǎng)站留言、電話(huà)撥打的方式與我們?nèi)〉寐?lián)系,我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),祝您工作愉快!
人ELISA試劑盒訂購(gòu)流程:
1、您確認(rèn)好了產(chǎn)品后可直接和我們?cè)诰(xiàn)聯(lián)系,或者是電話(huà)聯(lián)系,確認(rèn)您購(gòu)買(mǎi)的產(chǎn)品。
2、可以把您需要購(gòu)買(mǎi)的產(chǎn)品確認(rèn)好以郵件的形式發(fā)給我們,這樣您會(huì)在24小時(shí)內(nèi)收到我們給您回復(fù)確認(rèn)的郵件,或者是電話(huà)。
郵寄(免運(yùn)費(fèi))產(chǎn)品:現(xiàn)貨一般當(dāng)天定購(gòu),隔天由倉(cāng)庫(kù)統(tǒng)一出貨;期貨會(huì)在出貨前由專(zhuān)人通知,倉(cāng)庫(kù)備貨,依其產(chǎn)品性能,路途等選擇進(jìn)行包裝郵寄,客戶(hù)如有特別要求,可與銷(xiāo)售人員提前溝通。
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu) 表達(dá)。
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說(shuō)明書(shū)工作原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)表達(dá)。用純化的 人 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與 HRP 標(biāo)記的 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗 滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終 的黃色。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),與 CUTOFF 值相比較,從而判定 標(biāo)本中人 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)的存在與否。
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯(lián)免疫分析試劑盒產(chǎn)品規(guī)格: 1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 陽(yáng)性對(duì)照 | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 陰性對(duì)照 | 0.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能 馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。 操作步驟
1. 編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1
孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不 觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復(fù) 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
計(jì)算和結(jié)果判定:
試驗(yàn)有效性:陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10 臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品 OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu) 陰性
陽(yáng)性判定:樣品 OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為 1,3-βD 葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)
陽(yáng)性.
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng):1.操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未 用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存。
6.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí),參考波長(zhǎng)為 630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時(shí)必須 注意安全。
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)酶聯(lián)免疫分析試劑盒儲(chǔ)存方式:1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個(gè)月
主要用途:通用型線(xiàn)粒體DNA的片段常見(jiàn)缺失(CD4977)定性分析試劑盒是一種旨在從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線(xiàn)粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于動(dòng)物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細(xì)胞的線(xiàn)粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱(chēng)同類(lèi)產(chǎn)品最佳。
通用型線(xiàn)粒體DNA的片段常見(jiàn)缺失(CD4977)定性分析試劑盒注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品為10次(1克動(dòng)物組織或5 X 107細(xì)胞)或50次(200毫克動(dòng)物組織或1 X 107細(xì)胞)操作
2. 實(shí)際操作的動(dòng)物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整:例如200毫克動(dòng)物組織:試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一
3. 所有操作均須嚴(yán)格在4℃或以下?tīng)顟B(tài)進(jìn)行
4. 操作時(shí),須戴手套
5. 操作時(shí),須無(wú)菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(Reagent B)和保存液(Reagent E)
6. 建議使用足夠的樣品量
7. 建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間
8. 通常勻化次數(shù)為20至40下(或細(xì)胞顆粒群/組織塊狀消失為止)達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類(lèi)型會(huì)存在差異。用戶(hù)可以通過(guò)顯微鏡觀(guān)察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加勻化次數(shù)
9. 通常孵育5分鐘(不宜超過(guò)5分鐘)達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類(lèi)型會(huì)存在差異。用戶(hù)可以通過(guò)顯微鏡觀(guān)察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)
10. 對(duì)于難以裂解的細(xì)胞,例如HeLa細(xì)胞,采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理
11. 通常1克動(dòng)物組織或5 X 107細(xì)胞的線(xiàn)粒體含量為50微克以上線(xiàn)粒體蛋白
12. 如果需要計(jì)量線(xiàn)粒體,稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成,否則線(xiàn)粒體將分解
13. 本產(chǎn)品所獲得的線(xiàn)粒體純度和產(chǎn)量最為理想。通過(guò)調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g,可以提高粗提的線(xiàn)粒體純化程度,但線(xiàn)粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少
14. 如果需要獲得99%以上純度的線(xiàn)粒體,使用動(dòng)物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線(xiàn)粒體分離試劑盒-GMS10006.3
15. 線(xiàn)粒體正;钚詼y(cè)定方法是: CITRATE SYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等
16. 線(xiàn)粒體內(nèi)外膜完整測(cè)定方法是:CYTOCHROME C OXIDASE活性和熒光JC染色
17. 本公司提供線(xiàn)粒體套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線(xiàn)粒體溶解等
18. 本公司提供系列線(xiàn)粒體分析試劑產(chǎn)品
通用型線(xiàn)粒體DNA的片段常見(jiàn)缺失(CD4977)定性分析試劑盒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線(xiàn)粒體內(nèi)外膜完整
3. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線(xiàn)粒體維持正常活性
4. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶
通用型線(xiàn)粒體DNA的片段常見(jiàn)缺失(CD4977)定性分析試劑盒 保存方式
保存凈化液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月
通用型線(xiàn)粒體DNA的片段常見(jiàn)缺失(CD4977)定性分析試劑盒其他產(chǎn)品:
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