試劑盒名稱 | 人(ssDNA)ELISA試劑盒 | |
規(guī)格 | 48T/96T | |
品牌 | RENJIEBIO | |
檢測方法 | ELISA酶聯(lián)免疫法 | |
檢測波長 | 450nm | |
樣本 | 血清、血漿、組織、細胞上清液等 | |
樣本體積 | 50~100ul | |
產(chǎn)品貨號 | RJ12947 | |
適用范圍 | 僅用于科研實驗 | |
保質(zhì)期 | 2~8℃,6個月避光保存 |
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)elisa試劑盒科研專用僅供科研實驗
貯藏:2-8℃,避光防潮保存。有效期:6個月用途:本產(chǎn)品僅供科學研究規(guī)格:48T/96T(可提供免費代測服務)1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。2.靈敏度:最低檢測濃度小于10 pg/ml。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構類似物交叉反應。4.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。問題回答
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒科研專用組成:
1、酶聯(lián)板(assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。2、標準品(standard):2瓶(凍干品)。3、樣品稀釋液(sample diluent):1×20ml/瓶。4、生物素標記抗體稀釋液(biotin-antibody diluent):1×10ml/瓶。5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (hrp-avidin diluent):1×10ml/瓶。6、生物素標記抗體(biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7、辣根過氧化物酶標記親和素(hrp-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8、底物溶液(tmb substrate):1×10ml/瓶。9、濃洗滌液(wash buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。10、終止液(stop solution):1×10ml/瓶(2n h2so4)。
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒科研專用
問:新鮮采集后直接零下20度凍存的可以唄,放在95%的酒精里保存的樣品可以嗎?答:可以的問:我們算出來的ACH含量為什么出現(xiàn)負值?答:說明個別樣本的濃度很低,當濃度接近第6個點的時候 直線方程就有可能計算出負值問:一個孔需要多少量的血清?答:一個孔上樣量微升。問:那標準品出現(xiàn)跳孔是怎么回事?答:你完全可以拿同樣的標準品再重新做一次 ,做之前搖勻一下,肯定可以做好 。那是操作問題了 ,你可以再做一次的,之前也有客戶出現(xiàn)過類似的問題 學生做了2次都沒做好 后來老師自己做 就是搖勻了一下,其他操作都一樣 標準曲線做的很完美。
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒科研專用實驗操作時需注意事項:
1.標準品的稀釋與加樣2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48t的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48t的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒科研專用其他產(chǎn)品:
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA KitELISA. 96T/48T大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒Rat Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA Kit ELISA. 96T/48T人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒Human 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA KitELISA. 96T/48T大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒Rat Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA KitELISA. 96T/48T豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 Guinea pig ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA KitELISA. 96T/48T人抗淋巴細胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒 Human anti-lymphocyte globulin,ALG ELISA KitELISA. 96T/48T人抗流行性出血熱病毒抗體IgG (EHF)ELISA試劑盒Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgG antibody,EHF IgG ELISA KitELISA. 96T/48T大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒Rat platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA KitELISA. 96T/48T人β細胞素(BTC) ELISA試劑盒Human beta cellulin,BTC ELISA KitELISA. 96T/48T大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒Rat Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA KitELISA. 96T/48T人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒Human prostate specific antigen,PSA ELISA KitELISA. 96T/48T小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒 Mouse carcinoembryonic antign,CEA ELISA Kit ELISA. 96T/48T人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 Human Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit ELISA. 96T/48T人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒Human Amylin ELISA KitELISA. 96T/48T
一、小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA檢測試劑盒實驗原理
7月29日消息,據(jù)上海臻科午間發(fā)表:小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA檢測試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
二、小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA檢測試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢
1、優(yōu)點明顯 產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強的特點,具有穩(wěn)定的重復性,吸附性能好,空白值低,并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測,方法簡單,操作方便,最大限度的節(jié)省了實驗經(jīng)費。
2、品質(zhì)保障 產(chǎn)品保證質(zhì)量,出庫質(zhì)檢把控嚴格,保障提供給客戶的100%是優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,運輸全程跟蹤,公司承諾有任何質(zhì)量問題包退換,誠信經(jīng)營,合作共贏。
3、專業(yè)定制 應市場需求公司特推出專業(yè)定制elisa試劑盒的服務,全程有專業(yè)的技術老師跟蹤并和客戶保持溝通,直到定制成功為止。
4、免費代測 公司承諾訂購ELISA試劑盒,享全程技術指導并可免費代測,為您分憂。全程有專業(yè)技術老師負責代測,收到樣本一般7個工作日出結(jié)果。
5、服務周到 設立售后服務中心,24小時及時響應,真正做到后顧無憂,不斷完善服務體系。
三、小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA檢測試劑盒標本要求
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
五、小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA檢測試劑盒操作流程
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
六、小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA檢測試劑盒注意事項
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
七、關于小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA檢測試劑盒其他相關試劑
ZK-01393 人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)ELISA檢測試劑盒
ZK-04128 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA檢測試劑盒
ZK-08328 猴子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒
ZK-00192 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA檢測試劑盒
ZK-03233 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA檢測試劑盒
ZK-08385 猴促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA檢測試劑盒
ZK-01122 人骨涎蛋白(BSP)ELISA檢測試劑盒
ZK-05278 兔白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒
ZK-08370 猴皮質(zhì)醇(COR)ELISA檢測試劑盒
ZK-01596 人可溶性腫瘤壞死因子樣細胞凋亡弱誘導因(sTweak)ELISA檢測試劑盒
ZK-04943 馬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA檢測試劑盒
ZK-10207 雞反胰島素樣生長因子2(IGF2AS)ELISA檢測試劑盒
ZK-02725 人中心體紡錘體極相關蛋白1(CSPP1)ELISA檢測試劑盒
ZK-06525 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測試劑盒
ZK-02515 人血小板衍化生長因子BB(PDGF-BB)ELISA檢測試劑盒
ZK-06257 豬5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒
ZK-00864 人蛋白酪氨酸激酶(PTK)ELISA檢測試劑盒
ZK-03931 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA檢測試劑盒
ZK-08930 牛血紅素結(jié)合蛋白(HPX)ELISA檢測試劑盒
ZK-02188 人糖化血紅蛋白(HbA1C)ELISA檢測試劑盒
SSD-300輕質(zhì)磚單手鋸可單人單手任意操作,重量輕,速度快。精巧的設計,操作省時省力。可以在腳手架上任意使用。采用合金烏鋼頭鏈條,切割速度快,經(jīng)久耐用,不生銹。
產(chǎn)品用途:切割建筑用輕質(zhì)磚
SSD-300輕質(zhì)磚單手鋸技術參數(shù):
型號 | SSD-300 | 空載轉(zhuǎn)數(shù) | 660m/min |
導板長度 | 300mm | 電壓 | 220V |
電機功率 | 1800w | 額定電流 | 8.6A |
頻率 | 50HZ | 重量 | 5.5kg |
外形尺寸 | 600*240*140mm |
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隨機附件:碳刷 1副 鏈條1根 導板蓋1個 導板1個 說明書1份 |
SSD-300輕質(zhì)磚單手鋸操作說明1、使用前注意(1)、檢查鏈鋸是否處于良好的工作狀態(tài),若查出機器存在缺陷,則不應使用。(2)、檢查導板上的鏈條松緊是否合適。造成電鏈鋸問題的一個主要原因直接來自于鏈條的松緊。寬松的鏈條會引起過大的摩擦,造成機器的磨損或損壞。(3)、確保要給鏈條很好地供油。為能使鏈條能順暢的通過導板,須給鏈鋸潤滑。(4).確保鏈齒要鋒利。(5)、檢查電纜導線完好無損。2.安裝導板、鏈條和調(diào)節(jié)鏈條的松緊注意確保安裝導板、鏈條前插頭要拔出,在對鏈條進行操作時應當戴合適的手套。(1)沿機身部位平放單手鋸,進行進一步操作前確保單手鋸處于一個穩(wěn)定的位置。(2)旋出鎖緊旋鈕,取下防護蓋部件。(3)垂直握住導板,頭部朝上,將鏈條嵌入到導板凹槽中。確保鏈條能通過凹槽順著導板兩側(cè)順利運轉(zhuǎn)。(4)將帶鏈條的導板放置到單手鋸的減速箱蓋上。鏈條須嵌入鏈輪中,確保導板正確定位。(5)將鏈條和導板固定在適當?shù)奈恢煤,繞鏈輪運轉(zhuǎn)鏈條。確保鏈條刀片的方向與單手鋸的旋轉(zhuǎn)方向一致。(6)同時,在適當?shù)奈恢梦兆О,防止鏈條移動。再將防護蓋部件安裝上,安裝時應調(diào)節(jié)張緊旋鈕,使防護蓋部件上的圓柱銷能插入到導頓上的定位孔中。旋入鎖緊旋鈕,不要太緊。(7)用手調(diào)節(jié)張緊旋鈕:將鏈條調(diào)節(jié)至你所需要的松緊時,擰緊鎖緊旋鈕。當你能通過雙手旋轉(zhuǎn)鏈條,且鏈條緊沿導板四周運轉(zhuǎn)時,就意味著鏈條已經(jīng)正確定位了。 注意新的鏈條首次使用時易于松散,在前幾次使用時要求經(jīng)常性調(diào)節(jié)。鏈條過緊會將導致鏈條過快的磨損。太松的鏈條易于從導板滑出,會導致機器嚴重損壞,可能會傷到使用者
SAT系列為PL法對應之附有安全裝置電壓印加式除電裝置,以除電電極、高壓電源以及接續(xù)除電電極、高壓電源的高壓電纜線、高壓分歧盒構成。搭載SAT系列高壓電源的安全裝置為探測除電電極或者是高壓電纜線內(nèi)的異常電流以切斷高壓電源的過電流保護裝置。 | |||||||||||
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型式 | SAT-10 |
入力電源 | AC100/200V(本體スイッチにて切替) |
消費電流 | 容量:20VA |
使用高圧電源 | 商用周波數(shù)交流型電源(巻線型高圧電源) |
出力電圧 | AC7.0KV |
許容出力電流 | 2.1mA |
許容周囲溫度 | 0~40℃ |
本體寸法(W×H×D) | 90×220×110mm |
重量 | 3900g |
アラーム機能 | 高電圧異常時にブザー及びLED表示、高圧遮斷 |
接続可能電極・配線長 | 総計8m |
付屬品 | 無し |
深圳市海之恒儀器商行聯(lián)系:陳小姐 郵箱:1585293579@QQ.COM
凱力牌DTSD15/DSSD15
型電子式三相多功能電能表
概述(13702769844) DTSD15/DSSD15型電能表是我公司生產(chǎn)的全電子式三相多功能電能表,產(chǎn)品功能齊全,型集有功、無功(A型)、復費率、最大需量和預付費(可選)于一體,全部性能指標符合DL/T614-1997行業(yè)標準,是電能表更新?lián)Q代和用電自動化,半自動化管理的理想產(chǎn)品。
規(guī)格及主要技術參數(shù):(P:有功 Q:無功)
接線方式 | 型 號 | 代號 | 規(guī) 格 | 備注 |
三相三線 | DSSD15A | A | 3×100V 3×1.5(6)A P:1.0 Q:2.0 | 預付費 |
DSSD15A | B | 3×100V 3×1.5(6)A P:1.0 Q:2.0 |
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DSSD15A | Ba | 3×100V 3×1.5(6)A P:0.5 Q:2.0 |
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三相四線 | DTSD15A | A | 3×220/380V 3×1.5(6)A P:1.0 Q:2.0 | 預付費 |
DTSD15A | AⅠ | 3×57.7/100V 3×1.5(6)A P:1.0 Q:2.0 | 預付費 | |
DTSD15A | B | 3×220/380V 3×1.5(6)A P:1.0 Q:2.0 |
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DTSD15A | BⅠ | 3×57.7/100V 3×1.5(6)A P:1.0 Q:2.0 |
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DTSD15E |
| 3×220/380V 3×1.5(6)A P:1.0級 | 預付費 | |
DTSD15E | Ⅰ~Ⅲ | 3×220/380V 3×.5(20),10(40),20(80)A P:1.0級 | 預付費 | |
DTSD1F |
| 3×220/380V 3×1.5(6)A P:1.0級 |
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DTSD15F | Ⅰ~Ⅲ | 3×220/380V 3×.5(20),10(40),20(80)A P:1.0級 |
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最大外型尺寸:274mm×174mm×85mm
最大外型尺寸:274mm×174mm×85mm重 量:2.5kg
主要功能1. 四種費率、十二個時段、八套日時段、百年日歷時鐘;2. 計量三相累計有功總電能、各費率段累計電能;計量無功總電能及各費率段累計無功電能(A型);3. 計量各費率段最大需量,需量周期為15分鐘,滑差時間1-15分鐘可選;4. 有缺相顯示、缺相時間及缺相電能的記錄;5. 可通過光隔離RS-485口或紅外接口,實現(xiàn)通訊、抄表及需量復零功能,也可手動需量復零;6. 采用月底零點抄表,便于電力部門用電統(tǒng)計;7. 有光隔離遠動脈沖輸出功能;8. 用漢化LED分屏顯示本月計量數(shù)據(jù),上月計量數(shù)據(jù)及預置管理數(shù)據(jù);9. 采用帶加密邏輯單元的IC卡預付費,實現(xiàn)先付錢后用電(可選)。
(周經(jīng)理:13702769844)
F6600 | 單鏈DNA(ssDNA) | ELISA | 96T | 2500 | 原裝進口 |
F6601 | 雙鏈DNA(dsDNA) | ELISA | 96T | 2500 | 原裝進口 |
F6626 | U.S.Salmon CT超敏鮭魚降鈣素 | ELISA | 96T | 5500 | 原裝進口 |
F6627 | 人白細胞抗原B27 (HLA B27) | ELISA | 96T | 5000 | 原裝進口 |
F6628 | 腎小球基底膜抗體(GBM) | ELISA | 96T | 3000 | 原裝進口 |
F6633 | 乳鏈蛋白酶抗體(Lactoferin Ab) | ELISA | 96T | 4500 | 原裝進口 |
F6636 | 胰蛋白酶α1 | ELISA | 96T | 4500 | 原裝進口 |
F6637 | 組織蛋白酶B | ELISA | 96T | 4500 | 原裝進口 |
F6638 | 組織蛋白酶G抗體 | ELISA | 96T | 4500 | 原裝進口 |
F6639 | 組織蛋白酶L | ELISA | 96T | 4500 | 原裝進口 |
F6640 | 彈性硬蛋白酶抗體 | ELISA | 96T | 4500 | 原裝進口 |
F6641 | 胃蛋白酶原 | ELISA | 96T | 4500 | 原裝進口 |
F6642 | 胃壁細胞抗體 | ELISA | 96T | 4500 | 原裝進口 |
F6646 | RNP | ELISA | 96T | 2500 | 原裝進口 |
F6647 | 干燥綜合征A抗原(SS-A) | ELISA | 96T | 2500 | 原裝進口 |
F6648 | 干燥綜合征B抗原(SS-B) | ELISA | 96T | 2500 | 原裝進口 |
單鏈DNA(ssDNA) ELISA試劑盒
ELISA質(zhì)量是一個復雜的過程,許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質(zhì)量樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
一、方法學的影響
ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競爭等因素的影響,結(jié)果重復性較差,質(zhì)量較難控制。
二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難質(zhì)量一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復雜過程,并且能夠結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復凍融造成試劑的失效。
三、樣本因素
標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。
四、操作因素對ELISA結(jié)果的影響
ELISA操作步驟復雜,操作不當將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色
五、灰區(qū)的設置
通常情況下,ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù)。
六、標本復查
ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,因此加大復查力度是結(jié)果性的方法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結(jié)果進行復查。
七、結(jié)果判斷和報告
常用下列幾種方法表示結(jié)果:
1.定性測定
2.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示。
3.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,繪制標準曲線,結(jié)果以絕對量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。
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