中文名稱:小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒
英文名稱:Mouse SDH ELISA kit
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小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒用途:
本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 的含量。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 原理:
采用雙抗體夾心法測定小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 水平。用純化的小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 抗體包被微孔板,制成固相載體,實驗時依次在微孔板中加入樣本及標準品,并加入HRP標記的抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,反復洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化為藍色,再用硫酸終止反應,轉變成黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 含量呈正相關。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),根據(jù)標準曲線,計算測試樣品中小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) 濃度。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒試劑盒組成
序號 | 名稱 | 規(guī)格 |
1 | 酶標包被板 | 96孔*1可拆卸板 |
2 | 酶標試劑 | 6ml*1瓶 |
3 | 標準品 | 0.6ml*1瓶 |
4 | 標準品稀釋液 | 2ml*1瓶 |
5 | 生物素標記的抗體 | 1.5ml*1瓶 |
6 | 顯色劑A液 | 6ml*1瓶 |
7 | 顯色劑B液 | 6ml*1瓶 |
8 | 終止液 | 6ml*1瓶 |
9 | 濃縮洗滌液(*30) | 20ml*1瓶 |
10 | 封板膜 | 1張 |
11 | 使用說明書 | 1份 |
實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 洗液的配制:按1:30的比例配制洗液備用。
樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2. 分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。
標準品的稀釋:準備小試管6 只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul,然后取原濃度標準品100ul 加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復5 次,拍干。
6. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液(空白對照孔除外)。
7. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于37℃恒溫孵育1小時。
8. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標板5次,用吸水紙徹底拍干。
9. 顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
10. 終止:25-37℃下避光反應10-15分鐘,加入50ul終止液。
11. 讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內,以免影響準確性。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒數(shù)據(jù)計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,即為樣品的實際濃度。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商聯(lián)系,如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH) elisa試劑盒保存條件及有效期:
1. 試劑盒保存:2-8℃
2. 有效期:6個月
產品名稱: | 人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | |||||
產品英文名稱: | Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA kit | |||||
規(guī)格: | 48T/96T | |||||
檢測方法: | 雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA) | |||||
標本: | 血清,血漿,細胞上清液,組織等 | |||||
種屬: | Human\\人 | |||||
試劑盒說明書: | 請來電或者郵件索取 | |||||
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | ||||||
實驗材料與試劑配制: | ||||||
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘,微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。 | ||||||
2. 洗液的配制:按 1:100的比例配制洗液備用。 樣品收集、處理及保存 | ||||||
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集上清液,以1000×g離心15 | ||||||
分鐘,收集上清。 | ||||||
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞 3次,調整細胞濃度達到10^4-10^6/ml左右,通過反復凍融, | ||||||
使細胞破壞,并放出細胞內成份?;蛘呒毎暦鬯椋x心取上清液檢測。 | ||||||
3. 血清: 在室溫 下, 血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。 | ||||||
4. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置 10 -20 分鐘后, | ||||||
以1000×g離心15分鐘,收集上清。 | ||||||
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集 ,以 1000×g | ||||||
離心、15 分鐘 ,收集上清。 | ||||||
6. 組織標本:切取 組織標本,稱取重量0.5mg加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,超聲破碎儀, | ||||||
將標本勻漿,以2000 -300rmp離心 20 分鐘 ,收集上清進行檢測 。 | ||||||
7. 樣品 中不能含有 NaN3,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。 | ||||||
8. 保存 :如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-80 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn) | ||||||
沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心 | ||||||
或過濾。不要在 37 ℃或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解或更高的溫度 | ||||||
加熱解或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解并確保樣品均勻地充分解凍。 | ||||||
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | ||||||
操作步驟 : | ||||||
1. 取出 試劑盒,室溫( 20 -25 ℃)放置 30 分鐘。 | ||||||
2. 分組: 取出 96 孔板 根據(jù)待測樣品數(shù) 量加上標準品的數(shù)量決定所需板條,把剩余的板條繼續(xù) | ||||||
冷藏處理,分別設標準品組(6個濃度)、空白 孔、待測樣品組。 | ||||||
注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。 | ||||||
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入100ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入100ul的 | ||||||
蒸餾水;其余微孔中加入100ul的待測樣本。 | ||||||
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul 的酶標溶液 (空白對照孔除外)。 | ||||||
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內于 37 ℃恒溫孵育恒溫孵育 1小時。 | ||||||
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15 -30s 30s,充分清洗酶標板5次,用吸水紙徹底拍干。 | ||||||
7. 顯色:各孔加入顯色劑A液 50ul 后,再加入顯色劑 B液 50ul 。 | ||||||
8. 終止: 25 -37 ℃下避光反應10 -15分鐘, 加入 50 ul 終止液。 | ||||||
9. 讀板:在 450nm波長讀取各孔的O 值。注: 讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡, | ||||||
讀板時間控制在終止反應后的30 分鐘內,以免影響準確性。 | ||||||
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | ||||||
數(shù)據(jù)計算 | ||||||
1. 繪制標準曲線:各標準品 OD 值減去底色即堅強空白孔OD 值(數(shù)據(jù)處理如下),繪制標準曲線圖。 | ||||||
1.1軟件處理:建議用戶使logit-log模式或四參數(shù)據(jù)處理模式( y=(a-d)/(1+(x/c)^b)+d ) | ||||||
1.2計算器或手工作圖處理:Logit-log 計算:以6個標準品OD 值的 Logit為縱坐標 y,以標準品的 | ||||||
濃度的 log值為橫坐標X,繪制曲線圖。logit值計算公式如下:logit=ln(B/ B0)(1-B/ B0)手工 | ||||||
作圖:以標準濃度取log值為橫坐標,對應的logit值為縱坐標,在普通坐標紙上或以標準濃度為 | ||||||
橫坐標,對應的 B/B0B為縱坐標在 logit-log坐標紙上畫出標準曲線(理想化時是一條直)。 | ||||||
2. 根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標紙,查出的 | ||||||
數(shù)值應取反對數(shù)才是最后濃度值。 | ||||||
3.敏感度:1.0µmol/L | ||||||
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA 試劑盒 | ||||||
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【中文名稱】:人山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒
【英文名稱】:Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISA Kit
【產品規(guī)格】:96T/48T。
【產品貨號】:YM-S1320。
【試劑盒成分】:酶標板,試劑,標準品等ELISA試劑盒檢測范圍:人、綿羊、山羊、牛、馬、小鼠、大鼠、豬、兔、其它動物細胞因子、植物細胞因子、細胞凋亡、活性多肽、自身抗體、血栓與止血、骨代謝、肝纖維化、腫瘤、激素內分泌、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。
主要用于科研方面,不用于臨床診斷??梢杂糜跈z測各種指標。
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人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒是本產品的中文名稱
英文名稱:Rat Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit
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試劑盒產地:進口/國產
儲存方式:2-8℃
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以上信息為人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒的詳細內容!
人SDH elisa試劑盒
產品別名:人山梨醇脫氫酶ELISA試劑盒
英文名稱:Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA KIT
包裝:96T/48T
價格:詢價(010-57269780,15311645695 在線QQ:1261299569)
ELISA關鍵步驟為以下幾點:1、盡量用八道或者十二道移液器加樣。對于相同的試劑,經如二抗,酶,顯色液,終止液等。2、自己的樣品,因為每一孔的樣品不一樣,用排槍加有些麻煩,如果一次的樣品比較少,而自己加樣又比較快,可以一個孔一個孔的加,但如果想一次把96或者48T的做完,可以先擺好一些PCR管或者準備一個96孔細胞培養(yǎng)板。將自己的樣品先加到PCR管或者培養(yǎng)板中(此板間距與酶板板相同)。記得加一定的余量,如一次加樣是50ul,可以先加70ul。加完后再用排槍加樣,這樣可以縮短加樣時間,減小每個孔間的時間誤差。3、如果有多余的孔,標準品孔可以做復孔,在自己的樣品前加一次標準品,加完樣品后再加一次標準品。如果孔不夠,那么可以將標準品放在樣品中間加。
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中文名稱 : 小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse SDH ELISA kit
產品類別:小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒 用于科研實驗 不使用于臨床
ELISA試劑盒規(guī)格:48T/96T
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德國力士樂溢流閥DB10、DBDS、減壓閥DBW10、DBW20、DBW30
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聯(lián)系人:梁先生 13357975897 郵箱:1135382307@qq.com
B&K VIBRO德國申克電渦流位移傳感器4mm量程范圍
探頭:SDH-151/6/105/50/0 SDH-154/6/050/50/0
前置器OD-151
延長電纜EC-001/40/0 延長電纜EC-001/45/0 延長電纜EC-001/90/0
延長電纜EC-001/95/0 延長電纜EC-002/40/0 延長電纜EC-002/45/0
延長電纜EC-002/90/0 延長電纜EC-002/95/0 延長電纜EC-003/40/0
延長電纜EC-003/45/0 延長電纜EC-003/90/0 延長電纜EC-003/95/0
聯(lián)系人:梁先生 13357975897 郵箱:1135382307@qq.com
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