上海仁捷生物專業(yè)為你提供微生物琥珀酸脫氫酶(SDH)elisa試劑盒
產(chǎn)品名稱:微生物琥珀酸脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒檢測(cè)目的
特色服務(wù):微生物琥珀酸脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒檢測(cè)目的可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)
組成成分:試劑、酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品等
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品價(jià)格:請(qǐng)'來電咨詢'173 02193538 qq:245 0868877
應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)
研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。
其他產(chǎn)品種屬:人ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 兔ELISA試劑盒 倉鼠ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 豚鼠ELISA試劑盒 魚ELISA試劑盒 雞ELISA試劑盒 馬ELISA試劑盒 豬ELISA試劑盒犬ELISA試劑盒 羊ELISA試劑盒 昆蟲ELISA試劑盒 植物ELISA試劑盒
產(chǎn)品貨期:現(xiàn)貨
微生物琥珀酸脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒檢測(cè)目的組成及試劑配制:
1、酶聯(lián)板(assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。2、標(biāo)準(zhǔn)品(standard):2瓶(凍干品)。3、樣品稀釋液(sample diluent):1×20ml/瓶。4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(biotin-antibody diluent):1×10ml/瓶。5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (hrp-avidin diluent):1×10ml/瓶。6、生物素標(biāo)記抗體(biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(hrp-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8、底物溶液(tmb substrate):1×10ml/瓶。9、濃洗滌液(wash buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。10、終止液(stop solution):1×10ml/瓶(2n h2so4)。
微生物琥珀酸脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒檢測(cè)目的
使用我公司試劑盒,只收取試劑盒的費(fèi)用,其他輔助試劑全部免費(fèi)。我們將根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量和難易程度,雙方協(xié)定實(shí)驗(yàn)周期,保質(zhì)保量完成委托實(shí)驗(yàn),并將實(shí)驗(yàn)結(jié)果和材料用特快專遞免費(fèi)寄送到您手中。從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。歡迎新老客戶來電訂購!
微生物琥珀酸脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒檢測(cè)目的其他產(chǎn)品推薦:
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一、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
8月3日消息,據(jù)上海臻科午間發(fā)表:牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測(cè)試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被牛山梨醇脫氫酶(SDH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛山梨醇脫氫酶(SDH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
二、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、優(yōu)點(diǎn)明顯 產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn),具有穩(wěn)定的重復(fù)性,吸附性能好,空白值低,并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測(cè),方法簡單,操作方便,最大限度的節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
2、品質(zhì)保障 產(chǎn)品保證質(zhì)量,出庫質(zhì)檢把控嚴(yán)格,保障提供給客戶的100%是優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,運(yùn)輸全程跟蹤,公司承諾有任何質(zhì)量問題包退換,誠信經(jīng)營,合作共贏。
3、專業(yè)定制 應(yīng)市場(chǎng)需求公司特推出專業(yè)定制elisa試劑盒的服務(wù),全程有專業(yè)的技術(shù)老師跟蹤并和客戶保持溝通,直到定制成功為止。
4、免費(fèi)代測(cè) 公司承諾訂購ELISA試劑盒,享全程技術(shù)指導(dǎo)并可免費(fèi)代測(cè),為您分憂。全程有專業(yè)技術(shù)老師負(fù)責(zé)代測(cè),收到樣本一般7個(gè)工作日出結(jié)果。
5、服務(wù)周到 設(shè)立售后服務(wù)中心,24小時(shí)及時(shí)響應(yīng),真正做到后顧無憂,不斷完善服務(wù)體系。
三、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本要求
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
四、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測(cè)試劑盒操作流程
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。
五、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存。
6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
六、關(guān)于牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA檢測(cè)試劑盒其他相關(guān)試劑
ZK-01197 人花生四烯酸5脂氧合酶(ALOX5/LOG5)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-02818 人組織蛋白去乙?;?HD)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-08398 猴slit同源物2(果蠅)(SLIT2)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-01685 人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-03691 大鼠白介素10受體α(IL10Rα)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-09906 雞甘油三酯(TG)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-01065 人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-04132 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-09413 山羊轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-02227 人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-05970 豬血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM-1/CD31)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-00575 人阿立新A(Orexin A)ELISA檢測(cè)試劑盒
ZK-03532 小鼠白蛋白(ALB)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
ZK-08601 牛血小板因子4(PF4)ELISA檢測(cè)試劑盒
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ZK-02069 人生長激素(HGH)ELISA檢測(cè)試劑盒
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ZK-00416 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物(S100A8/A9)ELISA檢測(cè)試劑盒
牛山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒,牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒說明書,牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒價(jià)格一、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
7月25日消息,據(jù)上海臻科對(duì)行業(yè)的市場(chǎng)透露: 牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被牛山梨醇脫氫酶(SDH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛山梨醇脫氫酶(SDH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
二、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 品種齊全、質(zhì)量可靠、靈敏度高、穩(wěn)定性好、操作簡便
2.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
3.重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
4.同城(上海)需要代測(cè)可免費(fèi)上門取樣,享送貨上門的服務(wù)。
5.根據(jù)客戶需求可以根據(jù)客戶的要求定制ELISA試劑盒。
6.臻科生物可提供全方位的售前、售中、售后技術(shù)支持,為您解決實(shí)驗(yàn)過程中遇到的問題。
三、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒標(biāo)本要求
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
四、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×8條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無 |
五、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作流程
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。
六、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 封板膜只限一次性使用,避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。底物請(qǐng)避光保存
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
七、關(guān)于牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒特別聲明
公司長期與各大高校、醫(yī)院及權(quán)威科研單位保持著良好的合作關(guān)系,公司的產(chǎn)品質(zhì)量及服務(wù)態(tài)度得到了他們的一致認(rèn)可。臻科生物本著客戶至上的原則為客戶提供高質(zhì)量高品質(zhì)的產(chǎn)品,公司承諾如有任何質(zhì)量的問題免費(fèi)包退換(非人為因素造成的)??筛鶕?jù)客戶要求定制ELISA試劑盒,并承諾直到客戶滿意為止。如您想要了解更多技術(shù)參數(shù)可以直接聯(lián)系我司客服人員。
人山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒上海潤裕生物科技有限公司等科研產(chǎn)品,我公司ELISA試劑盒和免疫組化試劑盒產(chǎn)品質(zhì)量可靠,ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析試劑盒)專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)及售后指導(dǎo)。所以生物試劑產(chǎn)品用于科研實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域,如有需要請(qǐng)直接來電或給我們留言(半個(gè)工作日內(nèi)給您回復(fù))。
歡迎來電索取產(chǎn)品報(bào)價(jià),產(chǎn)品說明書,潤裕生物品質(zhì)服務(wù),真誠相伴!
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA試劑盒種屬齊全:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
產(chǎn)品運(yùn)輸方面:部分現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨
2、檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
3、服務(wù)承諾:工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)技術(shù)咨詢和指導(dǎo),提供來樣檢測(cè)及免費(fèi)代測(cè)服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。
4、研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、腫瘤研究、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。
如果人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒所檢測(cè)的樣本不是連續(xù)的,所以實(shí)驗(yàn)中不用的板條立即放回包裝中,密閉封口,4℃可保存1個(gè) 月。其余不用試劑應(yīng)包裝好或蓋好。在做樣本檢測(cè)前要有一個(gè)完整的計(jì)劃,如標(biāo)本編號(hào)、所測(cè)項(xiàng)目、目的等。操作時(shí)盡量使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
主要分為以下系列:
1、細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒
2、內(nèi)分泌檢測(cè)試劑盒
3、肝纖維化檢測(cè)試劑盒
4、心肌梗塞檢測(cè)試劑盒
5、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒
6、自身免疫檢測(cè)試劑盒
7、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)試劑盒
8、傳染病檢測(cè)試劑盒等等。
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作步驟
方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。
方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,選擇好各項(xiàng)ELISA實(shí)驗(yàn)條件是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
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人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒產(chǎn)品信息:
英文名稱:Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào):SBJ-H1226
品牌:森貝伽
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
保存:2-8℃,避光保存
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨供應(yīng)
有效期:六個(gè)月
注:僅用于科研,不得用于臨床診斷
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng):
1.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
2.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。5.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。7.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
8.按照試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
9.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒其他熱銷產(chǎn)品:
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