Proclin 系列防腐劑 為解決生物樣本處理過程中保存期短的問題,SUPELCO 公司推出新一代高效生物防腐劑 ProClin150,200,300,5000,可以有效地控制體外診斷試劑中微生物的生長。當(dāng)濃度達(dá)到 0.02% 條件下,ProClin 系列防腐劑具有廣譜抗菌活性,能在比較長的時(shí)間內(nèi)抑制細(xì)菌、真菌和酵母菌 等微生物的生長;同時(shí),它又能保持體系中酶的活性,因此它是一種理想的可替代硫汞撒、疊氮 化鈉和慶大霉素等生物防腐劑。
一、ProClin 系列防腐劑的優(yōu)點(diǎn)
• 廣譜抗菌性,作用速度快;良好的與酶的相容性,不會(huì)影響與酶或抗體的 相關(guān)反應(yīng)。
• 使用劑量少,6-20ppm 的 ProClin300 即可達(dá)到抑菌的目的。
• pH 適用范圍廣(pH2-8.5* ),化學(xué)穩(wěn)定性好。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測,在 25 度下保存 2 年,該防 腐劑的活性組分僅損失 3%。
• 毒性遠(yuǎn)低于同類產(chǎn)品硫柳汞。
• 與水可以任意比混合。
二、ProClin 系列防腐劑作用原理
ProClin 系列防腐劑的活性成分主要是 2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(MCI)和 5-氯-2-甲基-4- 異噻唑啉-3-酮(CMCI)。這兩種成分抑制細(xì)胞的生長以及促使細(xì)胞凋亡的原理相同;钚猿煞 在與細(xì)胞膜接觸幾分鐘后,立即可以滲透到膜內(nèi)并抑制細(xì)胞內(nèi)酶的活性(見圖 1)。目標(biāo)酶處于 細(xì)胞代謝 KREBS 循環(huán)的中心位置,ProClin 系列防腐劑作用 KREBS 循環(huán)的四個(gè)不同位置(見圖 2): 丙酮酸脫氫酶(pyruvate dehydrogenase),a -酮戊二酸脫氫酶(ketoglutarate dehydrogenase), 琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase)和 NADH 脫氫酶(NADH dehydrogenase)。從而抑制細(xì)胞 生長代謝,大分子的合成,引起細(xì)胞內(nèi)能量水平迅速下降。由于能量體系的崩潰,細(xì)胞不能合成 日常代謝所需要的化合物。所有的細(xì)菌及真菌至少擁有部分 KREBS 循環(huán),所以 ProClin 系列防腐 劑的適用的范圍非常廣泛。其次,ProClin 系列防腐劑具有多標(biāo)靶作用位點(diǎn),因此大大降低了因 變異產(chǎn)生的微生物的耐藥性。隨著 KREBS 循環(huán)被阻斷,細(xì)胞產(chǎn)生能量(以合成 ATP 為標(biāo)志,見圖 3)和合成酶等生物活性物質(zhì)的能力迅速下降,但其使用劑量卻保持比較低的水平對(duì)人畜無害。
三、ProClin 系列防腐劑性能
1. ProClin 系列防腐劑對(duì)診斷試劑影響:
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,ProClin 系列防腐劑不會(huì)對(duì)診斷試劑中的關(guān)鍵酶與底物的結(jié)合速率產(chǎn)生 影響,比如:辣根過氧化酶(HRP),堿性磷酸酶(AP)。 圖 4. 250ppmProClin300 對(duì) HRP(AP)與底物結(jié)合速率的影響 短期效應(yīng) 即使 ProClin300 的使用濃度超過推薦濃度 15 倍時(shí),其短期內(nèi)對(duì)于 HRP 和 AP 的 Km 和 Vmax 無影響(見表 1)。 表 1.ProClin300 對(duì) HRP 和 AP 的 Vmax 的影響
Km(Mm) Vmax(ΔA/min/mg prrotein)
辣根過氧化酶(HRP) 6.9 904
+15ppm ProClin300 6.8 861
辣根過氧化酶(HRP) 7.9 520 +250ppm ProClin300 8.3 525
堿性磷酸酶(AP) 0.69 138
+15ppm ProClin300 0.56 131
堿性磷酸酶(AP) 1.40 153
+250ppm ProClin300 1.20 142
長期效應(yīng)
長期使用 ProClin 300 同樣不會(huì)對(duì)酶(例如:HRP 和 AP,見圖 5)的活性產(chǎn)生影響。 圖 5. 4 度(37 度)下 ProClin 對(duì) AP (HRP)活性的影響
2. ProClin 系列防腐劑對(duì)抗體結(jié)合的影響
在推薦使用濃度下,ProClin 系列防腐劑不會(huì)對(duì)抗體的結(jié)合產(chǎn)生影響。通過研究 ProClin 300 對(duì)經(jīng)純化過小鼠 IgM 抗原與聯(lián)結(jié) HRP 的抗-小鼠 IgM 抗體之間結(jié)合的影響,表明濃度在 300ppm 以下,ProClin 300 不會(huì)對(duì)其產(chǎn)生影響(見圖 6)。50ppm 的 ProClin 300 保存上述抗體 35 天同 樣無影響。 圖 6. ProClin300 對(duì)連接 HRP 的抗體影響
四、ProClin 系列防腐劑的參數(shù)
應(yīng)用 體外診斷試劑盒,校正液,對(duì)照液,有機(jī)試劑的保存 僅 ProClin5000 推薦使用在血清基質(zhì)液的保存
1 2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮和 5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮
2 2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮
3 數(shù)據(jù)在收集中
相關(guān)試劑
HRP 酶穩(wěn)定劑 ZB055 3500.00/100 克
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