培養(yǎng)方法傳代方法將舊培養(yǎng)液吸除,pbs清洗兩遍后,加入6ml(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細(xì)胞剛有脫落時(shí),則吸除大部分胰酶,留約0.5ml,移至培養(yǎng)箱消化,約2min取出。傳代用12ml cm1-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細(xì)胞,后可分3~6皿培養(yǎng);生長(zhǎng)條件37℃,5%co2,cm1-1培養(yǎng)液。cm1-1培養(yǎng)液:90%dmem-h+10%fbs。dmem-h:dmem高糖培養(yǎng)液,含谷氨酰胺,含丙酮酸鈉。存儲(chǔ)條件凍存則用6ml凍存液(90%fbs+10%dmso)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過(guò)夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
更新時(shí)間:2024-11-12