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人C肽Elisa試劑盒,(C-Peptide)Elisa試劑盒 更多試劑產(chǎn)品:
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試劑盒名稱:人ELISA試劑盒—人C肽ELISA試劑盒
檢測用所有試劑全部都為進口試劑,適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,靈敏度極高,多年專業(yè)酶免服務(wù),我們保證對所售任何產(chǎn)品一概負責(zé)到底,每一份實驗結(jié)果都真實可靠!各檢測項目酶免(ELISA)試劑盒具備,價格優(yōu)惠,定貨及時,送貨上門.此外,我公司還提供樣本代測服務(wù)。
規(guī)格:48T/96T
人ELISA試劑盒—人C肽ELISA試劑盒 組織樣品前處理:①1g組織切碎后加5倍體積的TBS,用均質(zhì)器均質(zhì)(10次)。 組織勻漿5000×g,4℃離心20分鐘TBS:50 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6, 150 mmol/L NaCl , 蛋白酶抑制劑 [0.1 mmol/L 二異丙基氟磷酸鹽 , 0.5 mmol/L 苯甲磺酰氟 , 1 g/mL甲苯磺酰-L-賴氨酸氯甲基酮鹽酸鹽, 1 g/mL抗痛素, 0.1 g/mL亮肽素]②沉淀物懸浮與5倍體積的TBA/蛋白酶抑制劑(含1 mol/L蔗糖),5000×g,4℃離心20分鐘。③沉淀物中加入3倍體積的1%Triton X-100/TBS/蛋白酶抑制劑,勻質(zhì)(10次)。37℃孵育15分鐘后,5000×g離心20分鐘。④沉淀物和勻質(zhì)物中加入3倍體積的2%SDS/TBS/蛋白酶抑制劑到。組織勻漿37℃孵育15分鐘后,500000×g 25℃離心。⑤沉淀物中加1mL 70%蟻酸到,超聲破碎后5000×g 4℃離心⑥收集上清液并用離心濃縮(Speed Vac)干燥。加100μL DMSO并短時超聲破碎成懸液。零下80℃儲存這個DMSO-蟻酸溶解的改組織溶液直到使用。⑦檢測時,依照說明書所寫,用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液溶解樣本。
人ELISA試劑盒—人C肽ELISA試劑盒 操作步驟: 實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?瞻卓准訕悠废♂屢100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。 為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。 4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
人ELISA試劑盒—人C肽ELISA試劑盒 產(chǎn)品訂購說明:1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日最新價格為準(zhǔn)。 4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、電話等以傳真、EMail、短信、電話等形式通知我們。
人C肽Elisa試劑盒,(C-Peptide)Elisa試劑盒 為客戶提供來樣檢測服務(wù),最大限度實驗結(jié)果的有效性(免費代測)。
盒裝規(guī)格:96T/48T
kit成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等—點此免費索取提供Elisa試劑盒說明書!
人C肽Elisa試劑盒,(C-Peptide)Elisa試劑盒 實驗誤差分為三種:系統(tǒng)誤差、隨機誤差和過失誤差。1、系統(tǒng)誤差是指一系列測定結(jié)果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差,有明顯的規(guī)律性,可在一定條件下重復(fù)出現(xiàn),是可以通過質(zhì)控預(yù)防和校正的。2、隨機誤差又稱偶然誤差,是一種偶然的、未能預(yù)料到的誤差,是難以避免和校正的誤差。檢驗工作中隨機誤差的分布符合正態(tài)分布規(guī)律。3、過失誤差是人為的責(zé)任誤差。通過加強實驗室管理和開展質(zhì)量控制工作是可以避免的。
人C肽Elisa試劑盒,(C-Peptide)Elisa試劑盒 本公司Elisa試劑盒庫存現(xiàn)貨,涵蓋人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、犬、雞、馬、猴、羊、豬、牛、各類植物等等種屬
HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit,人N-乙;-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸Elisa檢測試劑盒雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒 Chicken adrenomedullin,ADM ELISA試劑盒IL-20,小鼠白介素-20Elisa試劑盒大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒Rat Interleukin 1β,IL-1β ELISA試劑盒 兔Elisa試劑盒,兔CollagenaseII Elisa試劑盒,RabbitCollagenaseTypeIIELISA試劑盒Elisa供應(yīng),甲啡肽M-enkephA試劑盒l(wèi)inELISA試劑盒,96T/48T小鼠Elisa試劑盒,小鼠FⅨ Elisa試劑盒,MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISA試劑盒人Elisa試劑盒,人25OH Elisa試劑盒,Human25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒人Elisa試劑盒,人BLI Elisa試劑盒,Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA試劑盒大鼠Elisa試劑盒,大鼠LF/LTF Elisa試劑盒,RatLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒human Prostaglandin F,PG-F ELISA試劑盒人(PGF)kit說明書,前列腺素FElisa試劑盒人血清素/血清胺Elisa試劑盒,(ST)Elisa試劑盒HumanSerotonin,STELISA試劑盒Rat transforming growth factorsβ2,TGFβ2 ELISA Kit ,大鼠elisa試劑盒,大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒,(TGFβ2)Elisa試劑盒人巨噬細胞活化因子Elisa試劑盒,(MAF)Elisa試劑盒Humanmacrophageactivatingfactor,MAFELISA試劑盒HDL-C(HumanHighdensitylipoproteincholesterol)ELISAKit,人高密度脂蛋白膽固醇Elisa檢測試劑盒人Elisa試劑盒,人ACAST-DⅣ Elisa試劑盒,HumanautoantibodiesagainsttheC-terminaldomainⅣ,ACAST-DⅣELISA試劑盒LPL ELISA Kit,大鼠脂蛋白脂酶Elisa檢測試劑盒大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒Rat Follistatin,FS ELISA試劑盒大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒 Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA試劑盒 Elisa供應(yīng),白介素7IL-7ELISA試劑盒,96T/48THuman Parathyroid Hormone-Like Related Protein,PTHrP ELISA試劑盒人(PTHrP)kit說明書,甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白Elisa試劑盒人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒Human basic fibroblast growth factor 9,bFGF-9 ELISA試劑盒 大鼠Elisa試劑盒,大鼠SHBG Elisa試劑盒,Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA試劑盒Rat Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit,大鼠elisa試劑盒,大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白試劑盒,(AFP)Elisa試劑盒人瘦素(LEP)ELISA試劑盒Human Leptin,LEP ELISA試劑盒 Human Angiotensinase ELISA Kit,人elisa試劑盒,人血管緊張肽酶試劑盒,(Angiotensinase)Elisa試劑盒 人黑色素細胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒Human melanocyte antibody,MC Ab ELISA試劑盒MSA(Humanmitoticspindleapparatusantibody)ELISAKit,人抗紡錘體抗體Elisa檢測試劑盒Mouse Bladder tumor antigen,BTA ELISA試劑盒小鼠(BTA)kit說明書,膀胱腫瘤抗原Elisa試劑盒Human ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit ,人elisa試劑盒,人卵清蛋白特異性IgG試劑盒,(OVA sIgG)Elisa試劑盒 Elisa供應(yīng),其它白介素受體系列ELISA試劑盒,96T/48TEotaxin1/CCL11(MouseEotaxin1)ELISAKit,小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Elisa檢測試劑盒
C-P,BIM人C肽ELISA試劑盒哪家好
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人C肽(C-P)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
工作原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人C肽(C-P)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人C肽(C-P)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣本處理及要求
1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。
標(biāo)本處理
1. 本公司只對試劑盒本身負責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
2. 實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高,應(yīng)對標(biāo)本進行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
3. 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
4. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。
5. 若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
6. 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
7. 建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差。
需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 8孔×12條 | 8孔×6條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
備注:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:8、4、2、1、0.5、0 ng/mL
2. 經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗,標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過最大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時,可用樣本稀釋液將標(biāo)本進行適當(dāng)稀釋后再進行實驗。
注意事項
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
實驗結(jié)果計算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。
性能特點
1. 檢測范圍:0.25 ng/mL – 8 ng/mL。
2. 靈敏度:最低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
說明
1. 由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。
2. 最終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。
3. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。
4. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到最佳的檢測結(jié)果。
常見問題
若實驗效果不好,請及時對顯色結(jié)果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:
問題 | 可能原因 | 解決方案 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線差 | 吸取及洗滌不充分 | 充分的吸取及洗滌 |
移液不精確 | 檢查和校正移液器 | |
精密度低 | 洗滌不充分 | 按說明書要求充分洗滌和浸泡 |
混勻不充分和吸取試劑不足 | 充分混勻和吸取試劑 | |
重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜 | 使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜 | |
加樣不精確 | 檢查和校正移液器 | |
O.D值低 | 每孔加的試劑量不精確 | 校正移液器,精確加入試劑 |
溫育時間不正確 | 保證充足的溫育時間 | |
溫育溫度不正確 | 試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度 | |
酶標(biāo)記物或底物失效 | 通過混合酶標(biāo)記物和底物,顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查 | |
沒有加入終止液 | 按照說明書實驗操作步驟加入終止液 | |
超出讀數(shù)時間讀數(shù) | 在說明書推薦的讀數(shù)時間內(nèi)讀數(shù) | |
樣本值 | 不正確的樣本儲存方式 | 正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗 |
不正確的樣本收集和處理方法 | 采取正確的樣本收集和處理方法 | |
待測物質(zhì)在樣本中含量低 | 使用新鮮樣本,重復(fù)實驗 |
人elisa檢測試劑盒
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【金益柏案例:常州老客戶呂老師訂兩盒ELISA試劑盒】
常州市客戶呂老師一直是我南京金益柏的老客戶,之前在南京金益柏訂購了好幾次ELISA試劑盒,由于產(chǎn)品確實不錯,ELISA試劑盒也具備高靈敏性,能夠便于測試出數(shù)據(jù)。
所以這次呂老師上線后就直接找我們南京金益柏的李經(jīng)理訂購elisa試劑盒,呂老師要訂購的ELISA試劑盒一個是人TNF-a ELISA試劑盒和人IL10 ELISA試劑盒,都是10塊板子,確定貨期2-3周之后,呂老師就下單了,出于信任,呂老師從金益柏訂購了許多做實驗要用的ELISA試劑盒,我們的質(zhì)量有保障,售后完全!
人C肽Elisa試劑盒,(C-Peptide)Elisa試劑盒 進口分裝原裝,歡迎新老客戶前來咨詢。
Elisa試劑盒實驗規(guī)則: YS00790B 人C肽Elisa試劑盒,(C-Peptide)Elisa試劑盒 Human C-Peptide ELISA Kit YS00791B 人絨毛膜促性腺激素Elisa試劑盒,(HCG)Elisa試劑盒 Human Chorionic Gonadotrophin,HCG ELISA Kit YS00792B 人絨毛膜促性腺激素βElisa試劑盒,(β-HCG)Elisa試劑盒 Human Chorionic Gonadotrophin β,β-HCG ELISA Kit YS00793B 人促黃體激素Elisa試劑盒,(LH)Elisa試劑盒 Human luteotropic hormone,LH ELISA Kit YS00794B 人前列腺素F2αElisa試劑盒,(PGF2α)Elisa試劑盒 Human Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit YS00795B 人伴侶蛋白10Elisa試劑盒,(CPN10)Elisa試劑盒 Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit YS00796B 人胎盤核糖核酸抑止劑Elisa試劑盒,(HPRI)Elisa試劑盒 Human placental ribonuclease inhibitor,HPRI ELISA Kit YS00797B 人胎盤蛋白Elisa試劑盒,(PP)Elisa試劑盒 Human placental protein,PP ELISA Kit YS00798B 人胎盤催乳素Elisa試劑盒,(HPL)Elisa試劑盒 Human placenta lactogen,HPL ELISA Kit YS00799B 人孕酮受體Elisa試劑盒,(PGR)Elisa試劑盒 Human progesterone receptor,PGR ELISA Kit YS00800B 人新生兒促甲狀腺素Elisa試劑盒,(N-TSH)Elisa試劑盒 Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone,N-TSH ELISA Kit
1、要移液槍的性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
10、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可保存。
12、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
13、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
15、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。
16、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
17、應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能數(shù)據(jù)的性。
18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。
公司提供免費代測服務(wù),歡迎技術(shù)咨詢:人C肽Elisa試劑盒,(C-Peptide)Elisa試劑盒
本公司專業(yè)提供“人C肽elisa試劑盒”試劑盒,產(chǎn)品種類齊全,質(zhì)量保證,提供:
售前:為客戶提供全面技術(shù)咨詢服務(wù)并提供說明書,任何咨詢都會細心答復(fù),無論購買與否。
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人C肽elisa試劑盒選擇
◎試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
◎靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的最低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
◎特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽性,所以交叉反應(yīng)是評價其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。
◎精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍。
◎準(zhǔn)確度:通過添加回收實驗進行評價。
◎簡便性:指在不影響試劑的前三項指標(biāo)的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。
◎安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
◎經(jīng)濟性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進步降低成本,而市場價格比較合理。
◎試劑評價:需要有權(quán)威的確證方法和確證的樣品進行檢測。
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人C肽elisa試劑盒參數(shù):
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F3093-B | 人C肽elisa試劑盒 | Human C-Peptide elisa Kit | 96T |
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F3093-B | 人C肽elisa試劑盒 | Human C-Peptide elisa Kit | 96T |
人C肽elisa試劑盒廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中,我們來介紹一下更簡便的操作說明,編號:F3093-B,英文名稱Human C-Peptide elisa Kit
1、人C肽elisa試劑盒操作方法一用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。 (2).加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。 (3).加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。 (4).加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。 (5).終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
2、人C肽elisa試劑盒操作方法二:用于檢測未知抗體的間接法: (1).用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 (2).加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)(3).于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。 (4).于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘 (5).于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。 ELISA是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡便、結(jié)果判斷較客觀等因素,以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗又可以用于少量標(biāo)本的檢測,既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點,已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)和細胞因子等領(lǐng)域。
3、臨床標(biāo)本的收集和保存 用于ELISA測定的臨床標(biāo)本最為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4~6點之間,會有一峰值出現(xiàn):生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,因此,在測定此類激素時,有必要在密切相連的時間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本,以其中間值為測定值。又如當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r,血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高。再如治療藥物的檢測,應(yīng)根據(jù)藥代動力學(xué)選擇服藥后的最適時間抽血檢測。用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等的檢測的血清標(biāo)本的收集則沒有時間和體位方面的影響,只是在處理和保存方面要考慮。
(1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。(3)血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70℃以下。(4)冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。(5)標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。
4、試劑準(zhǔn)備 在臨床實驗室,對試劑準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準(zhǔn)備最為關(guān)鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。此外,當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時,則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時配制。
三、加血清樣本及反應(yīng)試劑在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是唯一的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。
四、溫育溫育是ELISA測定中影響測定成敗最為關(guān)鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時間相對較短。最為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是臨床ELISA測定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時間為37℃ 30分鐘~1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃ 1~2小時才能有較完全的結(jié)合,低于1小時,可能會影響測定下限。因此,關(guān)于溫育,在實際測定操作中一定要注意以下幾點:要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時間。一般來說,加完樣本和/或反應(yīng)試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實驗室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計時,這樣就很容易造成實際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中,測定由衛(wèi)生部臨床檢驗中心供應(yīng)的1 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因為何?這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實驗室可自行確定本實驗室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達到37℃,從而適當(dāng)延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計放置板孔反應(yīng)溶液中測量觀察即可。