人C肽Elisa試劑盒Elisa試劑盒 ,Elisa試劑盒,Elisa試劑盒價(jià)格,Elisa試劑盒說明書,Elisa試劑盒技術(shù)咨詢,Elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)。
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人C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 |
人C型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒 |
人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒 |
人DAB2互作蛋白(DAB2IP)ELISA試劑盒 |
人DC-STAMP域包含蛋白2(DCST2)ELISA試劑盒 |
人Dicer-1酶ELISA試劑盒 |
人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒 |
人Dickkopf 3(DKK3)ELISA試劑盒 |
人DnaJ同源亞科B成員1(DNAJB1/DNAJ1/HDJ1/HSPF1)ELISA試劑盒 |
人DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒 |
人DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)ELISA試劑盒 |
人DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子4樣蛋白(DDIT4/RTP801)ELISA試劑盒 |
人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 |
人D-乳酸ELISA試劑盒 |
人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒 |
人E3泛素蛋白連接酶TRIM68(TRIM68)ELISA試劑盒 |
人E3泛素蛋白連接酶TRIM68(TRIM68)抗體ELISA試劑盒 |
人EB病毒(Ebv)抗體(IgM)ELISA試劑盒 |
人EB病毒IgA(EBv IgA)ELISA試劑盒 |
人EB病毒IgG(EBv IgG)ELISA試劑盒 |
人EB病毒核抗原3A抗體(IgG)ELISA試劑盒 |
中文名稱:(C-Peptide)人C肽Elisa試劑盒
英文名稱:Human C-Peptide ELISA Kit
品牌:美國(guó)RB/RD/IBL
包裝規(guī)格:48T/96T
Y10790A | (C-Peptide)人C肽Elisa試劑盒 | Human C-Peptide ELISA Kit |
Y10791A | (HCG)人絨毛膜促性腺激素Elisa試劑盒 | Human Chorionic Gonadotrophin,HCG ELISA Kit |
Y10792A | (β-HCG)人絨毛膜促性腺激素βElisa試劑盒 | Human Chorionic Gonadotrophin β,β-HCG ELISA Kit |
Y10793A | (LH)人促黃體激素Elisa試劑盒 | Human luteotropic hormone,LH ELISA Kit |
Y10794A | (PGF2α)人前列腺素F2αElisa試劑盒 | Human Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit |
Y10795A | (CPN10)人伴侶蛋白10Elisa試劑盒 | Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit |
Y10796A | (HPRI)人胎盤核糖核酸抑止劑Elisa試劑盒 | Human placental ribonuclease inhibitor,HPRI ELISA Kit |
Y10797A | (PP)人胎盤蛋白Elisa試劑盒 | Human placental protein,PP ELISA Kit |
Y10798A | (HPL)人胎盤催乳素Elisa試劑盒 | Human placenta lactogen,HPL ELISA Kit |
Y10799A | (PGR)人孕酮受體Elisa試劑盒 | Human progesterone receptor,PGR ELISA Kit |
人C肽Elisa試劑盒,C-Peptide試劑盒 ,現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量可靠,任何質(zhì)量問題可包退包換,提供技術(shù)支持,售后服務(wù),提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。詳情請(qǐng)來電咨詢。
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人C肽Elisa試劑盒,C-Peptide試劑盒 ,計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實(shí)際濃度。
人C肽Elisa試劑盒,C-Peptide試劑盒 ,注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好
控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)
算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
部分相關(guān)試劑盒如下:
大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)Elisa試劑盒
大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原14(sCD14)Elisa試劑盒
大鼠多巴胺D2受體(D2R)Elisa試劑盒
大鼠白細(xì)胞分化抗原44(CD44)Elisa試劑盒
大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)Elisa試劑盒
大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)Elisa試劑盒
大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)Elisa試劑盒
大鼠白介素2受體(IL-2R)Elisa試劑盒
大鼠β羥丁酸(βOHB)Elisa試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)Elisa試劑盒
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)Elisa試劑盒
大鼠網(wǎng)膜素(omentin)Elisa試劑盒
大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)Elisa試劑盒
大鼠淋巴細(xì)胞因子Elisa試劑盒
大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)Elisa試劑盒
大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)Elisa試劑盒
大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)Elisa試劑盒
大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)Elisa試劑盒
大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)Elisa試劑盒
大鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)Elisa試劑盒
大鼠白介素27(IL-27)Elisa試劑盒
大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)Elisa試劑盒
大鼠P53(P53)Elisa試劑盒
大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)Elisa試劑盒
大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 Elisa試劑盒
大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)Elisa試劑盒
大鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)Elisa試劑盒
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)Elisa試劑盒
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)Elisa試劑盒
大鼠胰高血糖素樣肽1(Glp-1)Elisa試劑盒
大鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)Elisa試劑盒
大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)Elisa試劑盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個(gè)月
人C肽Elisa試劑盒,C-Peptide試劑盒 ,操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
1600 pmol/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
800 pmol/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
400 pmol/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200 pmol/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100 pmol/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣稀釋液40μl,
然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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本公司專業(yè)提供“人C肽elisa試劑盒”試劑盒,產(chǎn)品種類齊全,質(zhì)量保證,提供:
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人C肽elisa試劑盒選擇
◎試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
◎靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的最低量的能力;2)為試劑對(duì)大量樣品中陽性檢出的能力。
◎特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測(cè)物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測(cè)定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽性,所以交叉反應(yīng)是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。
◎精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍。
◎準(zhǔn)確度:通過添加回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。
◎簡(jiǎn)便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下,實(shí)驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好,在定性實(shí)驗(yàn)中結(jié)果判斷簡(jiǎn)單明了,定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡(jiǎn)單。
◎安全性:指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
◎經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本,而市場(chǎng)價(jià)格比較合理。
◎試劑評(píng)價(jià):需要有權(quán)威的確證方法和確證的樣品進(jìn)行檢測(cè)。
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(C-Peptide)人C肽Elisa試劑盒
上海亨代勞科技有限公司是國(guó)內(nèi)生物試劑權(quán)威的供應(yīng)商之一,主要從事實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。并代理銷售多個(gè)國(guó)外知名品牌,致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供一流的科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù)。歡迎來電咨詢!
(C-Peptide)人C肽Elisa試劑盒
主要經(jīng)營(yíng)ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體等。供應(yīng)各種Elisa試劑盒種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、 馬、牛、羊、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、雞、鴨、人、魚等。點(diǎn)我咨詢!??!
(C-Peptide)人C肽Elisa試劑盒
人C-Peptide elisa試劑盒價(jià)格,北京人C肽ELISA試劑盒廠家
產(chǎn)品別名:人C肽ELISA試劑盒
英文名稱:Human C-Peptide ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
產(chǎn)品用途:科研ELISA檢測(cè)試劑盒.本公司可提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù).
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保存條件:2-8℃
聯(lián)系方式:010-57269780
聯(lián) 系 人:劉經(jīng)理
服務(wù)承諾:工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)的技術(shù)咨詢和指導(dǎo),為客戶提供來樣檢測(cè)服務(wù),最大限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。
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人血清促甲狀腺素TSH(紙片法),方法:CT (進(jìn)口原料),標(biāo)準(zhǔn)范圍:5-180μIU/ml,反應(yīng)溫度及時(shí)間:室溫20-24小時(shí)ф6mm,加樣量:1片E.C.MUG,100,供飲用水及食品熒光法檢測(cè)用130112,二甲基亞砜,標(biāo)準(zhǔn)品,供殘留溶劑檢查用,常溫,避光,氨曲南紙片(君刻單),20,人可溶性白細(xì)胞分化抗原21(CR2/sCD21)Elisa試劑盒價(jià)格 ,Human Soluble Cluster of differentiation 21,sCD21 ELISA試劑盒,96T/48T人sICAM-1低價(jià)格Elisa試劑盒說明書,96T/48T,HumanSolubleIntercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISA試劑盒大鼠促黃體激素 LH價(jià)格Elisa試劑盒現(xiàn)貨,Rat luteotropic hormone,LH ELISA試劑盒,96T/48T保質(zhì)量,人肌紅蛋白(MYO/MB)Elisa試劑盒,Human Myoglobin,MYO/MB ELISA試劑盒,96T/48T大鼠OT/BGP價(jià)格Elisa試劑盒,96T/48T,RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒E-0398,異麥角甾苷,標(biāo)準(zhǔn)品,Isoacteoside,≥98%GMS10238 .5, 載玻片細(xì)胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒,10/20次小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)Elisa試劑盒現(xiàn)貨,Mouse 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA試劑盒 ,96T/48T人γ氨基丁酸 GABA價(jià)格Elisa試劑盒現(xiàn)貨 ,Human Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA試劑盒 ,96T/48TCAS:145-42-6,牛磺膽酸鈉/牛膽酸鈉/牛膽酸鈉鹽/Sodium taurocholate hydrate,BR,97%,25克,RTGMS70029.5,細(xì)胞培養(yǎng)液低密度脂蛋白膽固醇(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒,20次CAS:96-81-1,N-乙酰-L-纈氨酸/L-2-乙酰氨基-3-甲基丁酸/N-乙?;?L-穿心排草氨基酸/N-乙?;?L-纈氨酸/N-Acetyl-L-Valine,BR,98%,5克,RT木質(zhì)素磺酸鈣CAS:8061-52-7,Calciumlignosulfonate,產(chǎn)品已被廣泛用做水泥減水劑、農(nóng)藥懸浮劑、陶瓷坯體增強(qiáng)劑、水煤漿分散劑、皮革鞣革劑、耐火材料結(jié)合劑、炭黑造粒劑等.,96%GMS22021.1,內(nèi)皮素受體A(endothelin receptor A),鄰苯二甲酰CAS:88-95-9,Phthaloylchlorid,對(duì)濕度敏感,遇水、醇分解,密封避光保存。有機(jī)合成中間體,9bsm-0356M,小鼠抗單克隆抗體價(jià)格,Anti-Digoxin(MouseAnti-DigoxinMonoclonal),Anti-Digoxin(MouseAnti-DigoxinMonoclonal)編號(hào):bs-0735R,成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-8/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-8抗體,Anti-FGF-8/HBGF-8(Fibroblastgrowthfactor8),規(guī)格:0.1ml/0.2ml,GMS12383,臺(tái)桌清潔劑(飯桌、工作臺(tái)、學(xué)生課桌椅等),500毫升/瓶CAS:81-64-1,1,4-二羥基蒽醌/1,4-二羥基-9,10-蒽二酮/醌茜/奎札因/1,4-蒽醌二酚/透明橙G/溶劑橙86 1,4-Dihydroxyanthraquinone,BR,96%,25克,RT2,3-二巰基丙磺酸鈉鹽CAS:207233-91-8,DMPS)Sodium2,3-dimercaptopropanesulfonatemo,儲(chǔ)存溫度:2-8℃,95%CAS:115186-31-7,Boc-D-Lys(Fmoc)-OHBoc-D-,98%編號(hào):bs-1118R,細(xì)胞粘合素抗體,Anti-Tenascin/TN,Anti-Tenascin/TNN-芐氧羰基-L-谷氨酸CAS:1155-62-0,N-(Carbobenzyloxy,用于生化試劑,多肽合成,98%15ml細(xì)口瓶快速H-E組織細(xì)胞及脫落細(xì)胞染液,10ml×4,胞苷-5'磷酸CAS:63-37-6,CMP),Cytidine5'-monophos,儲(chǔ)存溫度2-8°C,用于生化研究,98%96T/48T,犬維生素K1ELISA試劑盒,(VK1)Elisa試劑盒CanineVitaminK1,VK1ELISA試劑盒仲丁醇CAS:78-92-2,2-Butanol,密封保存。制備丁酮,有機(jī)合成,溶劑,油脂萃取劑,香料制造,GCS,≥99.8%(GC)表面抗體 (Anti-HBs),標(biāo)準(zhǔn)范圍:10—600mIU/ml,加樣量:37℃1小時(shí),反應(yīng)時(shí)間:48T卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂,250,用于化妝品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定,本品已加入卵磷脂.臨用時(shí)需加入吐溫80(GB標(biāo)準(zhǔn))保質(zhì)量,豬白介素1(IL-1)Elisa試劑盒,Porcine Interleukin 1,IL-1 ELISA試劑盒,96T/48TGMS12233.3,PH3-4顯色(METHYL ORANGE)指示溶液 ,50毫升
l 本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人C肽(C-P)的含量。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人C肽(C-P)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人C肽(C-P)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
樣本處理及要求
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
標(biāo)本處理
1. 本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé),不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
2. 實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高,應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
3. 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性,并注意留存樣本。
4. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
5. 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測(cè)不出的情況。
6. 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測(cè)出。
7. 建議使用新鮮樣本,保存時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
試劑盒組成
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 8孔×12條 | 8孔×6條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無 |
備注:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度:詳情來電咨詢
2. 經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過最大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
操作流程
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。
說明
1. 由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。
2. 最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。
3. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別,如:檢測(cè)限、靈敏度以及顯色時(shí)間等,請(qǐng)依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。
4. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到最佳的檢測(cè)結(jié)果。
常見問題
若實(shí)驗(yàn)效果不好,請(qǐng)及時(shí)對(duì)顯色結(jié)果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時(shí)您也可以參考以下資料:
問題 | 可能原因 | 解決方案 |
標(biāo)準(zhǔn)曲線差 | 吸取及洗滌不充分 | 充分的吸取及洗滌 |
移液不精確 | 檢查和校正移液器 | |
精密度低 | 洗滌不充分 | 按說明書要求充分洗滌和浸泡 |
混勻不充分和吸取試劑不足 | 充分混勻和吸取試劑 | |
重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜 | 使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜 | |
加樣不精確 | 檢查和校正移液器 | |
O.D值低 | 每孔加的試劑量不精確 | 校正移液器,精確加入試劑 |
溫育時(shí)間不正確 | 保證充足的溫育時(shí)間 | |
溫育溫度不正確 | 試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度 | |
酶標(biāo)記物或底物失效 | 通過混合酶標(biāo)記物和底物,顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查 | |
沒有加入終止液 | 按照說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟加入終止液 | |
超出讀數(shù)時(shí)間讀數(shù) | 在說明書推薦的讀數(shù)時(shí)間內(nèi)讀數(shù) | |
樣本值 | 不正確的樣本儲(chǔ)存方式 | 正確儲(chǔ)存樣本,使用新鮮樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn) |
不正確的樣本收集和處理方法 | 采取正確的樣本收集和處理方法 | |
待測(cè)物質(zhì)在樣本中含量低 | 使用新鮮樣本,重復(fù)實(shí)驗(yàn) |