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Elisa試劑盒規(guī)格:96T/48T
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Elisa試劑盒的原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
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白介素試劑盒,人白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒 人elisa試劑盒 進口ELISA試劑盒 ELISA檢測試劑盒上海遠慕生物科技有限公司專業(yè)試劑盒供應(yīng)商,代理商!【中文名稱】:人白介素10(IL-10)elisa試劑盒
【英文名稱】:HumanInterleukin10,IL-10ELISA Kit
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T。
【產(chǎn)品貨號】:YM-S0066。
【試劑盒成分】:酶標板,試劑,標準品等ELISA試劑盒檢測范圍:人、綿羊、山羊、牛、馬、小鼠、大鼠、豬、兔、其它動物細胞因子、植物細胞因子、細胞凋亡、活性多肽、自身抗體、血栓與止血、骨代謝、肝纖維化、腫瘤、激素內(nèi)分泌、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。
主要用于科研方面,不用于臨床診斷。可以用于檢測各種指標。
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白介素試劑盒,人白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒的若干特點:專一性強:抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。靈敏度高:由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。樣品易保存:經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
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人白介素10(IL-10)elisa試劑盒 參數(shù):
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F2369-A | 人白介素10(IL-10)elisa試劑盒 | Human Interleukin 10,IL-10 elisa KIT | 48T |
人白介素10(IL-10)elisa試劑盒 技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測 定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng) 而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行 定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。
主要優(yōu)點1、簡易操作、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;5、節(jié)省實驗經(jīng)費。
使用方法1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng) 在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗 滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3. 加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于 450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。操作步驟2:間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
應(yīng)用信息ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴大,可概括四個方面:1、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。編輯本段進口分裝進口分裝:檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。試劑盒的標準曲線最高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標準曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細胞因子,已被證實為B細胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報道多種疾病的生長因子為白介素-6, 骨髓瘤細胞能合成白介素-6并表達白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測小鼠血清和細胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測范圍 10.94 700 pg/mL [2]預(yù)期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細胞上清中白介素-6的定量檢測試劑盒成分1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標記抗體: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)[3]
注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標準品孔第一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 個月
英文名稱:Bovine Baijie element 10 (IL-10) ELISA Kit主要成分:酶標板,試劑,標準品等。規(guī)格:96T/孔、48T/孔檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書。保存溫度:低溫保存,詳情可來電。牛白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:①標本因素;②試劑因素;③操作因素。ELISA檢測試劑盒等公司產(chǎn)品滿足于生物化學(xué)、分子生物學(xué) 、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物實驗需求,不用于臨床診斷。歡迎來電了解更多詳情。中國老牌ELISA試劑盒供應(yīng)商-江萊生物,期待您的來電。更多詳情請登陸www.laibio.com,咨詢我司專業(yè)技術(shù)人員。牛白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 為您精選同類產(chǎn)品:
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保存溫度:-20℃低溫保存,避免反復(fù)凍融。規(guī)格:0.1ml/0.2ml保質(zhì)期:12個月,本公司試劑產(chǎn)品均為最新批次,請放心購買!價格:點此聯(lián)系我公司銷售人員。
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CAS:6590-95-0,2,6-二氯異硫氰酸苯酯,純度:98%,規(guī)格:1gCAS:27355-22-2,熱必斯,英文名稱:Fthalide霉菌滴蟲培養(yǎng)基試劑盒,規(guī)格:20Tbs-0994R,抗豬水腫素(O139)抗體價格,Anti-SLT/SLT-IIe(O139)(Shiga-LikeToxinTypeIIVariant),Anti-SLT/SLT-IIe(O139)(Shiga-LikeToxinTypeIIVariant)CAS:5508-58-7,穿心蓮內(nèi)酯/穿心蓮乙素英文名:Andrographolide,純度:≥98%TRITC標記兔抗羊IgG(H+L)價格,英文名稱:TRITC-conjugatedRabbitanti-GoatIgG(H+L),二抗形式:IgG,標記類型:TRITC標記,規(guī)格:1mg98967-40-9,唑嘧磺草胺,標準品,2′,6′-difluoro-5-methyl(1,2,4)triazolo(1,5-a)pyrimidine-2-sulfonanilide,是一種廣譜性除草劑。CAS:13462-90-3,碘化鎳,英文名稱:Nickel(II)iodideCAS:77-55-4,1-苯基環(huán)戊烷羧酸,純度:98%,規(guī)格:5gCAS:133605-2,2-Nitro-4-(trifluoromethyl)benzylalcohol,規(guī)格:CAS:4316-74-9,無水N-甲基牛黃酸鈉,純度:98%,規(guī)格:50g433-06-7|2,2,2-三氟對磺酸乙酯,產(chǎn)品名稱:222-三氟對磺酸乙酯CasNo:433-06-7分子式:C9H9F3O3S分子量:25423含量:98%2,4,5-三羥基苯甲醛CAS:35094-87-2,Trihydroxybenzaldehyde,CAS:122-79-2價格,乙酸苯酯價格,250g薯蕷皂苷,英文名稱:Diosgenin,檢測方法及純度:HPLC≥98%規(guī)格:20mg/支醋酸鈉,三水2.5KG價格,包裝:2.5KG883546-16-5|4-溴-1-氯-3,5-二氟苯,產(chǎn)品名稱:4-溴-1-氯-35-二氟苯CasNo:883546-16-5分子式:C6H2BrClF2分子量:2274338864含量:CAS:1155-62-0,N-芐氧羰基-L-谷氨酸,純度:99%,規(guī)格:10gNPTII基因檢測試劑盒Ⅰ,轉(zhuǎn)基因馬鈴薯中NPTll基因的檢測...CAS:7758-99-8價格,五水合硫酸銅(II)價格,25kg
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兔子白介素10 ELISA試劑盒價格,現(xiàn)貨兔IL-10試劑盒開學(xué)特價迎開學(xué),大促銷!特價低價,廠家價格,可以享受特價/折上折等優(yōu)惠!期待您的來電:【elisa試劑盒訂購熱線】電話:15810802415 座機: QQ:
產(chǎn)品別名:綿羊白介素10(IL-10) 檢測試劑盒,綿羊白介素10(IL-10) 酶聯(lián)免疫分析試劑盒
英文縮寫:IL-10 Elisa Kit
規(guī)格96T/48T
存儲條件:2-8℃ 避光儲存
有效期:6個月(可接受預(yù)定)
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床
綿羊白介素10(IL-10)elisa試劑盒等ELISA試劑盒操作技術(shù)相關(guān)的注意事項:
⑴ 嚴格按照綿羊白介素10(IL-10)elisa試劑盒說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。
(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后最好在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至最低限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實驗結(jié)果。
綿羊白介素10(IL-10)elisa試劑盒實驗數(shù)據(jù)處理方法:
如果是新的數(shù)據(jù),你只要雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。根據(jù)曲線方程式,計算出濃度。
方法:
1、擬和曲線:
輸入第一行: 濃度值, 如0 10 50 100 400
輸入第二行:該濃度下的調(diào)整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數(shù)據(jù),用插入里的圖表按鈕,進入圖表向?qū),?ldquo;標準類型”中選擇“xy散點圖”;在“子圖表類型”中選擇“折線散點圖”,按“下一步”;選擇“系列產(chǎn)生在行”,按“下一步”;數(shù)據(jù)標志,可以填寫:如數(shù)據(jù)y軸,OD值;數(shù)據(jù)x軸,濃度;按下一步,點擊完成?傻们圖。
單擊曲線,按右鍵,選擇“添加趨勢線”,在類型中,選擇多項式;在選項中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說的方法: 雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。
2、計算濃度:
第一次實驗:
標準曲線為:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例,已知OD值,計算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,所以可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
a=4E-05;b= -0.026;
x=(-b-(b*b-4ay)(平方根)) /(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)
綿羊白介素10(IL-10)elisa試劑盒數(shù)據(jù)計算通用公式為:
x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)
您可以應(yīng)用excel的公式拷貝功能,計算所有濃度
豬白介素10(IL-10)elisa試劑盒 參數(shù):
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F4872-A | 豬白介素10(IL-10)elisa試劑盒 | PoFAine interleukin 10,IL-10 elisa Kit | 48T |
豬白介素10(IL-10)elisa試劑盒 技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。
主要優(yōu)點1、簡易操作、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;5、節(jié)省實驗經(jīng)費。
使用方法1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3. 加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。操作步驟2:間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
應(yīng)用信息ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴大,可概括四個方面:1、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。編輯本段進口分裝進口分裝:檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。試劑盒的標準曲線最高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標準曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種細胞因子,已被證實為B細胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生長刺激等,也備受關(guān)注. 并且已證實白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報道多種疾病的生長因子為白介素-6, 骨髓瘤細胞能合成白介素-6并表達白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測小鼠血清和細胞基質(zhì)上清的白介素6 原理 此試劑盒運用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測范圍 10.94 700 pg/mL [2]預(yù)期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細胞上清中白介素-6的定量檢測試劑盒成分1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標記抗體: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)[3]
注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標準品孔第一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 個月
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
簡介: 產(chǎn)品名稱:人白介素10(IL-10)elisa試劑盒96T/48T 英文名稱:Human IL-10 (Interleukin 10) ELISA Kit 種屬:Human/人 品牌:EK-Bioscience 貨號:EK-H10313 規(guī)格:96T/48T 價格:請QQ或電話與客服聯(lián)系獲取報價 貨期:現(xiàn)貨 保質(zhì)期:6個月 參數(shù)規(guī)格 中文名稱 | English name | 96T/48T 含量 | 保存 |
ELISA酶標板(可拆卸) | Microelisa stripplate | 8×12 / 8×6 * | 2-8℃ |
標準品 | Standard | 1瓶 0.5ml * | 2-8℃ |
標準品稀釋液 | Standard diluent | 1 瓶 1.5ml * | 2-8℃ |
酶標試劑 | HRP-Conjugate reagent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
樣品稀釋液 | Sample diluent | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
顯色劑 A 液 | Chromogen Solution A | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
顯色劑 B 液 | Chromogen Solution B | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
終止液 | Stop Solution | 1 瓶 6 ml/3ml * | 2-8℃ |
濃縮洗滌液 | wash solution | 1 瓶20ml * | 2-8℃ |
說明書 | Instruction | 1份 * |
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封板膜 | Closure plate membrane | 2 片 * |
|
密封袋 | Sealed bags | 1個 * |
|
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5. 培養(yǎng)細胞:檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
7. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
試驗所需自備物品:
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙5.人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒96T/48T操作流程
計算人白介素10(IL-10)ELISA試劑盒96T/48T濃度
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
This kit is for in vitro research use, not for clinical diagnosis!
Ek-Bioscience EK-H10894 人核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10963 人基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP-25)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10787 人谷氨酸脫羧酶抗體(GAD-Ab/Anti-GAD)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10118 人III型膠原α1(COL3α1)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11200 人磷酸化Tau蛋白(pMAPT/pTAU)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10319 人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10976 人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素(MAT)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11899 人血管生成素(ANG)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10846 人過氧化還原酶1(PRDX1)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11331 人凝血因子Ⅷ(F8)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11816 人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10055 人C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11051 人接觸蛋白相關(guān)蛋白樣蛋白2(CNTNAP2)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H12425 人左旋肉堿(L-Carnitine)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10314 人白介素10受體β(IL10Rβ)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10151 人N-甲基-D-天氡氨酸離子能谷氨酸受體2B(GRIN2B)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10465 人補體因子H相關(guān)蛋白5(CFHR5)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H10779 人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11093 人巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11408 人趨化素樣因子超家族成員4(CKLFSF4)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H11723 人胃內(nèi)因子(GIF)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H12037 人抑制蛋白β1(ARRβ1)ELISA試劑盒
Ek-Bioscience EK-H12351 人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒
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