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 樣品類型 血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清等樣品類型 檢測方法 酶聯(lián)免疫法

 特 異 性 公司ELISA試劑盒具有較高的靈敏度和出色的特異性交叉反應 由于當前的酶聯(lián)免疫科學技術和知識有限，現(xiàn)有技術不可能完成藥物檢測的靶抗原之間和所有其他物種的類似物。因此，交叉反應可能仍然存在 樣 本 量  50-100 μL  實驗時間  1–4.5h  儲存條件  2-8°C  儲存方法 可以存儲在2 - 8°C長達1個月（專家建議：4°C恒溫保存，酶免試劑盒實驗效果更佳）。對于長期存儲,在-20°C的存儲。盡量保持試驗板在密封鋁箔袋，避免潮濕 有 效 期  6 months 工作原理人角化細胞內分泌因子(KAF)elisa試劑盒的原理　　ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。產品選型人角化細胞內分泌因子(KAF)ELISA試劑盒的類型　　ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑：（1）固相的抗菌素原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；（2）酶標記的抗原或抗體，稱為"結合物"（conjugate）；（3）酶反應的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件，可設計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型：雙抗體夾心法測抗原操作流程雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法，操作步驟如下：（1） 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結，形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。（2） 加受檢標本，保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合，形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。（3） 加酶標抗體，保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。（4） 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色，測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中，此法適用于檢驗各種蛋白質等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標用的抗體最好分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體，一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應，作一步檢測。　　在一步法測定中，當標本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合，而不再形成"夾心復合物"。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，此時反應后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標準曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同（參見1.3.2，圖1-4），如按常法測讀，所得結果將低于實際的含量，這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應（hook effect），因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時，反應甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）時，應注意可測范圍的最高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。　　假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇，例如HBsAg的a決定簇，也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型問題，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型，雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應性，這也是用單抗作夾心法應注意的問題。　　雙抗體夾心法測抗原的另一注意點是類風濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗體，多為IgM型，能和多種動物IgG的Fc段結合。用作雙抗體夾心法檢測的血清標本中如含有RF，它可充當抗原成份，同時與固相抗體和酶標抗體結合，表現(xiàn)出假陽性反應。采用F（ab＇）或Fab片段作酶結合物的試劑，由于去除了Fc段，從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響，已被列為這類試劑的一項考核指標。　　雙抗體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。應用領域人角化細胞內分泌因子(KAF)ELISA試劑盒的試劑準備按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。 ELISA 中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH 計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。試劑的準備之加樣在 ELISA 中一般有3 次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法 ELISA)需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩 1 分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。

                 硝基呋喃類藥物因有非常好的抗菌作用和藥動力學的特性，曾經被廣泛應用，作為禽類、水產和豬促生長的添加劑。但在長時間的實驗研究過程中發(fā)現(xiàn)，硝基呋喃類藥物和代謝物均可以使實驗動物發(fā)生癌變和基因突變，正因為如此才導致此類藥物禁止在治療和飼料中使用。呋喃它酮在1995年被禁用。

        用來檢測呋喃它酮代謝物的最常用方法是LC-UV，LC-MS和LC-MS/MS。酶聯(lián)免疫方法結合了色譜技術，采用AMOZ衍生物的特異性抗體，具有很高的精確度和靈敏度，較低的操作技術要求和短暫的檢測時間，檢測樣品量大等特點在檢測中很好的表現(xiàn)出來。

        本試劑盒是應用ELISA技術研發(fā)而成的檢測產品，能最大限度地減少操作誤差和工作強度。

    試驗原理

       本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在酶標板微孔條上預包被呋喃它酮代謝物抗原，樣品殘留的呋喃它酮代謝物和微孔條上預包被的抗原競爭抗呋喃它酮代謝物抗體，加入酶標二抗后，經TMB底物顯色，樣品吸光度值與其殘留物呋喃它酮代謝物呈負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中呋喃它酮代謝物的含量。

    關鍵參數(shù)

試劑盒靈敏度：0.1ppb

樣品最低檢測限： 0.2ppb

回收率： 85±10%

精密度：試劑盒的變異系數(shù)均小于10%。

交叉反應率：

藥物名稱        

交叉反應率

呋喃唑酮代謝物

100％

呋喃它酮代謝物

<0.1%

呋喃西林代謝物

<0.1%

呋喃妥因代謝物

<0.1%

溫馨提示：不可用于臨床治療。詳細請咨詢：15370217635

Elisa供應科研人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA（α-Fodrin IgG/IgA）檢測試劑盒現(xiàn)貨,青島惟思生物所銷售的elisa試劑盒:品種多，質量好，靈敏度高，售后服務完整，并提供免費代檢測服務！想要了解更多關于價格、Elisa試劑盒品牌、Elisa試劑盒廠家、Elisa試劑盒說明書、Elisa試劑盒促銷信息，詳詢Elisa試劑盒專業(yè)客服QQ!【產品規(guī)格】96T/48T【產品保存】2~8℃低溫保存、有效期6個月【所需標本】血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等.【庫存狀態(tài)】現(xiàn)貨供應，訂單生成，立即安排發(fā)貨?！臼褂梅秶績H供科研使用，不得用于臨床。【產品用途】用于測定人血清、血漿、組織及相關液體樣本中的含量或活性?！緳z測種屬】大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬.ELISA試劑盒操作注意事項：(1).實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。(2).試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。(3).使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。(4).不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。(5).洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。(6).使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。(7).加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。(8).按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。(9).底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。青島惟思生物科技有限公司是一家專業(yè)從事生物技術產業(yè)銷售的科技公司，經營產品主要包括微生物培養(yǎng)基、對照品、標準品、標準菌株、ELISA試劑盒、測試片、血清、空白平皿、實驗室耗材等。公司致力于為食品、醫(yī)藥、化妝品、科研機構、學校、醫(yī)院、水質檢測機構等提供實驗室配套服務，我們將本著誠信為本、質量為先的原則，為廣大新老客戶提供最卓越的品質和最周到的服務。公司名稱：青島惟思生物科技有限公司公司地址：青島經濟技術開發(fā)區(qū)電話：0532-68976625/18562732709聯(lián)系人：王經理 QQ 公司郵箱：@sina.com

荷蘭ceditest 瑞士Prionics 華南總代理   廣州市瑞品生物技術有限公司

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瑞士Prionics牛布病布氏桿菌毒病抗體檢測試劑盒

簡介一些年來，荷蘭動物科學與健康研究所已經建立了控制和消除動物疾病的專門技術和知識體系。依靠對病因病理的基礎性研究，該組織為全球專門的實驗室和獸醫(yī)服務機構提供了病毒學、細菌學、寄生蟲學和免疫學科研工具。布氏菌病在世界各地均有發(fā)生，是一種人畜共患病，病原為布氏桿菌（革蘭氏陰性菌），這類細菌包含6種：牛B流產型，羊B.melitensis (3 biovars), 豬B. suis (5 biovars), B. ovis, 狗B. canis, B. neotomae ａnd B. maris. 牛是B流產型主要的宿主，，綿羊和山羊是B. melitensis的主要宿主。原則上講，布氏桿菌不同亞型感染動物，臨場癥狀有可比性，且都是繁殖障礙。例如，母畜的流產和不孕公畜的睪丸炎和附睪炎。人類感染布氏桿菌的癥狀是波浪熱，這對農民、實驗室工作人員和屠宰工作人員來說是相當危險的。特別是B. melitensis對人類有高度的致病性，是世界上人畜共患病最嚴重的病原之一。被污染的山羊奶酪已經被頻繁的報道說是感染原。現(xiàn)在已經發(fā)展了一些檢測布氏桿菌的血清學方法，膠合測試，補體反應和ELISA’s是應用比較廣泛的確認方法。所有檢測抗體都是針對滑型LPS O鏈的。無論使用那種檢測方法，都應該與注意革蘭氏陽性菌的交叉反應，如Francisella tularensis, Campylobacter, Salmonella,Pasteurella, Yersinia enterocolitica 0:9, Escherichia coli O:117 ａnd 0:156 。感染B流產型和B. melitensis后，會出現(xiàn)IgM抗體，緊跟著會出現(xiàn)IgG抗體（IgG1和IgG2）。本試劑盒就是檢測血清和牛奶中的IgG1抗體，且是一個經過Bercovich etal（1990）修正的檢測試劑盒，也符合歐盟64/432的指示標準。試劑盒有所有檢測是需要的試劑，可以檢測440個樣品或者220個重復的血清樣品。

參考文獻(1) Bercovich, Z. ａnd Taaijke, R. (1990) EnzymeImmunoassay using monoclonal antibodies for the detection of Brucella abortusantibodies in cow milk. J. Vet. Med. B 37, 735-759.(2) OIE Manual of standards for Diagnostics Test andVaccines, Fourth Edition, 2000.

應用本試劑盒是檢測牛、山羊、綿羊血清和牛奶樣品中布氏桿菌的有效手段。是動物健康免疫程序中檢測個體羊或牛布什桿菌抗體的決定性步驟。本試劑盒用來監(jiān)督、確認整個群體是否有布什桿菌病的發(fā)生。

檢測原理本試劑盒是用間接ELISA檢測感染牛、綿羊、山羊的布氏桿菌抗體。用超聲波降解的非活性的布氏桿菌抗原包被酶標板，加血清和牛奶樣品。測試樣品中存在流產型和melitensis抗體，孵化后就會和抗原反應。加帶有HRP的抗Ig的單克隆抗體酶標結合物，就會和抗原抗體結合物中的抗體反應。之后，加底物，如果檢測樣品中有特異性抗體出現(xiàn)，就會有顏色反應。每板中應使用3個對照血清樣品，分別為陽性、陰性、和一個弱陽性。這三個血清對照已經根據(jù)OIE規(guī)定的ELISA國際標準校對過了。樣品的OD值應該減去空白的OD值，對比1是檢測中最大的OD值，對比2應該是陰性的，pp<20%,對比3為弱陽性的，pp值應該20－45％。

一般評述如果沒有前面的注意事項，此說明書的一些內容很容易變化。但是此試劑盒自從公布之日起一直都是完整而精確的，所以對使用以上操作方法產生的結果負責。

試劑盒成分1) 酶標板5塊 5 testplates 2) 濃縮酶標記物，1瓶 conjugate(concentrated) 3) 陽性對照血清，1瓶 1 vial reference serum1(positive) 4) 陰性對照血清，1瓶 1 vial reference serum2(negative) 5) 弱陽性對照血清，1瓶1 vial reference serum(weak positive) 6) 濃縮稀釋緩沖液，1瓶 1 vial dilution buffer(concentrated) 7) 底物液，1瓶（直接使用）1 vial chromogen /substrate (ready to use) 8) 濃縮洗液，1瓶 1 vial washing fluid (concentrated) 9) 終止液，1瓶（直接使用）1 vial stop solution(ready to use) 10) 10個封口膜10 platesealers 

人甲肝病毒IgG抗體(HAVIgG)ELISA檢測試劑盒上海潤裕生物科技有限公司等科研產品，我公司ELISA試劑盒和免疫組化試劑盒產品質量可靠，ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析試劑盒)專業(yè)技術團隊提供免費代測服務及售后指導。所以生物試劑產品用于科研實驗領域，如有需要請直接來電或給我們留言（半個工作日內給您回復）。

歡迎來電索取產品報價，產品說明書，潤裕生物品質服務,真誠相伴！

主要成分:酶標板,試劑,標準品等

性狀：盒裝液體

ELISA試劑盒實驗標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

ELISA試劑盒種屬齊全：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

產品運輸方面：部分現(xiàn)貨供應，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時間到貨

2、檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

3、服務承諾：工作時間內免費技術咨詢和指導，提供來樣檢測及免費代測服務，保證實驗結果的有效性。

4、研究領域：炎癥研究、神經生物學、腫瘤研究、新陳代謝、信號通路、免疫學、傳染病、其他研究。

如果人甲肝病毒IgG抗體(HAVIgG)ELISA檢測試劑盒所檢測的樣本不是連續(xù)的，所以實驗中不用的板條立即放回包裝中，密閉封口，4℃可保存1個 月。其余不用試劑應包裝好或蓋好。在做樣本檢測前要有一個完整的計劃，如標本編號、所測項目、目的等。操作時盡量使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

主要分為以下系列：

1、細胞因子檢測試劑盒

2、內分泌檢測試劑盒

3、肝纖維化檢測試劑盒

4、心肌梗塞檢測試劑盒

5、腫瘤標志物檢測試劑盒

6、自身免疫檢測試劑盒

7、優(yōu)生優(yōu)育檢測試劑盒

8、傳染病檢測試劑盒等等。

人甲肝病毒IgG抗體(HAVIgG)ELISA檢測試劑盒操作步驟

方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

3.　加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

方法二　用于檢測未知抗體的間接法：

用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

人甲肝病毒IgG抗體(HAVIgG)ELISA檢測試劑盒注意事項

1.　正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

2.　在人甲肝病毒IgG抗體(HAVIgG)ELISA檢測試劑盒實驗中，選擇好各項ELISA實驗條件是很重要的，其中包括:

(1)　固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

(2) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的最適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1～10μg/ml。

(3)　酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。

(4)　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

凡購人甲肝病毒IgG抗體(HAVIgG)ELISA檢測試劑盒等潤裕生物ELISA試劑盒，標準品等試劑產品，公司專業(yè)技術團隊全程提供免費技術支持與指導，只需來樣即可為您免費代測，可測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量或者活性表達。潤裕生物專業(yè)為您提供ELISA試劑盒價格，規(guī)格，用途，說明書等操作說明詳情可來電咨詢，歡迎訂購。

IL-8試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-8濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將IL-8和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-8的濃度呈比例關系。

人 (Human) 白細胞介素-8（IL-8）ELISA 檢測試劑盒內容及其配制

自備材料

1． 蒸餾水。

2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

人 (Human) 白細胞介素-8（IL-8）ELISA 檢測試劑盒安全性

1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

1． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7． 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

1、 血清－－－－-操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿－－－－-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液－－-1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 保存－－－－－－如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備

1． 標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：

2． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。

2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案

人 (Human) 白細胞介素-8（IL-8）ELISA 檢測試劑盒局限

6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到精確的結果。

人 (Human) 白細胞介素-8（IL-8）ELISA 檢測試劑盒性能

1. 靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的IL-8標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IL-8含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍：0-800pg/ml

4、敏感度： 1.0 pg/ml